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Presentado por:
Héctor Lezcano
Isamar Chávez
Evelyn Monterrey
Amaris Ramos
David Weng
Juan Alain
ANALIZADORES HEMATOLÓGICOS
INTRODUCCIÓN
 El desarrollo de los Autoanalizadores hematológicos
comenzó en la década de los 50 con los hermanos
Wallace y Joseph Coulter, quienes inventaron en 1956 el
primer contador automático de células sanguíneas.
En 1980 se introduce el diferencial 3 Diff, además del
estudio de la serie roja con los cómputos de eritrocitos,
la determinación de la hemoglobina y el cálculo de los
índices eritrocitarios.
Todo equipo automatizado, suministra dos tipos de
resultados: un informe numérico y un informe grafico
(histogramas), y ambos poseen un software que
contiene toda la información utilizando abreviaturas en
ingles de utilidad en el informe numérico.
COMPONENTES DEL ANALIZADOR
•DILUIDOR
Disminuye la concentración de la
sangre hasta el nivel adecuado para el
funcionamiento del contador.
Como líquido diluyente utiliza una
solución isotónica con capacidad
conductora.
•TRANSDUCTOR
Transforma las
señales, procedentes
del dispositivo de
medida,
en
impulsos eléctricos.
Suele
ser
un
fotomultiplicador
•COMPRESOR- ASPIRADOR
Aporta la presión y el vacío
necesarios para transportar la
sangre,
convenientemente
diluida, al dispositivo de
medida.
•DISPOSITIVO
DE
MEDIDA
Es la cámara donde se
cuentan realmente las
células sanguíneas (cámara
de medida o de lectura).
•DISCRIMINADOR
Diferencia los impulsos
eléctricos generados por
cada uno de los tipos de
células sanguíneas.
•REGISTRADOR
Imprime en papel los
resultados conseguidos.
•PROCESADOR
Recoge
los
datos obtenidos,
los procesa y los
proyecta en una
pantalla.
PRINCIPIO DE LOS ANALIZADORES
HEMATOLÓGICOS
IMPEDANCIA
RADIOFRECUENCIA
CITOMETRIA DE FLUJO
DISPERSIÓN ÓPTICA
FLUORESCENCIA
PRINCIPIO DE IMPEDANCIA
.El principio de impedancia en el conteo de
células sanguíneas se basa en el aumento
de la resistencia producida cuando una
célula sanguínea con baja conductividad
pasa a través de un campo eléctrico.
El número de intermitencias indica la cifra de células
sanguíneas y la amplitud de cada intermitencia es
proporcional al volumen de la célula
Ejemplos de instrumentos con este principio son el
Contador Coulter, los instrumentos TOA Sysmex y los
instrumentos Abbot Cell-Dyn.
•Mientras que las células sanguíneas conducen mal la
electricidad, el líquido diluyente es un buen conductor de la
electricidad (posee una gran conductividad eléctrica).
•El dispositivo de medida consiste en un pequeño orificio, a través del cual se hace
pasar la sangre diluida. Tiene colocados un electrodo a su entrada y otro a su salida.
•También se hace pasar una corriente eléctrica constante a través de ese mismo
orificio.
•Si el orificio es atravesado solamente por líquido diluyente, la
resistencia eléctrica medida por los electrodos es mínima y constante,
pero cuando el orificio es atravesado por una célula sanguínea, se
produce un aumento de la resistencia eléctrica y un cambio de potencial
entre los electrodos.
El número de señales eléctricas generadas indica el número
de células presentes en la sangre y la amplitud de estas
señales es directamente proporcional al volumen celular.
De este modo es posible la identificación de las células y
por tanto el recuento
IMPEDANCIA
DISPERSIÓN ÓPTICA
Ejemplos de
instrumentos que
atizan este principio
son los Technicon H
System.
basa en las mediciones de
la dispersión de la luz
obtenidas de una sola célula
sanguínea que pasa ata
través de un haz de luz
(óptico o láser
el lateral es una
medición de la
granularidad de la
célula.
Estas células crean una
dispersión hacia
delante y lateral las
cuales se detectan
mediante
fotodetectores .
El grado de dispersión
hacia delante es una
mediación del tamaño de
la celular
FLUORESCENCIA
 Un fluorocromo es una molécula química que absorbe la luz a una determinada
longitud de onda (ENERGIA ) energía de excitación y emite a una longitud superior
(MENOR ENERGIA)
Interacciona con la luz de excitación procedente de el láser.
¿CÓMO ES OBTIENE?
Fluorocromo
Unión de
sitios
específicos
•libera energía
absorbida por :
•Vibración y
disipación del calor.
absorbe
energía
del láser
Emisión de
fotones a una
mayor
longitud de
onda
llamada fluor
escencia
VARIEDAD DE MODELOS
•Contador Coulter serie
S-Plus: Introducido al
mercado en 1983, es un
analizador
automático
multiparámetros, opera
por el principio de
impedancia.
•Contador Coulter STKS: Es
una combinación de tecnologías
para
enumerar
eritrocitos,
.plaquetas y leucocitos; y para
determinar un conteo diferencial
de cinco partes. Emplea el
principio de impedancia.
•Sysmex
NE-800:
Realiza conteos de
células sanguíneas ,
determinaciones
de
hemoglobina
y
diferenciales de cinco
partes

