Transcript 0.42 2. 농도에 따른 p

해양미생물유래 세포외 다당류의 개발
2002. 5. 2
한국해양연구원
이 홍 금
Marine Microbial Diversity Lab.
목
차
서론
미생물 유래 다당류
해양미생물 유래 다당류 개발 사례
- 해양세균 (Bacteria)
- 해양남조류 (Cyanobacteria)
- 해양미세조류 (Microalgae)
Marine Microbial Diversity Lab.
국내외 생물 산업의 시장 규모
(단위 : 억 달러)
연도
분야
바이오 의약
식량 식품
정밀 생물화학
생물 환경 산업
계
세계
국내
세계
국내
세계
국내
세계
국내
세계
국내
1998 년
2005 년
2010 년
193.0
3.5
26.0
0.3
26.0
0.3
53.0
0.5
376.0
6.5
429.0
11.8
110.0
3.6
88.0
3.9
143.0
3.9
1100.0
36
752.0
30
193.0
9
154.0
9
251.0
10
1920.0
90
(산업자원부 21세기 한국 산업의 비젼과 발전 전략,’99)
바이오 화학 국내 생산규모
(단위:백만원)
바이오화장품·
폴리머·기타
(3,829)
아미노산
(17,004)
효소·시약류
(5,778)
환경소재
• 응집활성제
• 중금속 흡착제
산업소재
식품첨가제
• 연마제
• 기능성 보조식품
• 세라믹제
• 콘크리트 혼합제
바이오 폴리머
(EPS)
• 유화 안정제
• 젤 형성제
화장품제
• 유화안정제
• 항암제
• 보습제
• 윤활제
• 항생제
• 의약운반제
의약품
해조 유래 다당류
 한천(agar), 알긴산(alginase), 카라기난(carageenan)
 1997년의 천연 겔화 다당류의 세계 시장 규모 - 10억불
 이중 45%가 해양유래 카라기난, 한천, 알긴산.
알긴산 (Algainic acid)
알긴산의 화학구조
Poly-β-D-Mannuronate
Poly-α-L-Guluronate
Poly-β-D-Mannuronate과 Poly-α-L-Guluronate
알긴산 생산 비율
100%
80%
60%
53%
35%
40%
13%
20%
0%
유럽
북미
아시아
알긴산의 용도
 점액을 증가하는 증점제
- 세발제, 로션, 크림, 치약, 연고 등에 사용
 보호콜로이드성, 포말 안정성, 보형성, 피막 형성성,
이장방지작용, 응교성, 결정석출 방지작용,
응집침강촉진 효과
카라기난 (Carageenan)
카라기난의 화학구조
mu-carrageenan
Kappa-carrageenan
AFM image (1m X 1m)
카라기난 생산 비율
100%
80%
60%
60%
33%
40%
10%
20%
0%
유럽
미국
아시아
카라기난의 용도
 세계 연간 14,000톤 소비
 일본 - 연간 200톤 화장품원료로 사용
 일본 - 연간 150톤 방향제로 소비
 전 세계 생산 46%
- 필리핀 양식 Eucheuma cottomii로 충당
해양생물에서 생산되는 산업용 생물소재
물질명
가격($/Kg)
Agar (food-grade)
15
Agar (bacterial-grade)
Agar (electrophoresis)
Carageenan
(food additives)
Chlorophyll
100-200
400
5-20
100
물질명
Fucoidan
10
mineral 류
Amino acid
지방산
20
50
10
Sterin
Polyphenol
10
Glycerine
Carotenoid
50
Choline
EPA
Fucotirol
Phycobiliprotein
가격($/Kg)
100
5
480
4,000
Vitamine B12
57,000
400,000
Bioadhesive
15,000,000
75,000,000
미생물 다당류 개발의 장점
기존 다당류
대체한 신규성
환경에 따른 천연
다당류 공급 변동
원료 확보 및 높은정
제 비용
미생물 다양성
인공대량배양가능
생명공학적 수율 증대
유전자 재조합 가능
가능한 생산과정 조절
발효조건 생산조절
수식에 의한 용도개발 안정된 물성 확보
다양한 기능성
소재 개발
질, 양적 균일
다당류 생산
연속배양
대량생산
비용절감
미생물다당류
세포내 다당류 (Intercellular polysaccharide)
: PHB, glycogen
구조 다당류 (Structure polysaccharide)
: lipopolysaccharide, teidchoic acid, glucan
세포외 다당류 (Extracellular polysaccharide)
: dextran, levan, pullulan, xanthan, alginate
Microbial Exopolsaccharide
Ex) Slimed cyanobacterial strains
EPS
Cyanothece sp.
