Transcript Генетическое тестирование в перинатологии. Презентация ИХБ

Воронина Елена Николаевна
Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАМН
ГЕНЕТИЧЕСКОЕ ТЕСТИРОВАНИЕ

Мы привыкли думать, что наша судьба определяется
звездами. Сегодня мы знаем, что многое в нашей
судьбе определяется генами.
Дж. Д.
Уотсон, 1989

Здоровье или болезнь есть результат
взаимодействия наследственных задатков и среды

Генодиагностика - комплекс методов
направленных на определение отдельных
особенностей структуры исследуемого генома
ДНК – НОСИТЕЛЬ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ
ИНФОРМАЦИИ
GGATCTGCAATCCGATGCGC
CCTAGACGTTAGGCTACGCG
Строение белков
определяется
последовательностью
расположения
нуклеотидов в ДНК.
Структура и
количество белков
определяют
фенотип человека.
НАРУШЕНИЯ В СТРОЕНИИ ДНК (МУТАЦИИ)
ПРИВОДЯТ К ИЗМЕНЕНИЮ СТРУКТУРЫ БЕЛКОВ.
GGATCTTGCCATATGCAA
CCTAGAACGGTATACGTT
Факторы,
повреждающие
ДНК
GGATCTTGАCATATGCAA
CCTAGAACТGTATACGTT
NCBI dbSNP Build 127 - 11,811,594
Специфический для каждого человека геномный
набор SNP формирует генетический компонент
фенотипического разнообразия
Разработаны
системы
генотипирован
ия более 200
полиморфных
вариантов
генома
человека
За 9 лет нами проведено более 350 000
генетических анализов для учреждений
г.Новосибирска, г.Кемерово и г.Москвы
Нарушение метаболизма липидов
LPL, ApoA1, ApoA5
EPHX, GST1, CYP1a1,
SOD
Дисфункция эндотелия
Иммунологическая
дезадоптация
HLA-G, TNFa, IL-1, IL-10
Гестоз
ПНБ
Гомоцистеин
MTHFR, CBS,
MTR, MTHFD
Вазоспазм
AT1R,
AGT, ACE
Нарушение имплантации
Недостаточный ангиогенез
AT1R, eNOS,
PRCP,VEGF, PIGF
Оксидантный стресс
Ишемия плаценты Тромбофилии
FV,FVII,FXIII,
ФПН
PAI-1,GPIII,
Фибриноген,
протромбин
ИССЛЕДОВАНИЯ ПОСЛЕДНИХ ЛЕТ ПОКАЗАЛИ,
ЧТО НАЛИЧИЕ ТРОМБОФИЛИИ СОПРЯЖЕНО С
ПОВЫШЕННЫМ РИСКОМ РАЗВИТИЯ
ОСЛОЖНЕНИЙ БЕРЕМЕННОСТИ:
привычное невынашивание,
 плацентарная недостаточность,
 задержка роста плода,
 поздний токсикоз (гестоз).

СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТАЯ СИСТЕМА
ЭД1-Эндотелиальная дисфункция (полная панель). (АСЕ, NOS3 (Glu298Asp), NOS3 (VNTR),
EDNI, p22phox, MnSOD, TNFa, СOX2, AGT, AGTR1, ADD1, CYP11B2, hANP , TGFb, VEGF, HIF1A, MMP3,
MMP12)
ЭД 2-Эндотелиальная дисфункция – тонус сосудов. Факторы, влияющие на тонус сосудистой
стенки (АСЕ, NOS3 (Glu298Asp), NOS3 (VNTR), EDNI)
СГ7-Гипергомоцистинемия. Факторы риска нарушения обмена фолиевой кислоты. (MTHFR (C677T),
MTHFR (A1298G), MTRR, MTR, MTHFD, CBS, BHMT, SLC19A1, SHMT)
СГ1-Нарушения системы гемостаза (полная панель) (FII, FV, FVII, FVIII, FIX,
FXI, FXII, FXIII, FGB, FGG, PAI-1, Gp-IIIa, Gp-Iba, Gp-Ia, GpVI, MTHFR (C677T), MTHFD,
SERPINC1, ProC(x2), PLAT)
СГ2-Нарушения системы гемостаза – минимум (FII, FV, FXI, FGG, MTRR, PAI1, Gp-IIIa, MTHFR (С677T))
АГ1-Артериальная гипертензия. Факторы риска развития артериальной гипертензии (ACE,
AGT, AGTR1, AGTR2, ADD1, CYP11B2, hANP, ADRB1, ADRB2, NOS3 (Glu298Asp), NOS3 (VNTR),
GNB3, CYP2D6 (x2), CYP2C9 (x2))
Оценка степени риска осложнений беременности при
тромбофилических полиморфизмах
Генетические факторы риска
баллы
Гетерозиготный полиморфизм I/D в гене PLAT
0
Гетерозиготный полиморфизм G/A в гене
фибриногена
Гетерозиготные полиморфизмы в генах GP IIIa, GP
Ia и PAI-1
Гомозиготный полиморфизм I/I в гене PLAT
1
Гомозиготный полиморфизм A/A в гене
фибриногена
Гетерозиготный полиморфизм C677 – T в гене
MTHFR
Гомозиготный полиморфизм в генах GP IIIa, GP Ia
и PAI-1
Гомозиготный полиморфизм C677 – T в гене
MTHFR
Гетерозиготный полиморфизм фактора V Лейден
Гетерозиготный полиморфизм G20210 – A в гене
протромбина
Гомозиготный полиморфизм фактора V Лейден
2
3
4
Гомозиготный полиморфизм G20210 – A в гене
протромбина
•
•
B.C. БАРАНОВ, Институт акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта РАМН
Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза.
ПРОФИЛАКТИКА ТРОМБООБРАЗОВАНИЯ ПРИ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ
ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ У БЕРЕМЕННЫХ
(МЗ РФ ПИСЬМО N 2510/11891-02-32).
активная
профилактика
гепарином(5 ты
с. ЕД х 2-3
раза в сутки п/к)
или НМГ
(150 ICU/кг, 1 р
аз в сутки п/к)
•Наличие
родственников с
тромботическими
осложнениями
•Гомозиготное
носительство или
сочетание нескольких
мутаций
•Наличие других
дефектов системы
свертываемости
Клиническое наблюдение
с регулярным контролем
при помощи:
Венозной компрессионной
ультрасонографии (КУС)
или
Импедансной
плетизмографии (ИПГ)
гепарин в дозе 5000 ЕД х 2-3 раза в сутки п/к в течение 7 дней или НМГ - в
дозе 150 ICU/кг в течение 10-14 дней, затем профилактика антивитамином К
варфарином в дозе, поддерживающей MHO в пределах 2,0-3,0.
НАСЛЕДСТВЕННАЯ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТЬ К
РАКУ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И РАКУ ЯИЧНИКА
18
5d
el
AG
(7
%
38
)
38 19d
2875del5
00 el (1
41 de 4 (1%)
54 lAA %
de ( )
lA 2%
(1 )
%
C6
)
1G
(8
%
)
Доля основных мутаций генов BRCA1 (Западная сибирь)
ОЗ1-BRCA – 1 (наследственная предрасположенность к раку молочной железы) (BRCA1 –
5382insC) с интерпретацией
ОЗ2-BRCA – 4 (наследственная предрасположенность к раку молочной железы) (BRCA1 –
5382insC, C61G, 4154delA), CHEK (1100delC) с интерпретацией
(8
0%
)
ОЗ3-BRCA – 10 (наследственная предрасположенность к раку молочной железы) (BRCA1
53
82
in
sC
– 5382insC, C61G, 4154delA, 185delAG, 2080delA, 3819del5, 3875del4, BRCA2 – 6174delT,
9318del4, 1528del4), CHEK (1100delC), BLM (Q578X) с интерпретацией
Мать
риск РМЖ и РЯ
Отец
5382 insC
+
5382 insC
Дочь
Сын
риск РП
5382 insC
Дочь
риск РМЖ и РЯ