Sysmex NE-800: Realiza conteos de
células sanguíneas , determinaciones de
hemoglobina y diferenciales de cinco partes
CITOMETRIA DE FLUJO
 Técnica de análisis celular
multiparamétrico cuyo fundamento se
basa en hacer pasar una suspensión
de partículas (generalmente células)
alineadas y de una en una por delante
de un haz de láser focalizado.
 Es una tecnología (proceso) que
permite la medida simultánea de
múltiples características físicas de una
sola célula.
 Estas medidas son realizadas
mientras las células (partículas) pasan
en fila, a una velocidad de 500 a 4000
células por segundo, a través del
aparato de medida en una corriente de
fluido.
Sistema Hidráulico
•Controles neumático y fluidos para
establecer un flujo laminar que
permita a la suspensión celular
Sistema Óptico
•Láser (Argón con luz monocromática
de 488nm , filtros , lentes y
detectores.
atravesar la cámara de flujo.
Sistema Electroinformativo
•Convierte la luz dispersa en señales
eléctricas y las procesa para su
análisis.
Parámetros
Características
morfológicas de las
células
Tamaño Relativo
(forward scatter-FSC)
Granularidad relativa
o complejidad interna
( side scatter SSC)
Propiedad de
Dispersión
Características
antigénicas de las
células
(Inmunifenotípicas)
Fluorescencia relativa
(FL1, FL2, FL3)
Determinación cuantitativa
de características
antigénicas, bioquímicas y
biofísicas de células
individuales
SEÑALES DE DISPERSIÓN
La luz dispersada frontalmente en ángulo cónico pequeño (0-10
grados ) coincidente con luz incidente y es proporcional a tamaño
de la partícula que produce la dispersión.
SEÑALES DE DISPERSIÓN
La luz dispersada lateralmente es proporcional al la
complejidad de la estructura celular.
RADIOFRECUENCIA
Eritrograma
Se trata del análisis de la serie roja e incluye los siguientes parámetros:
• Recuento de glóbulos rojos: se trata de la cantidad de eritrocitos en un
mm3. A partir del número de células contadas por unidad de volumen, se
genera el histograma de distribución de eritrocitos.
• Concentración de Hemoglobina:
Valores Normales: Hombres: 16 ± 2 gr%
Mujeres: 14 ± 2 gr%
• Hematocrito: es el porcentaje de sangre que es ocupado por eritrocitos.
Valores Normales: Hombres:
Mujeres:
47 ± 5 gr%
42 ± 5 gr%
Índices Hematológicos
Concentración de hemoglobina media corpuscular (C.H.MC): Se refiere a
la concentración promedio de hemoglobina por mililitro de eritrocitos. Puede ser
calculada utilizando los valores de hemoglobina y de hematócrito o medida
directamente mediante luz láser y su grado dispersión.
Valor normal: 32% a 36%

Volumen corpuscular medio (V.C.M): Expresa en micras cúbicas (u3) el
volumen que ocupa un hematíe de tamaño medio. El valor de este parámetro
puede ser obtenido a partir del histograma de distribución de volumen de los
eritrocitos o medido directamente mediante la técnica de dispersión de la luz láser.
Valor normal: 87 ± 5 u3 ó um3


