Transcript MKD

UNIVERSITA’
UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI TRIESTE
FACOLTA’
FACOLTA’ DI MEDICINA E CHIRURGIA
Dipartimento di Scienze della Riproduzione e dello Sviluppo
Direttore: Prof. A. Ventura
DOTTORATO DI RICERCA IN MEDICINA MATERNOMATERNO-INFANTILE
EFFETTO DI COMPOSTI ISOPRENOIDI
SUL FENOTIPO INFIAMMATORIO DEL
DIFETTO DI MEVALONATO CHINASI
(MKD)
Dottoranda:
Dott.ssa Annalisa Marcuzzi
Tutor:
Dott. Alberto Tommasini
Anno Accademico 2009-2010
Difetto di Mevalonato Chinasi
(MKD)
Difetto di Mevalonato Chinasi (MKD)
Autosomica recessiva
Malattia rara (200 casi registrati in www.hids.net)
Esordio precoce
Evento scatenante: vaccinazione, stress,
piccole infezioni
Episodi febbrili 3-5 gg ogni 2-12 wks
SINTOMATOLOGIA ASSOCIATA:
-Dolore addominale e/o vomito e/o diarrea
-Artralgia/artrite
-Linfoadenopatia
-Eritema cutaneo
-Afte orali
Sindrome da
Iper-ID
In alcuni casi più gravi coinvolgimento SNC
Mevalonico Aciduria
Malattia orfana di
trattamento
eziologico specifico
HMG-CoA reductase inhibition induces IL-1beta release through Rac1/PI3K/PKBdependent caspase-1 activation
Kuijk LM, Beekman JM, Koster J, Waterham HR, Frenkel J, Coffer PJ.
Blood. 2008 Nov 1;112(9):3563-73. Epub 2008 Aug 6.
Una minore produzione di isoprenoidi determina una carenza di geranil-
geranilazione che attiva la caspasi 1 (IL1β)
Obiettivi del progetto
Parte I
Costruire un modello malattia “in vivo” ed “in vitro” che
riproduca il fenotipo infiammatorio della malattia;
Parte II
Identificazione e valutazione di possibili interventi
farmacologici:
• isoprenoidi (GOH, FOH, GGOH, MOH)
• inibitori della farnesil transferasi (ManA,
Tipifarnib, Lonafarnib)
…per creare il modello malattia
MK
ALD
Parte I
Il trattamento con alendronato aumenta la
suscettibilità infiammatoria agli stimoli.
in vitro
h
LPS
IL-1
44
20
0
800
IL-1B pg/ml
ALD
**
1000
600
400
200
0
day
0
MDP
1
2
in vivo
3
SAA
ALD
LPS
ALD/LPS
MDP
ALD/MDP
**
150
SAA (g/ml)
ALD
Control
100
50
0
saline
ALD
Parte II
ISOPRENOIDI
Il GOH diminuisce la iper-suscettibilità infiammatoria
del nostro modello in vitro
1000
800
800
IL-1B pg/ml
IL-1B pg/ml
**
1000
600
400
200
**
600
400
200
0
0
Control
h
ALD
ALD
LPS
0
20
LPS
44
ALD/LPS
Control
h
ALD
LPS
ALD
LPS
0
20
GOH 10µM
ALD/LPS ALD/LPS
+GOH
44
… e lo stesso in vivo
ISOPRENOIDI
Parte II
**
**
150
SAA (g/ml)
SAA (g/ml)
150
100
50
0
saline
ALD
MDP
ALD/MDP
100
50
0
saline
ALD
MDP
ALD/MDP ALD/MDP
+GOH d0/1
GOH 250 mg/Kg
A. Marcuzzi et al. Inflammatory Research . 2010
A. Marcuzzi et al. International Immunopharmacology 2010
INIBITORI FARNESIL TRANSFERASI
Parte II
La ManA diminuisce la suscettibilità infiammatoria
indotta nel nostro modello in vitro
1000
**
**
1000
800
IL-1B pg/ml
IL-1B pg/ml
800
600
400
600
400
200
200
0
0
Control
ALD
LPS
ALD/LPS
control
0
20
LPS
ALD+LPS ManA ALD+LPS
+Man A
ALD LPS
ALD LPS
h
ALD
44
h
0
20
44
Man A: 10µM
Alcuni farmaci anti tumorali (Tipifarnib®, Lonafarnib ®) agiscono come inibitori della farnesil transferasi !!!
Parte II
INIBITORI FARNESIL TRANSFERASI
… e lo stesso in vivo
**
**
150
SAA (g/ml)
SAA (g/ml)
150
100
50
100
50
0
0
saline
ALD
MDP
ALD/MDP
saline
ALD
MDP
ALD/MDP
ManA 7.5 mg/Kg
ManA ALD+MDP
+Man A
… dato il potenziale anti infiammatorio degli
isoprenoidi e degli inibitori della farnesil-transferasi: è
possibile ipotizzare una loro sinergia???
VERIFICA !!
Isoprenoidi+Tipifarnib®/Lonafarnib®
L. De Leo, A. Marcuzzi. Pharm Res 2010
IL-1 (pg/ml)
8000
ISOPRENOIDI
+
INIBITORI FARNESIL
TRANSFERASI
6000
4000
2000
**
0
IL 18 (pg/ml)
2000
1500
1000
*
500
**
***
0
TNFa (pg/ml)
8000
6000
4000
***
***
2000
***
0
Ald+Lova+LPS
+
+
+
+
GOH
-
+
-
+
Tip
-
-
+
+
A.Marcuzzi, et al. Submitted to Cl.Exp. Pharm Phys (2010)
Conclusione
Gli isoprenoidi e gli inibitori della farnesil
transferasi presentano una significativa
azione anti infiammatoria nei modelli
malattia di MKD
da soli o…meglio in combinazione!!
Ringraziamenti
IRCCS Burlo Garofolo (Trieste)
Dott. Tommasini Alberto
Dott.ssa Pontillo Alessandra
Dott.ssa De Leo Luigina
Prof. Ventura Alessandro
Università degli Studi di Trieste
Prof.ssa Decorti Giuliana
Grazie per l’attenzione!