Transcript Veiledning til akkrediteringskravene for mikrobiologiske laboratorier

Norsk akkreditering
Dok.id.: VII.1.30
NA Dok. 57 / NA Doc. 57: Veiledning til akkrediteringskravene
for mikrobiologiske laboratorier (Guidelines on accreditation in
microbiology)
Guideline/Veiledning
Utarbeidet av:
Sidenr:
Godkjent av:
AGR
Versjon:
ICL
5.01
Gjelder fra:
15.07.2013
1 av 12
NA Dok. 57 / NA Doc. 57
Veiledning til akkrediteringskravene for mikrobiologiske laboratorier
Guidelines on accreditation in microbiology
Dokumentkategori / Document category: Veiledning / Guide
Fagområde / Technical area: laboratorier / Laboratories
Innhold
1.
Referanse- og kontrollstammer.......................................................................................................... 3
2.
SLP-deltagelse for laboratorier som har flere metoder for en parameter ......................................... 4
3.
Opprettholdelse av analysegodkjenning/kompetanse ...................................................................... 4
4.
Måleusikkerhet ................................................................................................................................... 5
5.
Kontroll av dyrkningsmedier .............................................................................................................. 5
6.
Holdbarhetstid på dyrkningsmedier, testkit og lignende ................................................................... 6
7.
Bruk av kjøleinkubatorer .................................................................................................................... 7
8.
Registrering av rådata......................................................................................................................... 7
9.
Testkit og kommersielle metoder....................................................................................................... 7
10. Overgang til ny utgave av metoder .................................................................................................... 8
11. Avvik fra standard metoder ................................................................................................................ 8
12. Hygiene/overflatekontroll .................................................................................................................. 9
13. PCR-metoder ...................................................................................................................................... 9
14. Relevant litteratur ............................................................................................................................. 11
NA Dok. 57 / NA Doc. 57: Veiledning til akkrediteringskravene
for mikrobiologiske laboratorier (Guidelines on accreditation in
microbiology)
Dok.id.:
VII.1.30
Versjon: 5.01
Side:
2 av 12
Table of Contents
1.
Reference and control organisms ....................................................................................................... 3
2.
PT-participation for laboratories applying different methods for one parameter ............................. 4
3.
Maintenance of competency and authorization for testing ............................................................... 4
4.
Measurement uncertainty .................................................................................................................. 5
5.
Quality control of culture media ......................................................................................................... 5
6.
Shelf life of culture media, test kits etc ............................................................................................... 6
7.
Use of cooling incubators ................................................................................................................... 7
8.
Recording of raw data ........................................................................................................................ 7
9.
Test kits and commercial methods ..................................................................................................... 7
10. Implementation of revised versions of methods ................................................................................ 8
11. Deviation from standard methods...................................................................................................... 8
12. Hygiene- and surface control .............................................................................................................. 9
13. Polymerase Chain Reactions (PCR) methods ....................................................................................... 9
14. Relevant literature ............................................................................................................................. 11
NA Dok. 57 / NA Doc. 57: Veiledning til akkrediteringskravene
for mikrobiologiske laboratorier (Guidelines on accreditation in
microbiology)
Dok.id.:
VII.1.30
Versjon: 5.01
Side:
3 av 12
Formål / objectives
Objectives
Dokumentet EA 4/10 gir veiledning til
akkrediteringskravene for mikrobiologiske laboratorier
(fagområdene P16 og P24). Dette dokumentet er en
utdyping og et tillegg til veiledningen på utvalgte
områder slik denne blir praktisert av Norsk
Akkreditering (NA). Relevant veiledning for
mikrobiologiske laboratorier finnes også i NA Dok 9.
EA 4/10 gives guidance on accreditation for
microbiological laboratories (technical areas P16 and
P24). This document is a supplement to the guidance
document issued by EA and is describing the practise
used by Norwegian Accreditation. Relevant guidance
for microbiological laboratories is also given in NA Doc
9.
1.
1.
Referanse- og kontrollstammer
Sporbarhet i mikrobiologi oppnås blant annet ved
bruk av renkulturer av referanseorganismer fra
internasjonale eller nasjonale kultursamlinger. Bruk av
referansekulturer (i form av en bruks/arbeidskultur)
inngår i de daglige rutinene på laboratoriet.
Referansekulturer brukes eksempelvis til opplæring,
kontroll av medier, metoder, test-/verifiseringskits, og
til validering og sammenligning av metoder. Antall
referanseorganismer laboratoriet trenger er avhengig
behov for periodisk intern kontroll av metodene,
behovet for feilsøkning eller validering, bruk av andre
kontroller som referanseprøver, referansematerialer
og SLP-prøver, bruk av kommersielle,
kvalitetskontrollerte medier og kit osv.