Hemoglobina corpuscular media (H.C.M.): Es el valor promedio de la
hemoglobina contenida en cada eritrocito. Puede ser calculada utilizando
los valores de hemoglobina y de hematocrito o medida directamente
mediante luz láser y su grado dispersión.
Valor normal: 27 – 32 pg

Contenido de hemoglobina presente en los reticulocitos (CHr):
Constituye un indicador precoz de eritropoyesis deficiente en hierro que es
mucho más sensible a la suplementación con hierro que otros parámetros,
tales como hematócrito, hemoglobina, VCM, RDW, HCM y ferritina. Es de
reciente incorporación gracias a los analizadores hematológicos.

La Amplitud de Distribución Eritrocitaria (ADE o RDW): se utiliza como
indicativo de anisocitosis. Este índice es facilitado por los contadores
automatizados.
Valor normal: 11,5 – 14,5%
LEUCOGRAMA

Es la fracción del hemograma que se refiere al conteo total de los
leucocitos (glóbulos blancos) y de las diferentes clases de leucocitos. En sí
está compuesto por dos análisis:

Conteo total de leucocitos: Los leucocitos son las células encargadas
de proteger al organismo contra las infecciones. La presencia de una
infección normalmente altera el número total de leucocitos. Valor
normal: 4,500 a 10,000 glóbulos blancos
por microlitro (mcL)

Conteo de leucocitos diferencial: apodado simplemente
"diferencial", determina la proporción o porcentaje de las principales
clases de leucocitos dentro del conteo total de leucocitos. (neutrófilos,
eosinófilos, basófilos, linfocitos y monocitos). Cada clase tiene un
papel diferente en la defensa del organismo. La cantidad de cada clase
de leucocito da información muy valiosa acerca del estado del sistema
inmune.
LEUCOCITOS EN FROTIS
SERIE BLANCA
PLAQUETOGRAMA

Plaquetas (PLT): se refiere al recuento global de plaquetas realizado de
forma automatizada. Valor normal: 150 a 400 × 109/L.4

Volumen medio plaquetario (VPM): es un indicador del tamaño de las
plaquetas y muestra una relación inversa no lineal con el número de estas.

Plaquetocrito (PCT): se calcula relacionando el recuento de células con el
volumen medio plaquetario. Ofrece un estimado sobre la fracción del
volumen sanguíneo total ocupada por las plaquetas. Su valor aumenta en
situaciones que cursen con trombocitosis. Valor normal: 0,1 a 0,4 %.

Componente medio plaquetario o concentración media de plaquetas
(CPM): es un indicador del grado de activación plaquetaria y una variable
clínica útil en el estudio y seguimiento de pacientes con riesgo de trombosis
como en el caso de dializados, diabéticos, fumadores, angina inestable,
mujeres embarazadas.

