Transcript Πρώϊμη διάγνωση του Μεσοθηλιώματος

Αποτελέσματα της μελέτης για την
πρώϊμη διάγνωση του
μεσοθηλιώματος στην Ελλάδα
Βασίλειος Μακρόπουλος Ομότιμος Καθηγητής ΕΣΔΥ
Σπανάκος Γρηγόρης ΚΕΕΛΠΝΟ
Εργαστήριο επαγγελματικής και βιομηχανικής υγιεινής
Μεσοθηλίωμα
Πρόκειται για μία σχετικά σπάνια (1/106)
μορφή νεοπλασίας, που σχετίζεται κυρίως
με την έκθεση στον αμίαντο.
Μεταξύ των περιστατικών μεσοθηλιώματος
μόνο σε 10% δεν έχει αποδειχθεί
προηγούμενη έκθεση σε αμίαντο
επαγγελματική ή περιβαλλοντική
2
Μεσοθηλίωμα
Προς το τέλος του περασμένου αιώνα, η
Ελλάδα συγκαταλεγόταν στην δεκάδα των
μεγαλύτερων παραγωγών αμιάντου και
προϊόντων αμιάντου παγκοσμίως
3
Σκοπός του έργου


Βελτίωση της πρόγνωσης του
μεσοθηλιώματος σε άτομα εκτεθειμένα
στον αμίαντο
Δημιουργία κέντρου για πρώιμη
διάγνωση σε άτομα εκτεθειμένα στον
αμίαντο
4
Αμίαντος
Η χρησιμοποίηση του αμιάντου
απαγορεύτηκε στην ΕΕ το 2005
Η εξόρυξη αμιάντου στην Κοζάνη ξεκίνησε το
1982 και σταμάτησε το 1998.
Η εμφάνιση μεσοθηλιώματος σαν συνέπεια
της έκθεσης σε αμίαντο, εκδηλώνεται μετά
από πάροδο 20-60 ετών
5
Μεσοθηλίωμα
Είναι σημαντική η πρώϊμη διάγνωση και
πολλοί βιοδείκτες έχουν διερευνηθεί για τον
σκοπό αυτό, αλλά ο προσδιορισμός
μεσοθηλίνης (Soluble Mesothelin Related
Peptides) στον ορό είναι ο πιο
καθιερωμένος.
Σημαντικό μειονέκτημα είναι κυρίως η
μειωμένη ευαισθησία (~60%)
6
MESOMARK
Το γονίδιο →
□
Mesothelin
□
Megacaryocyte Potentiating Factor
7
8
micro RNAs
Είναι μικρά μη κωδικά μόρια RNA που
παίζουν σημαντικό ρόλο στην γονιδιακή
έκφραση των κυττάρων.
Ανώμαλη έκφραση μορίων miRNA έχει
συσχετιστεί με διάφορες παθολογικές
καταστάσεις
9
Επιλογή miR-103
H ευαισθησία της μεθόδου
υπολογίστηκε στο 78%
Ενώ η ειδικότητα στο 76%.
12
Δείγματα
Χρησιμοποιήθηκαν δείγματα αίματος από
άτομα με ιστορικό έκθεσης στον
αμίαντο από τον Ελληνικό χώρο, βάσει
των απαντήσεων των συμμετεχόντων
σε ερωτηματολόγιο
13
Ορυχείο ΜΑΒΕ Κοζάνης
http://ec.europa.eu/environment/life/project/Projects/index.cfm?fuseaction=
home.showFile&rep=file&fil=LIFE03_ENV_GR_000214_LAYMAN_GR.pdf
14
Ναυπηγοεπισκευαστική ζώνη Περάματος
http://www.safety4sea.com/what-australia-requires-for-the-protection-from-asbestos-on-ships/
15
Διαδικασία δειγματοληψίας
S.O.P.
□
Λήψη
□
Φυγοκέντρηση εντός 30 min
□
Κατάψυξη μέχρι την μέτρηση
16
Η πειραματική διαδικασία
Μέτρηση των επιπέδων της μεσοθηλίνης στο
πλάσμα, με το κιτ ELISA → MESOMARK
17
Η πειραματική διαδικασία
Απομόνωση RNA από τα
έμμορφα συστατικά του
άιματος με το κιτ
RiboPure-Blood Kit
18
Η πειραματική διαδικασία
Μέτρηση συγκέντρωσης και καθαρότητας
του RNA φωτομετρικά
19
Η πειραματική διαδικασία
Μέτρηση Ct του miR-103a-3p και του
miR-125 (που χρησιμοποιείται σαν
αναφορά) με RT-qPCR
Χρησιμοποιούνται εμπορικά κιτ.