(775 x)
Nostoc sp.
(194 x)
Microbial Exopolsaccharide
Sheathed cyanobacterial strains
EPS
Chroococcus sp.
(1000 x)
Phormidium sp.
(1,000x)
Microbial Exopolsaccharide
Capsuled cyanobacterial strains
EP
S
Cyanothece sp.
(775 x)
Nostoc sp.
(480 x)
해양생물막
유용 유전자
신소재
효소
세포외 다당류
부착능
환경적응을 위한 미생물 EPS 효과
 표면 부착
 박테리아 세포의 집합, 생물막 형성
 세포간 인지
 생물막 구조적 요소
 방어벽
 보습성 유지
 외부 유기 혼합물의 흡착
 비유기 이온의 흡착
 효소 활성
 효소와 다당류의 상호작용
Microbial biopolymers
Xanthan : Xanthomonas campestris
광범위 온도, pH 점도우수  식품첨가제
Gellan : Pseudomonas slodea, Sphingomonas
pancimobilis
증점제, 안정제  젤라틴 대체 식품첨가제
Curdlan : Agrobacterium sp.
높은온도에서 액상 환원안됨  천연 껌 대체
황산염유도체  항바이러스
Wellan : Alcaligenes sp.
xanthan과 유사, 열안정성 우수  윤활제
높은 pH에서 칼슘과 반응성 우수  건축분야
Ramsan : Alcaligenes sp.
낮은 전단력, 유동학적  현탁액, 페인트첨가
Exopolysaccharide
Origin
Mr (Da)
Components
?
Glucose/mannose/glucuronic acid
(2/2/1)
5×105
Glucose/rhamnose (3/1)
Application
Stabilizer,
Inhibitor of crystal formation
Xanthan
Xanthomonas campestris
Gellan
Spingomonas pancimobilis
Pulluan
Aurebasidium pullulans
103－3×106
Glucose
Zooglan
Zoogloea ramigera
6－10×106
Glucose/galactose (2/1)
Pyruvate, acetate, succinate
as side-groups
Succinoglycan
Rhizobium melilot
Agrobacterium tumefaciens
＞106
Glucose/galactose (7/1)
Pyruvate, succinate as side-groups
Schizophyllan
Schizophyllum commune
2×106
Glucose
EPSs
Streptococcus thermophilus
＞2×106
Glucose/galactose (1/1)
Galactose/rhamnose/glucose
(3/2/1)
Food thickner
Galactose/glucose/rhamnose
(5/1/1)
Galactose/glucose/rhamnose
(11/1/0.4)
Stablizer in milk product
Exopolysaccharide
Lactobacillus delbrueckii
subsp. Bulgaricus
Exopolysaccharide
Enterobacter sp.
EPS-R
Hahella chejuensis
1.7×106
4×10
4
2×106－107
Glucose/mannose/rhamnose/fucose
(3.3/3.0/2.6/1.0)
2×106
Galactose/glucose (6.8/1)
Xylose, ribose as minor
Gelifier
Film formation
Gelifire, stabilizer,
Emulsifier, lubricant
Gelifier
Antitumorous agent,
pH-controlled drug delivering
Copper remover from
waste water
Emulsifier
세포내 다당류 합성
UMP
UDP-D-galactose + P-lipid
D-galactose-PP-lipid
UDP
UDP-Dglucuronic acid
D-glucuronic acid
D-mannose-D-galactose
PP-lipid
GDP-D-mannose
GDP
D-mannose-D-galactose
PP-lipid
UDP-D-galactose
UDP
D-galactose-D-mannose-D-galactose-PP-lipid
Polysaccharide
+ D-glucuronic acid
Fig. Mechanism of biosynthesis of polysaccharide-chain in the cell.