При наличии мутации в любом из генов
BRCA1 или BRCA2 у женщины рак
молочной железы развивается с
вероятностью 90%. При этом с
вероятностью 30-40% заболевание
развивается в возрасте до 40 лет и с
вероятностью 60% - до 50 лет. Кроме того,
носительство мутаций в генах BRCA1 или
BRCA2 до 60% увеличивает риск развития
рака яичников у женщин и до 40-50% - рак
предстательной железы у мужчин.
РЕПРОДУКТИВНОЕ ЗДОРОВЬЕ
Р32-Безопасная контрацепция (расширенный блок) (FII, FV, FXI, GpVI, PAI-1, Gp-IIIa, MTHFR
(С677T), MTHFD, СYP1A2(2 мутации), CYP2С9(х2))
Р33-Риск осложнения беременности (невынашивание, гестоз, риск ВПР) FV, FII, PAI-1, FXI,
GpVI, Gp-IIIa, NOS3 (Glu298Asp), NOS3 (VNTR), AGT, ACE, EDN1, MTHFR, MTRR, MTR, CBS, MTHFD, IL1b(2
мутации), TNFa, MnSOD2, COX2
Р36-СПКЯ (AR, CYP11A, INS, PPARG)
РЗ7-Азооспермия (AZFa, AZFb, AZFc) с интерпретацией
Р38-Мужское здоровье (CFTR, AR, KLK3, 8q24)
РЗ9-FMR1 ген синдрома ломкой Х-хромосомы
РЗ1-Ответ на стимуляцию яичников при ЭКО
(FSHR, ESR1, ESR2, FMR1) с интерпретацией
Обследование семейной пары на варианты генов
главного комплекса гистосовместимости HLA
второго класса (DRB1, DQA1 и DQB1)
У СУПРУЖЕСКИХ ПАР, ИМЕЮЩИХ 2 - 3 ОБЩИХ АЛЛЕЛЯ СИСТЕМЫ HLA КЛАССА I ИЛИ II
РИСК НЕВЫНАШИВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ ДОСТОВЕРНО БОЛЬШЕ, ЧЕМ У ПАР, НЕ
ИМЕЮЩИХ ИДЕНТИЧНЫХ АЛЛЕЛЕЙ ПО HLA.
% идентичных антигенов у
супругов
Группа патологии
оплодотворения и
развития
беременности
Контрольная
группа
HLA-A
50 - 69%
34 - 44%
HLA-B
30 - 38%
20 - 30%
HLA DR
42 - 71%
20 - 30%
ФИО
ХХХХХХХХХХХ
ХХХХХХХХХХХХ
Название
гена
DRB1
dQA1
dQB1
DRB1
dQA1
dQB1
Аллель 1
Аллель 2
Фенотип
04
0301-03
0201/02
03
0501/03/05
0201/02
07
0201
0302
13
DR04,DR07
DQ2,DQ8
0501/03/05
0301
DR17,DR13
DQ2,DQ7
Результат: процент совместимости 12,5%
0% - 20% - не выше, чем в популяции, сопровождается протективным уровнем блокирующих антител
21 - 40% - достоверно значимый процент совместимости, уровень блокирующих антител может быть
недостаточным
41% - 100% - высокий процент совместимости, уровень блокирующих антител недостаточен в 80% случаев
беременности у данной пары
Врачебная тактика.
Рекомендовано проведение СКЛ (смешанная культура лимфоцитов). СКЛ позволяет не только
оценить состояние иммунологического взаимодействия лимфоцитов отца с лимфоцитами
матери, но и проконтролировать процесс лечения с помощью лимфоцито-иммунотерапии,
выбрать метод и дозу иммунизации, оценить перспективы применения того или иного способа
коррекции.
Лечение: Предлагается проведение лимфоцито-иммунотерапии (ЛИТ) лимфоцитов от пула
доноров или мужа (ряд авторов отдают предпочтение последнему). (Check JH et al., Clin Exp
Obstet Gynecol. 2005)
При включении в программу ЭКО супругов, имеющих совпадения по локусам HLA, необходимо
решить вопрос об увеличении количества подсаживаемых эмбрионов.
ПРОВЕДЕНИЕ ОБСЛЕДОВАНИЯ НА МУТАЦИИ В
ГЕНАХ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА РЕКОМЕНДУЕТСЯ:



при наличии в прошлом двух и более
выкидышей;
при наличии в прошлом тяжелых
осложнений беременности (гестоза,
внутриутробной гибели плода, задержки
развития плода);
при наличии в прошлом тромбозов во
время беременности или после родов;
ПРОВЕДЕНИЕ ОБСЛЕДОВАНИЯ НА МУТАЦИИ В
ГЕНАХ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА РЕКОМЕНДУЕТСЯ:




при неудачных попытках ЭКО;
при планировании гинекологических операций;
при планировании гормональной контрацепции.
при наличии родственников с тромботическими
осложнениями в возрасте до 50 лет (тромбозы
глубоких вен, тромбоэмболия легочной артерии,
инсульт, инфаркт миокарда, внезапная смерть);