□
Η τιμή για το miR-103a-3p
προσδιορίζεται: 2(-ΔCt)
20
Η πειραματική διαδικασία
21
Η πειραματική διαδικασία
Εκτός των ανωτέρω, ελέγχθησαν και οι
παράμετροι
□
Σάκχαρο
□
Κρεατινίνη
□
Τρανσαμινάση AST
□
Τρανσαμινάση ALT
□
γ-Γλουταμινοτρανσφεράση
22
Αριθμός συμμετεχόντων
□
□
Συνολικά 222 άτομα συμμετείχαν στην
πρώτη αιμοληψία.
220 δείγματα
Τα δείγματα μετρήθηκαν στο εργαστήριο
του Ινστιτούτου για την Πρόληψη και
την Ιατρική της Εργασίας της
Γερμανικής κοινωνικής ασφάλισης.
Ινστιτούτο του πανεπιστημίου του
Bochum
23
Αριθμός συμμετεχόντων
□
Στην δεύτερη 138
(μεσοδιάστημα 4-6 μήνες)
□
Τα δείγματα μετρήθηκαν στο
εργαστήριο του τομέα Επαγγελματικής
και Βιομηχανικής Υγιεινής της ΕΣΔΥ
24
Κοζάνη
1η δειγματοληψία 84
Αθήνα
136
Σύνολο
220
83
148
10 ♀
2η δειγματοληψία 65
8♀
25
Διάρκεια έκθεσης στον αμίαντο
Διάρκεια
έκθεσης
1η
Διάρκεια
έκθεσης
2η
Εως 5 έτη
54 (34,4)
Εως 5 έτη
33 (31,1)
6-10 έτη
16 (10,2)
6-10 έτη
8 (7,5)
11-15 έτη
22 (14,0)
11-15 έτη
16 (15,1)
16-20 έτη
34 (21,7)
16-20 έτη
26 (24,5)
>20 έτη
31 (19,7)
>20 έτη
23 (21,7)
26
Άλλες παράμετροι
Σημαντικό ποσοστό (> 40%) στο δείγμα είναι οι
καπνιστές.
Επίσης ποσοστό μικρότερο του 7% ανέφερε
διαβήτη
Πολύ μικρός αριθμός ατόμων ανέφερε κάποιο
άλλο νόσημα (λιγότερο από 5%)
27
Αποτελέσματα
Mesothelin
miR-103a3p
median
0,6
0,4
IQR
0.4 – 0.8
288.0
113.0 - 550.8
657.2
305.5 – 1170.2
0,3 - 0,7
28
Αποτελέσματα
Mesothelin
>1,5
7
5
Για το miR-103a-3p δεν υπάρχουν καθιερωμένα
όρια, καθώς και πληροφορίες για παράγοντες που
επιδρούν στις μεταβολές του
29
Αποτελέσματα
□
□
□
Αύξηση της έκθεσης αυξάνει τις
συγκεντρώσεις Μεσοθηλίνης και miR103a-3p.
Οι μη καπνιστές παρουσιάζουν μειωμένη
συγκέντρωση μεσοθηλίνης και
αυξημένη συγκέντρωση miR-103a-3p
Αύξηση της Τρανσαμινάσης AST
συχετίζεται με αυξημένο miR-103a-3p
30
Διαφορές
Mesothelin
2.61
3.10
1.59
0.53
1.35
0.44
1.08
1.85
0.57
0.35
31
Διαφορές
miR-103a3p
278.20
450.38
413.00
292.03
237.21
127.11
689.78
747.01
1871.53
1634.91
32
Συμπεράσματα
Είναι εφικτή στην Ελλάδα η
παρακολούθηση ατόμων εκτεθειμένων
στον αμίαντο
Η εξέταση των βιοδεικτών, εκτός από
μικρότερη επιβάρυνση των ατόμων, έχει
και χαμηλότερο οικονομικό κόστος
Επιπλέον έρευνα απαιτείται ώστε να
αξιολογηθεί η σημασία κάποιων
παραμέτρων
33
Ευχαριστώ
34