다당류 합성의 조절
REACTION
CONTROL
Substrate
Substrate entry
MEMBRANE
CYTOPLASM
Hexose-phosphate
Hexose-P level
XDP-Hexose
XDP-Hexose hydrolase and pyrophosphorylase
Lipid-P-P-Hexose
Lipid-P-P-Oligosaccharide
Polysaccharide
Isoprenoid lipid
availability
해양 미생물 유래 세포외다당류 개발
해양미생물
해수, 해양 동식물, 퇴적층에 서식하는 세균, 진균류,
단세포 조류, 원생동물, 바이러스
해양환경
평균수심 : 4,000m
염분 : 35 ‰
온도 : 연평균 5℃
저온성, 빈영양성, 친압성, 호염성의 특성
해양미생물유래 EPS 개발 추진체계
1 단계
산업적이용
기반기술
확립
2 단계
신기능성 산업
소재로의 개발
유용성 검색 기술
균주분리, 배양
• biofilm 군집
• cyanobacter
• heterotophe
특성분석
이용기술
생산조건
• 분자량
• 단당류 성분
• 점도
• 리올로지
• 분자구조
• 의존성: pH,
온도, NaCl
• 식품첨가제
• 생리활성
• 산업소재
• 물성
• 배양조건확립
안정성 및
유효성 검정
제품화 기술
• 유용유전자
• 분리정제법
대량 생산
해양 미생물 시료채취지역
황해 및 제주 서남해역
남해안 연안지역
KOREA
35
µ¿ ÇØ
B1
34
B3
2
¼- ÇØ
1
B5
35
B7
B8
A1 A3 A5 A7 A9 A11A13A15
33
27 28
3
5
4
32
9
7
6
8
19 22
20
10 18 21
11 17
12 13
14
23 26
24
25
³² ÇØ
31
123
124
125
126
127
128
129
34
29 3133
30
32
A. 천연기질 표면
B. 인공기질 표면
C. 천연인공기질 표면
시화방조제
Oyi Island
Sampling point
Daebu Island
Sungam Island
Sampling of marine bactrium from slide glass
해양 미세조류 1차 배양
 ASN-III 배지에 접종한 filter 1차 배양
 3000 Lux , 16/8 h, 20oC, 4주 배양
대량배양 및 polymer 확인
1. 순수 분리 균주의 small scale reacter 배양
2. 3주 배양 후 배지 1ml당 생성된 polymer
3. 생성된 polymer의 특성 분석을 위한 정제시료
1
2
3
순수 분리 균주 확보
Total nomber of isolatied marine bacteria and marine cyanobacteria
Sampling point
Subtotal
Marine bacteria
Marine microalgae
77
4
South Sea
678
603
1,281
Yellow Sea
and Che-ju island
332
4
336
139
0
139
Dae-bu Island
Dae-ho
Embankment
Total
1,226
611
81
1,837
균주분리
생산균주 1차 선발
균주선발
균주보존
균주동정
1. 다당류 생산량
2. 세포생장
균주의 배양학적 특성
회분식 배양에 의한 다당류의 생산
다당류의 분리 및 정제
다당류의 점성
다당류의 특성
다당류의 구조분석
다당류의 물성
1. 농도에 따른 점도
1.다당류의 분자량
1.FT-IR
1. 응집활성
2.온도에 따른 점도
2.다당류의 조성
2. NMR
2. 용해도
3. 염농도에 따른 점도
3. 원소분석 및 선광도
3. UV
4. 정성반응
3. 융점
4. pH에 따른 점도
5. 열처리에 의한 점도
5. 단백질 함량
6. 다른 다당류와의 혼합비교
6. 유기조성 비교
4. 수분활성도
5. 유화안정능
7. 고유점도
다당류 이용성
다당류의 대량생산 및 분리, 정제
OOSS-11568의 특성
분리지역 : 전라남도 여수시
용주리 포구
616
995
cocoid형
563
1000
gram +
1 – 2 m
Altermonas sp.
00SS-11568
marine bacterium ATAM407_18
polar sea bacterium R9875
1000
1000
556
Alteromonas alvinellae
Alteromonas macleodii
Arctic seawater bacterium R7215
Glaciecola sp. HA02
Pseudoalteromonas bacteriolytica
563
Moritella japonica
Idiomarina loihiensis
Marinobacter aquaeolei
0.1
Desulfovibrio acrylicus
OOSS-11568의 분자량
Molecular weight(Da)
10 6
DEXTRAN 1
P-11568
10 5
DEXTRAN 2
10 4
8
9
10
11
12
13
14
Retention time(min)
A.
B.
C.
MW : p-11568 (4.4 x 105 )
Blue dextran : MW 2,000,000, dexran : 1) MW 464,000, 2)
MW 69,000
3. GPC : HPLC, flow rate : 0.5ml/min., ELSD detector
Column : Showdex. 806M, eluent : water.
p-11568의 단당조성
glucose
Xylose
1.