Plaquetas reticuladas (PR): las PR son las más jóvenes de la sangre
periférica con un contenido de ARN superior a las demás. Son detectadas
mediante la aplicación del método inmunológico. El porcentaje normal de
PR es de 0,98 ± 0,41 %.
INFORMACIÓN GRÁFICA
HISTOGRAMA DE ERITROCITOS
DISTRIBUCIÓN NORMAL
REL
NIo
RBC 6.09
HGB 17.5 HCT
50.6 MCV
83.1 MCH
28.7 MCHC
34.6 RDW
13.0
VCM x ADE
CUERPO
DEDO
RBC
50
100
130
Artefactos glóbulos
rojos aglutinados
200
300
fL
HISTOGRAMA DE LEUCOCITOS
Granulocitos
Recuento total de Leucocitos
EJEMPLO DE ANALISIS
DISTRIBUCIÓN NORMAL
REL
NIo.
Neutrófilos
WBC 8.3 LY
# 2.5 MO #
.8 GR # 5.1
MO o MID
Linfocitos
90
WBC
50
160
100
200
300
MO – MID = Eosinófilo, Basófilo, Monocito
400
HISTOGRAMA DE PLAQUETAS
REL
DISTRIBUCIÓN NORMAL
NIo:
NOMOGRAMA NORMAL
PLT 319 PCT
.239 MPV
7.5 PDW
16.3
PLT
2
10
20
FEMTOLITROS
RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS
Cuadrante 6
Eosinófilos
Cuadrante 3
Monocitos
Cuadrante 4
Neutrofilos
Cuadrante 2
Linfocitos
Cuadrante 5 Cel.
Dañadas
Cuadrante 1 Blastos
RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS DE
CINCO PARTES
RECUENTO DIFERENCIA DE LEUCOCITOS
ANORMAL
1
9
1. Blastos
5. Eritrocitos
2
nucleados
2. Granulocitos
inmaduros
6. Linfocitos
7
Variantes
8
3. Neutrófilos
envejecidos
3
y lesionados
7. Blastos
6
8. Linfocitos
4. Plaquetas
Variantes
gigantes
5
4
9. Blastos
NEUTROPENIA Y LINFOCITOSIS
WBC
Cuadrante 4
Neutrofilos
Cuadrante 3
Monocitos
Cuadrante 6
Eosinófilos
V
O
L
U
M
E
N
Cuadrante 5
Cuadrante 2
Linfocitos
Cel. Dañadas
DF1
Cuadrante
1 Blastos
LINFOCITOS ATÍPICOS
WBC
Cuadrante 3
Monocitos
Cuadrante 4
Neutrofilos
Cuadrante 6
Eosinófilos
V
O
L
U
M
E
N
Cuadrante 5
Cuadrante 2
Linfocitos
Cel. Dañadas
DF1
Cuadrante
1 Blastos
EOSINOFILIA
WBC
Cuadrante 3
Monocitos
Cuadrante 4
Neutrofilos
Cuadrante 6
Eosinófilos
V
O
L
U
M
E
N
Cuadrante 5
Cuadrante 2
Linfocitos
Cel. Dañadas
DF1
Cuadrante
1 Blastos
GRANULOCITOS INMADUROS
WBC
Cuadrante 3
Monocitos
Cuadrante 4
Neutrofilos
Cuadrante 6
Eosinófilos
V
O
L
U
M
E
N
Cuadrante 5
Cuadrante 2
Linfocitos
Cel. Dañadas
DF1
Cuadrante
1 Blastos
DISPERSOGRAMA
HISTOGRAMA NORMAL
ANEMIA POR DEFICIENCIA DE
VITAMINA B12
La curva se desplaza
a la derecha
ANEMIA POR DEFICIENCIA DE
HIERRO
La curva se desplaza
a la izquierda
HISTOGRAMA TALASEMIA BETA
La curva se desplaza
a la izquierda
Línea Verde: Microcitosis sin anisocitosis.
 Línea Roja: Macrocitosis sin anisocitosis.
 Línea Amarilla: Anisocitosis, y/o Poiquilocitosis.
 Línea Azul: Doble población

Distribución de plaquetas e
interferencias
Posible agregación plaquetaria.
Interferencia producida por microcitosis marcada.
ALARMAS EN LOS ANALIZADORES
HEMATOLÓGICOS:
Cualitativas
Cuantitativas
Identifican blastos, células
anormales, granulocitos
inmaduros, etc.
Identifican anemia/policitemia,
leucopenia/leucocitosis,
trombocitopenia/trombocitosis
Útiles
Deseables
Identifican anisocitosis, tamaño
de plaquetas, aglutinación de
eritrocitos, plaquetas y
hemoglobinas anormales
Identifican eosinofilia,
eritrocitos nucleados, células
drepanociticas, esferocitosis,
fragmentos de eritrocitos y
células de frotis.
UTILIDAD CLÍNICA
UTILIDAD CLÍNICA



Contribuye con la
valoración del resultado de
una citometría hemática.
Valoración de la función
medular ósea. VPM bajo:
hipoproducción medular.
VPM alto: trastorno
mieloproliferativo
A partir de los resultados
obtenidos se puede
proceder a hacer pruebas
más profundas
UTILIDAD CLÍNICA

Ventaja: Buena apreciacion la distribución
volumétrica real entre todos los tipos celulares
presentes en la muestra incluyendo en algunas
patologías la visualización aun de linfocitos.

Diferenciación entre ferropenia y talasemia menor. Un
VCM bajo y RDW: diagnóstico de ferropenia. Un VCM
bajo y RDW normal: diagnóstico de talasemia menor
Gracias