Transcript Transcrição e processamento do RNA em eucariotos e Transposons Prof. Dr. Vinicius Campos

Transcrição e processamento do
RNA em eucariotos
e Transposons
Prof. Dr. Vinicius Campos
Graduação em Biotecnologia - UFPel
Abordagens da aula...
1. Transcrição em eucariotos
2. Processamento do RNA eucariótico
3. Splicing
4. Adição do CAP e da cauda Poli (A)
Transcrição em
eucariotos
RNA – Ácido ribonucléico
- mRNA
- tRNA
- rRNA
- hnRNA
-snRNA
- miRNAs
Estrutura de um gene eucarioto
Região Codificadora
Sítio de PoliA
DNA
Promotor
Intron
hnRNA
CAP
RNA
AAAAAAAAAA
Exon
mRNA
CAP
AAAAAAAAAA
Tipos de RNAs polimerases
RNA pol I
Nucleólo
rRNA
28S, 18S, 5,8S
Várias subunidades
50-70%
RNA pol II
Nucleoplasma
hnRNA
(transcrito
primário)
snRNA
Várias subunidades 2040 %
RNA pol III
Nucleoplasma
rRNA 5S
tRNAs
Várias subunidades
10%
RNA pol Mitocondrial
Mitocôndria
?
01 subunidade
RNA pol de
Cloroplastos
Cloroplasto
?
Similar as bacterianas
Requerem proteínas auxiliares: fatores de transcrição
Promotores de genes transcritos pela
RNApol II
Tata Binding Protein
RNA polimerase II
TFIID = TBP + 10
TAFs
Formação do
complexo de
transcrição da
Polimerase II
Enhancers
Proteínas necessárias para transcrição a
partir de promotores reconhecidos pela
RNA Pol II
RNA polimerase III
Processamento
de RNA
Splicing
- Reações de transesterificação
- Spliceossomo: formado por proteínas e snRNPs
- Estrutura montada assim que o íntron é transcrito
- Reação em cascata direcionada pelo pareamento de bases
Splicing de íntrons de mRNA
Características de íntrons de mRNA
- Adenina localizada 20 a 50 nt da extremidade 3’ do íntron
- Região rica em pirimidinas na extremidade 3’ do íntron
- Regra GU-AG (exceção alguns vertebrados AU-AC)
Liang et al. (2007)
Splicing alternativo
Transporte ativo do RNAm para o
citoplasma
Spliceossomo – 3000 kDa
Splicing de introns de tRNA
A presença de íntrons nos genes
eucarióticos, aparentemente,
representa um enorme desperdício
celular
Então, por que a evolução nos
presenteou com estas seqüências?
 Mecanismo de proteção contra mutações
 Diversidade: genomas e proteomas (splicing alternativo)
 Regulação gênica...
Adição do CAP e
da cauda Poli (A)
Adição do CAP
Adição da
cauda poli (A)
Estrutura de um mRNA eucarioto
processado
Estrutura de um mRNA eucarioto
processado
Liang et al. (2007)
O que nós visualizamos?
28S
18S
Intervalo!!!
Prof. Dr. Vinicius Farias Campos
Graduação em Biotecnologia
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