P-11568 (glucose : xylose = 3 : 1 )
2.
HPLC : cabohydrate column, 1.4ml/min., acetonitil : water =
80 : 20
ELSD detector
p-11568 생산에 미치는 탄소원의 영향
1.0
5
5
0.14
4
1.60
1.55
0.8
4
0.2
1
1.35
1.30
0.10
0.08
2
1.25
0.06
1.20
1.15
Cell growth O.D.660
2
1.40
EPS (g/l)
0.4
2
3
1.45
Viscosity (cp)
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
3
0.6
3
0.12
1.50
Cell growth O.D.660
4
1
0.04
1.10
1.05
1.00
0.02
0
1
1
0.0
0
xylose
fructose
glucose
galactose
mannose
sucrose
starch
2
3
5
7
Glucose concentration (%)
con
Carbon source
Fig. Effect of carbon source on the production p-11568 and cell growth.
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
Cell growth O.D
Fig. Effect of glucose concentration on the production of p-11568 and cell growth.
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
Cell growth O.D.660
p-11568 생산에 미치는 질소원의 영향
1.44
1.42
0.070
6
0.065
5
0.060
4
0.055
3
0.050
2
0.045
1
0.040
1.38
1.36
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
1.40
1.34
Cell growth O.D.660
7
1.32
1.30
1.28
0.035
0
KNO3
NH4H2PO4
(NH4)2SO4
NH4CL
NH4NO3
Inorgnaic nitrogen source
Fig. Effect of inorganic nitrogen on the production of p-11568 and cell growth.
Viscosity (cp)
EPS (g/l)
4
1.8
Cell grwth O.D.660
7
0.30
0.30
10
9
1.7
0.25
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
5
4
0.10
1.3
EPS (g/l)
0.15
7
Viscosity (cp)
1.4
2
0.25
8
0.20
6
5
0.15
4
3
1
3
0.10
2
0.05
1.2
1
1.1
0
0.00
yeast
pepton
typton
malt
beef
urea
2
0.05
0
con
1
Organic carbon
Fig. Effect of organic carbon source on the production of p-11568 and cell growth.
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
Cell growth O.D
3
5
7
10
con
Yeast extract concentration (%)
Fig. Effect of yeast extract on the production of p-11568 and cell growth.
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
Cell growth O.D
Cell growth O.D.660
0.20
1.5
6
Cell growth O.D.660
3
1.6
p-11568 생산에 미치는 무기인산의 영향
8
6
0.14
5
0.12
7
7
0.08
3
2
0.06
1
0.04
4
EPS (g/l)
3
0.5
6
5
0.4
3
0.3
2
0.2
2
1
0.1
1
0
Cell growth O.D.660
0.10
0.6
5
Viscosity (cp)
4
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
4
5
Cell growth O.D.660
6
0.7
6
0
0.02
0.5
1
5
4
0.5
EPS(g/l)
Viscosity (cp)
Cell growth O.D
1
5
con
K2HPO4 concentration.
KH 2PO 4 concentration.
Fig. Effect of KH 2PO 4 concentration on the production of p-11568 and cell growth.
0.0
0
con
Fig. Effect of K2 HPO4 concentration on the production of p-11568 and cell growth.
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
Cell growth O.D.660
p-11568 생산에 미치는 무기염의 영향
4
2.0
0.06
3
0.04
1.8
2
1.6
1
1.4
0
0
0.00
10
15
20
1.0
4
0.8
3
0.6
2
0.4
1
0.2
1
0.02
5
5
2
EPS (g/l)
2.2
0.08
Viscosity (cp)
5
3
0
0.0
0.01
0.03
con
8
0.1
0.2
con
Fig. Effect of CaCl2 concentratio on the production of p-11568 and cell growth.
Fig. Effect of NaCl concentration on the production of p-11568 and cell growth.
