Transcript ESBL – kriterier för undersökning och fenotypiska metoder

ESBLCARBA – kriterier för undersökning
och fenotypiska metoder
Christian G. Giske
SMI och Karolinska Universitetssjukhuset
16 mars 2011
K. pneumoniae och imipenem
No isolates
Imipenem MIC: KPC- and MBL-isolates
18
16
14
WT/CLSI EUCAST
12
10
8
6
KPC
MBL
4
2
0
0,032
0,064
0,125
0,25
0,5
1
MIC
2
4
8
16
>=32
K. pneumoniae och meropenem
No isolates
Meropenem MIC: KPC- and MBL-isolates
16
14
12
10
8
6
4
2
0
WT
CLSI EUCAST
MP KPC
MP MBL
0,032 0,064 0,125 0,25
0,5
1
MIC
2
4
8
16
>=32
K. pneumoniae och ertapenem
Ertapenem MIC: KPC- and MBL-isolates
No isolates
20
15
WT
CLSI EUCAST
ERT KPC
10
ERT MBL
5
0
0,032 0,064 0,125
0,25
0,5
1
MIC
2
4
8
16
>=32
K. pneumoniae och imipenem
S (CLSI)
S (EUCAST)WT
8
7
No of isolates
6
5
KPC
4
VIM
3
2
1
0
6
7 8
9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27
Zone (m m )
K. pneumoniae och meropenem
S (CLSI)
S (EUCAST) WT
12
No of isolates
10
8
KPC
6
VIM
4
2
0
6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27
Zone (m m )
K. pneumoniae och ertapenem
S (CLSI)
S (EUCAST) / WT
8
7
No of isolates
6
5
KPC
4
VIM
3
2
1
0
6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27
Zone (mm )
Disk diffusion vs MIC – imipenem
Pasteran et al. JCM 2009; 6:1631
Disk diffusion vs MIC – meropenem
Pasteran et al. JCM 2009; 6:1631
Disk diffusion vs MIC – ertapenem
Pasteran et al. JCM 2009; 6:1631
VITEK2 och detektion av karbapenemaser
• VITEK2 – EUCAST brytpunkter
– AST N025 (imipenem, meropenem, ertapenem) = 2 failures
– AST N027 (imipenem) = 4 failures
– AST N029 (meropenem) = 0 failures
– AST N106 (ertapenem) = 1 failure
– AST N107 (imipenem, meropenem, ertapenem) = 1 failure
• Pasteran et al. ICID 2010, poster 23.020
– AST N082 (imipenem and meropenem)
– IPM, MER ≤ 4 mg/L: 11 failures
– IPM ≤ 2 mg/L, MER ≤ 1 mg/L: 1 failure VIM/IMP
Lämplig screeningbrytpunkt
• EUCAST diskdiffusion brytpunkter för
meropenem och ertapenem plockar upp alla
karbapenemaser hos K. pneumoniae
– Undantag är SME hos S. marcescens
• Med MIC-metodik är lämpliga brytpunkter
meropenem > 0.5 mg/L, ertapenem > 0.5 mg/L,
imipenem > 1 mg/L
• VITEK2 fungerar om flera karbapenemer
inkluderas och man tolkar enligt EUCAST eller
nya CLSI brytpunkter
Fenotypisk detektion av
karbapenemaser
β-lactamase
Inhibited by
EDTA/DPA
Boronic acid
Cloxacillin
MBL
Y
N
N
KPC/class A
carbapenemases
N
Y
N
OXA-48
N
N
N
ESBL
N
N
N
AmpC
N
Y
Y
Positiv fenotypisk test: KPC och
MBL
MBL
KPC
DPA
MER
DPA
MER
BOR
CLX
BOR
CLX
Modifierad klöverblad (Hodge) test
•
•
•
•
1:10 dilution of 0.5
McF suspension of E.
coli ATCC 25922
10 µg imipenem disk
in the center
Each test isolate
streaked from the the
disk to the edge of
the plate
Isolate A is positive,
isolates B-D are
negative
Ökning av zondiameter
β-lactamase
Increase in zone diameter (range)
DPA
Boronic acid
Cloxacillin
MBL (n=25)
5-15
-1-2
0-2
KPC (n=34)
-1-3
4-16
0-2
OXA-48 (n=9)
-4-4
-1-4
0-2
ESBL (n=9)
-3-2
-2-3
-1-0
AmpC (n=9)
-3-1
1-7
0-7
Sensitivitet och specificitet
Test
β-lactamase
Sensitivity
Specificity
APBA
KPC
100%
98%
APBA+CLX
AmpC
80%
100%
DPA
MBL
100%
100%
EDTA
MBL
100%
88%
Modified
cloverleaf
(Hodge) test
Carbapenemases
100%
77%
”Double modified” klöverbladtest
Pasteran et al. JCM 2010
(Epub doi:10.1128/JCM.01771-09)
VIM-producerande E. coli
No isolates
Meropenem MIC: KPC- and MBL-isolates
16
14
12
10
8
6
4
2
0
WT
CLSI EUCAST
MP KPC
MP MBL
0,032 0,064 0,125 0,25
0,5
1
MIC
2
4
8
16
>=32
Konklusioner
• Karbapenemasdetektion: moving target
• Bästa rekommendation i nuläget: meropenem
– MIC >0,25 mg/L (>0,5 mg/L för andra arter än E. coli)
– I eller R med diskdiffusion
• Kombinationstester bör föredras framför klöverbladtest
(även kommersiellt tillgängligt)
• VITEK2: bred sammansättning av kortet (flera
karbapenemer), granska resultaten noga om oförklarad
karbapenemresistens
• OXA-48: kan vara cefalosporinkänslig och inhibitor saknas