Transcript Zat Pengatur Tumbuh dalam kultur jaringan ZPT • Diperlukan dalam konsentrasi rendah utk mempengaruhi pertumbuhan tan • Stok ZPT harus disimpan dalam gelap • Auksin.

Zat Pengatur Tumbuh
dalam kultur jaringan
ZPT
• Diperlukan dalam konsentrasi rendah
utk mempengaruhi pertumbuhan tan
• Stok ZPT harus disimpan dalam gelap
• Auksin harus dilarutkan dlm 95%
alkohol (sedikit saja), baru dicampur air
• Sitokinin dilarutkan dlm sedikit 1N HCl
• Auksin atau sitokinin bisa juga
dilarutkan dlm 1N NaOH
Auksin
•
•
•
•
IAA – auksin alami
IBA, NAA, 2,4-D – auksin sintetik
Konsentrasi 0.01 – 10 mg/L
Auksin sintetik relatif lebih aktif. Juga lebih
stabil karena tidak didegradasi oleh enzym
dalam tanaman
• Peran : pembelahan sel, pembentukan kalus,
pertumbuhan dan pemanjangan sel,
pembentukan akar adventif. Menghambat
pembtkan tunas aksilar.
Sitokinin
• alami : 2iP, zeatin
• Sintetik : BAP, Kinetin
• Pengaruh : memacu pembtkan tunas
aksilar dan tunas adventif, memacu
pembelahan sel
• Tahan panas, sehingga bisa
ditambahkan sebelum diautoklaf
Gibberelic Acid
• Grup ini memiliki 60 jenis, tapi GA3 yg
paling umum terdapat pada tumbuhan
• Tidak tahan panas, jadi tidak bisa
diautoklaf. Penambahan dengan
milipore filtration (sterilisasi filter)
• Peran : perkecambahan benih, memacu
pemanjangan ruas, memacu
pembentukan embrio dari kalus
Absicic acid = ABA
• Merupakan zat penghambat tumbuh
• Jarang digunakan dlm kuljar
• Aplikasi khusus untuk memacu
pembentukan embrio dari kalus.
Ethylene
• Ethylene diproduksi sebagai respon
terhadap kondisi kelebihan air, kondisi
yg mirip dg kultur in vitro. Pada
konsentrasi yg tinggi, ethylene
menyebabkan vitrifikasi (tanaman
terlihat transparan)
Senyawa lain
• Adenine
– Sering ditambahkan pd media untuk
merangsang pertumbuhan tunas
• Karbon aktif
– Digunakan dg konsentrasi 0.2 – 3% dlm
media.
– Berperan dalam induksi akar
– Menyerap senyawa
Unit pengukuran
•
•
•
•
•
•
1
1
1
1
1
1
L = 1000 mL = 1.000.000 μL
g = 1000 mg = 1.000.000 μg
mol = 1000 mmol = 1.000.000 μmol
M = 1 mol dlm 1 L
mM = 1mmol dlm 1 L
μM = 1 μmol dlm 1 L
Perhitungan
• ppm = parts per million
Co: 10 ppm IBA (pada media)
= 10 mg IBA + 990.000 mg air (=990 ml air)
Untuk praktisnya, 10 mg IBA ditempatkan
dalam labu takar, lalu ditambah hingga
mencapai 1 L
• % (v/v)
Co: 0.1% (v/v) Tween = 1 ml Tween + air
sampai 1000 ml
• % (w/v)
Co: 0.001% (w/v) IBA = 10 ppm IBA
= 0.01 g IBA + air sampai 1000 mL
Perhtngan larutan stok dan larutan media
Cs x Vs = Cm x Vm