9
0.07
0.05
CaCl 2 concentration (g/l)
NaCl concentration (%)
EPS (g/l)
Viscosity (g/l)
Cell growth O.D.660
Cell growth O.D.660
Viscosity (cp)
EPS (g/l)
Cell growth O.D.660
2.4
0.10
Cell growth O.D.660
6
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
2.6
6
0.35
1.65
5
0.30
1.60
0.25
1.55
4
0.5
0.4
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
0.15
2
4
0.10
1.50
1.45
2
0.2
1.40
1.35
3
0.3
2
Cell growth O.D.660
5
0.20
3
3
EPS (g/l)
6
Viscosity (cp)
4
Cell growth O.D.660
7
1
0.1
1
0
0.1
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.5
0.05
1.30
0.00
1.25
0
con
0.0
FeSO4
CuSO4
MnSO4
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
Cell growth O.D.660
CoCl2.6H2O
KCl
con
Micro element
MgSo 4 concentration (g/l)
Fig. Effect of MgSO4 concentration on the production p-11568 and cell growth.
ZnSO4
Fig. Effect of micro element of the production of p-11568 and cell growth.
EPS (g/l)
Viscocity (cp)
Cell growth O.D.660
5 L Jar fermentor를 이용한 p-11568의 생산
9
FInal pH
8
7
6
5
3
22
2
20
16
EPS (g/l)
2
1
14
12
10
1
0
8
Cell growth O.D.660
Viscosity (cp)
18
6
4
0
2
2
4
8
12
24
36
48
72
96
120
144
con
Time (H)
Fig. Effect the time course on the production of p-11568 and cell growth.
EPS (g/l)
Viscosity (cp)
Cell Growth O.D.660
Final pH
20 L jar fermentor를 이용한 p-11568의 생산
p-11568의 미세구조
A
A
B
C
The scanning electron microscope of p-11568 at different
concentration. (A : 1.0%, B : 0.5%, C : 0.1%, 25,000 x)
p-11568 의 리올로지 특성
Gellan gum, Xanthan gum에 대한 1% 수용액 물성
Xanthan gum
P-11568
Gellan gum
Relationship between shear stress and shear rate
according to mix of Gellan & Xantan gum
p-11568 의 리올로지 특성
Gellan gum, Xanthan gum에 대한 1% 수용액 물성
Xanthan gum
p-11568
Gellan gum
Relationship between viscosity and shear
rate according to each polysaccharides
p-11568 물성학적 특성
1. p-11568의 물성계수
1) non-Newtonian fluid
2) power-low model : 1%수용액, consistency index(K) 4,404, flow behavior index(η ) 0.42
2. 농도에 따른 p-11568의 물성변화
- 0.25, 0.5, 0.75, 1.0 % 농도에서 전단응력은 농도에 비례하여 증가
3. 온도에 따른 p-11568의 물성변화
1) 10, 25, 40, 60 oC에서 온도가 상승할 수록 전단응력 감소, 온도 재저하시킨 경우 점도
2) 가역용액 물성
4. pH에 따른 p-11568의 물성변화
- pH 2, 4, 7, 8, 12에서 큰 변화 없음
5. 염(NaCl, CaCl2) 첨가에 의한 p-11568의 물성변화
- NaCl 농도 증가할 수록 전단응력 감소, CaCl2의 경우 전단응력은 증가
6. 열처리에 따른 p-11568의 물성변화
1) 60, 80, 100 oC에서 열처리한 후 전단응력 감소
2) 불안정한 열안정성
7. Gellan 및 xanthan gum과 의 혼합에 의한 p-11568의 물성변화
- 동일농도 0.5% gellan 및 xanthan gum과 혼합시 물성형 변화 없음
00SS-11568의 EPS특성
1. 분리지역 : 전라남도 여수시 용주리 포구
2.
Altermonas sp., cocoid형, gram +, 1 – 2 m
3. 탄소원 : glucose 3%가 세포생장 및 세포외다당류 생산에 양호
4. 질소원 : (NH4)2SO4 4 g/l에서 세포외다당류의 생산 17.4 g/l
5. 다당류 생산 적합배지 M-11568에서 5 L jar fermentor 배양시
19.2g/l로 배양후 48 h에서 최대 생산
6. p-11568의 분자량은 4.4 x 105, glucose와 xylose가 3:1
7. non-Newtonian fluid로 power-low model에 의한 pseudoplastic한
물성을 갖는 것으로 조사되었으며, 유체성으로 p-11568 1%의
consistency index(K)는 4,404, flow behavior index(η )는 0.42
Hahella chejuensis gen. nov. sp. nov.
