Transcript BM01250 P Multiplo Proteus Micro ITA

MULTIPLO PROTEUS MICRO
Determinazione degli anticorpi associati alle infezioni da rickettsie, mediante sospensione batterica colorata in micropiastra
PRINCIPIO DEL TEST
Gli anticorpi associati alle infezioni rickettsie causano
l’agglutinazione dei batteri inattivati presenti nella
sospensione. La colorazione intravitale consente una più
facile lettura della formazione degli agglutinati.
CAMPIONI
Siero. Stabilità 6 giorni a 4°C.
REAGENTI
Sospensione:
Contr. Positivo
Proteus:
Contr. negativo:
Sospensione
batterica
colorata
intravitalmente e inattivata; conservanti
e stabilizzanti.
Soluzione di antisieri di coniglio in
grado di dare un’agglutinazione
evidente con le sospensioni batteriche
Proteus; conservanti e stabilizzanti.
Soluzione proteica bovina non reattiva
con la sospensione; conservanti e
stabilizzanti.
PREPARAZIONE DEI REAGENTI
I reattivi sono pronti all’uso.
Le sospensioni batteriche vanno risospese con molta
cura agitandola più volte per inversione.
Stabilità: fino alla scadenza indicata in etichetta
conservati a 2-8°C. Non congelare.
MATERIALI NECESSARI NON FORNITI
Soluzione Fisiologica. Micropipette automatiche. Normale
strumentazione da laboratorio.
PRECAUZIONI
Il reagente può contenere componenti non reattivi e
conservanti di varia natura. A scopo cautelativo è
comunque opportuno evitare il contatto con la pelle e
l’ingestione. Utilizzare le normali precauzioni previste per
il comportamento in laboratorio.
INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI
Un fondello ben colorato a forma di punto nitido, sul
fondo del pozzetto, indica negatività.
Un agglutinato che ricopre integralmente il fondo del
pozzetto è invece indice di netta positività, mentre, un
agglutinato non uniforme con presenza di fondello nel
centro, sul fondo del pozzetto, indica debole positività.
Il titolo del siero in esame è dato dalla più elevata
diluizione in cui si riscontra una, sia pur debole, positività.
VALORI DI RIFERIMENTO
Si devono considerare negativi titoli fino a 1:40; sospetti
da 1:80 a a1:160 e positivi da 1:320.
E’ distintivo per la diagnosi di infezione l’aumento
significativo del titolo fra campioni esaminati a distanza di
giorni.
NOTA
•
Come per qualunque procedimento diagnostico, se i
risultati sono incompatibili con la presentazione
clinica, il medico dovrebbe valutare i dati ottenuti
usando questo test alla luce di altre informazioni
cliniche.
CALIBRAZIONE/CONTROLLO QUALITA’
I controlli, eventualmente forniti nel Kit, dovrebbero
essere sempre usati per poter distinguere una eventuale
agglutinazione di fondo del reattivo.
PRESTAZIONI DEL TEST
Sensibilità
In presenza di titoli anticorpali elevati si può verificare il
fenomeno di prozona per cui la positività è assente a
basse diluizioni pur essendo presente a diluizioni più
elevate.
Specificità
Un confronto con un metodo commerciale disponibile ha
fornito i seguenti risultati in una comparazione su 50
campioni, per sospensione, dando una specificità pari a
100%:
Pozzetto
1
2
3
//
9
Contr.
Sosp.
Contr.
-
Contr.
+
Fisiolog.
--
100 µl
100 µl
//
100 µl
100 µl
--
--
100 µl
100 µl
100 µl
da 2
--
--
--
//
100 µl
da 8
Siero
diluito
Scaricare 100 µl dal pozzetto n°9
Controllo
positivo
--
--
--
-
--
--
--
100 µl
Controllo
negativo
--
--
--
-
--
--
100 µl
--
Sospen.
batterica
100 µl
100 µl
100 µl
//
100 µl
100 µl
100 µl
100 µl
1:20
1:40
1:80
//
1:5120
--
--
--
Titolo
Agitare la piastra mediante lente rotazioni per circa 20-30 sec.
Incubare a 37 °C per 16-18 h o a 22°C per 2 giorni, per migliorare la
formazione dei fondelli è consigliabile porre la piastra in frigorifero dopo
l’incubazione per due ore.
+
-
+
14
0
TOT.
14
-
0
36
36
TOT.
14
36
50
CONCOR.
PROTEUS OX19
+
-
+
11
0
TOT.
11
-
0
39
39
TOT.
11
39
50
PROTEUS OXK
CONCOR.
PROCEDIMENTO
In una micropiastra con pozzetti a fondo a “U” diluire il
siero con fisiologica come indicato nello schema
seguente.
Utilizzando la medesima pipetta (aspirando e scaricando
più volte) miscelare accuratamente il contenuto del
secondo pozzetto e portarne 100 µl nel pozzetto
successivo e così via.
Scaricare 100 µl dall’ultimo pozzetto (pozzetto n°9)
CONCOR.
PROTEUS OX2
PREPARAZIONE DEI CAMPIONI
Il siero deve essere diluito 1 :10 con fisiologica. (100 µl di
siero con 900 µl di fisiologica).
+
-
+
12
0
TOT.
12
-
0
38
38
TOT.
12
38
50
CONSIDERAZIONI SULLO SMALTIMENTO
Il prodotto è destinato all’utilizzo all’interno di laboratori di
analisi professionali. Per un corretto smaltimento dei rifiuti
fare riferimento alla normativa vigente e alle schede
informative in materia di sicurezza.
CONFEZIONI
CODICE BM01250/P
Proteus OX 2
Proteus OX 19
Proteus OX K
Controllo positivo Proteus
Controllo negativo
Piastra fondo a U a 96 pozzetti
1 x 10 ml
1 x 10 ml
1 x 10 ml
1 x 0.5 ml
1 x 0.5 ml
1
BIBLIOGRAFIA
Widal F. – Bull. Men. Soc. Med. Hop de Paris – 6; 26
(1986) Bergey’s Manual of Determinative Bavteriology 8
Th Ed. Williams and Wilkins Co (1974) Weil E., Felix A.Wein.Klin.Woch 29; 974 (1916) Gualtney J.B. e coll. –
Microagglutination procedures for febrile agglutination
tests-Applied microbiology-4; 635-640 Vol.22 (1971)
Rose N.R., Friedman H.-Manual of clinical ImmunologyAmerican Society for Microbilogy, II ed.
PRODUTTORE
LEGENDA SIMBOLI
F
C
B
I
K
J
L
A
Per esclusivo uso diagnostico in vitro
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Codice di catalogo
Intervallo di temperatura per la conservazione
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Rischio Biologico
Mod. 01.06 (ver 2.2 - 27/09/2007)
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