Hahella chejuensis
EPS-R
• Gram negative
• Rod (1-5 ㎛)
• Motile/single polar flagella
• Strict halophile(1-5% NaCl)
• Oxidase positive
• Catalase positive
• G+C content (mol% 55)
• 분자량 - 2.2×106 Da
• 당조성
- Major : glucose, galactose = 1: 6.8
- Miner : ribose, xylose
Hahella chejuensis의 배양시간별 EPS-R의 생성
A
B
C
D
A. 10 h, B. 16 h, C. 41 h, D. 69 h (SEM, 10,000 X)
Hahella chejuensis EPS-R 생성 및 점도의 변화
1600
500
25
Floccualtion activity (U/ml)
1400
8
4
2
20
400
15
300
10
200
5
100
Viscosity (cp)
6
Sucrose (g/l)
Dried cell and EPS-R weight (g/l)
10
1200
1000
800
600
400
200
0
0
0
20
40
60
80 100
Time (hour)
120
Dried cell weight
Dried EPS-R weight
Viscosity
Flocculation activity
0
140
Sucrose
0
Hahella chejuensis EPS-R의 유화 안정능
Emulsion Stability (hrs)
Polysaccharides
12
72
96
144
168
240
EPS-R
++
++
++
+
+
+
Xanthan gum
++
++
+
+
-
-
Gellan gum
+
-
-
-
-
-
Sodium alginate
-
-
-
-
-
-
Arabic gum
-
-
-
-
-
-
++ : Complete emulsion, + : Partially separated emulsion, - : Complete separated
EPS-R의 물성학적 특성
1. EPS-R의 물성계수 :
1) EPS-R는 non-Newtonian fluid
2) power-low model : 1% 수용액, consistency index(K) 1,410, flow behavior index(n) 0.73
2. 농도에 따른 EPS-R의 물성변화
- 0.25, 0.5, 0.75, 1.0 %의 농도에서 전단응력은 농도 비례하여 증가
3. 온도에 따른 EPS-R의 물성변화
1) 25, 30, 40, 50, 60 oC에서 온도가 상승할수록 전단응력 감소
2) 온도 재저하시킨 경우 점도 증가, 가역용액 물성
4. pH에 따른 EPS-R의 물성변화
1) pH 4, 6, 7, 8, 10, 12에서 큰 변화 없음.
2) pH 2에서 전단응력이 증가, 산성환경에서 다당류의 이용 가능
5. 염(NaCl, CaCl2) 첨가에 의한 물성변화
- NaCl 및 CaCl2 농도 증가할수록 전단응력 감소
6. 열처리에 따른 EPS-R의 물성변화
- 80, 100, 121 oC에서 열처리한 후 전단응력 감소, 불안정한 열안정성
7. Gellan 혼합에 의한 EPS-R의 물성변화
- 동일농도 0.5% gellan gum과 혼합시 물성형 변화 없음
00SS-CY36 의 특성
Sheathed cyanobacterial strains
colony
EPS
Chroococcus sp. (1000 x)
00SS-CY36의 특성
1. 분리지역 : 전라남도 여수시 육촌면 반월리 포구
2. 형태관찰상 Chromococos sp.로 추정
3. p-CY36의 분자량은 OSI-1(1.8 x 107 ), OSI-2 (2.0 x 106)로 2개의 바이오 폴
리머가 존재
4. p-CY36의 단당구성
OSI-1(glucose : galactose : glucronic acid : mannose = 1 : 3 : 1 : 4),
OSI-2 (glucose : galactose : glucronic acid = 1 : 19 : 4)
5. ASN-III medium에서 2.45 g/l
6. 0.5 – 1.0 % (w/w)에서 shear-thining properties (power-law behavior)
96ND01의 특성
1. 적조 원인 미생물로 폐독을 유발.
2. 와편모조류로 단독, 군체형성
(군체는 8개체 이하)
3. 세포크기 : 30 um 이하
4. Sulfated polysaccharide 생산
1) 분자량
p – 96ND01 – 1 : 1.2 x 106
p – 96ND01 – 2 : 6.1 x 105
2) 단당조성
glucose, glactose, mannose,
uronic acid
3) sulfateconcentration : 7.3 %
Cochlodinium polykrikoides
5. Antivial activity
96ND01의 생장 및 다당류 생산
250
30000
Cell No.
25000
Carbohydrate
200
20000
150
15000
100
10000
50
5000
0
0
Day
Production p-96ND01 and cell growth of 96ND01
Carbohydrate(mg/ml)
Cell No.(cell/ml)
35000
hit 
BIODIVERSITY ×
ASSAY
No. of
×
SYSTEM
SAMPLES
BIOPROCESS ENGINEERING
COMMERCIALIZAION