Referanseorganismer og regelmessig/periodisk bruk
av disse i laboratoriet skal være beskrevet.
Kontrollprogrammer bør være risikobaserte.
Laboratoriene bør følge oppbevaringsbetingelser og
holdbarhetstider som er anbefalt fra leverandøren av
referansestammene. Ved leveringsproblemer fra
produsenten, kan det i en kortere periode benyttes
referansekulturer der holdbarheten er overskredet
dersom laboratoriet kan dokumentere at:
 bestilling av nye referansestammer er sendt
inn før holdbarhetstiden utløp
 kontroll av vekst og karakteristika er utført,
inkludert kvantitative kontroller hvis relevant
 bruksegenskapene for det aktuelle
anvendelsesområde ikke er endret
Reference and control organisms
Traceability in microbiology can be established by
using pure cultures of reference organisms from
national or international culture collections. Use of
working cultures made from the reference organisms
is a part of the daily routines in the laboratory.
Examples of use are training programs, internal
control of culture media, methods, test/verification
kits and validation/comparisons of methods. The
number of reference strains is depending on the needs
for periodic internal control of the methods used, the
needs for troubleshooting and/or validation, use of
other controls as reference samples, reference
materials and PT-samples, use of commercial, quality
controlled culture media, test kits etc. Reference
organisms and the regular/periodic use of them in the
laboratory shall be described in the quality
management system. The design of the control
programs should be risk based.
The laboratory should use storage conditions and shelf
lives recommended by the provider. Due to e.g.
delivery problems, use of reference organisms with
exceeded expiry dates are accepted for a limited
period if the laboratory can prove that:
 new reference cultures are ordered before the
expiry date of previous batch
 control of growth and appearance are
performed, including quantitative controls if
relevant
 characteristics are not changed in area of
application
Bruksklare kommersielle kontrollstammer kan
benyttes. Betingelsene er at disse kun brukes som
arbeidsskulturer (utsåing direkte på skål) og at
kvalitetssertifikat er tilgjengelig på laboratoriet eller at
det kan dokumenteres at sertifikatet er sjekket på
Internet. Bruksklare, kommersielle kontrollstammer
skal ikke danne utgangspunktet for en stammebank
(nedfrysning eller frysetørking).
Commercial available ready to use organisms should
only be used as working cultures and cannot be used
as a basis for freeze dried or frozen reference stocks.
Copy of certificates for each batch of reference
organism shall be available at the laboratory or the
laboratory must document that the certificates are
checked on Internet.
Laboratoriet skal etablere prosedyrer for overføring
fra skål til skål. Maksimum antall overføringer skal
The laboratory shall establish procedures for transfers
of control organisms from plate to plate. Maximum
NA Dok. 57 / NA Doc. 57: Veiledning til akkrediteringskravene
for mikrobiologiske laboratorier (Guidelines on accreditation in
microbiology)
Dok.id.:
VII.1.30
Versjon: 5.01
Side:
4 av 12
inngå i beskrivelsen. Overføringer skal registreres.
number of transferences shall be defined. All transfers
shall be recorded.
2.
2.
SLP-deltagelse for laboratorier som har flere
metoder for en parameter
PT-participation for laboratories applying
different methods for one parameter
Hvis laboratoriet har flere metoder for en parameter i
akkrediteringsomfanget, må alle metodene være
underlagt ekstern kontroll med SLP-deltakelse. Det
samme gjelder også hvis laboratoriets
metodeprosedyrer innholder muligheter for valg av
ulike vekstmedier, konfirmeringmetoder og lignende.
If the laboratory has different methods in the
accredited scope for a specific parameter, all methods
has to be externally controlled by PT-participation.
The same applies if the laboratory’s standard
operation procedure describes different options
regarding culture media, confirmation methods etc.
Dersom det ikke er mulig å sende inn resultatene for
alle metodene (eller varianter av en metode) til SLParrangøren, anses det som tilstrekkelig å sende inn
resultatet for en av metodene. Resultatene fra de
øvrige metodene evalueres internt, og på samme
måte som SLP-resultatene. I tillegg må SLPrapporteringen fra de ulike metodene rulleres slik at
alle metodene inngår i SLP-programmet i løpet av en
rimelig tidsperiode. Retningslinjer for SLP-deltakelse i
mikrobiologi framgår av NA Dok. 9.
Some PT-providers do not accept reporting of several
results/methods for one parameter. In this case, it is
satisfactory to report results from one of the methods
to the provider. Test results from the other methods
have to be dealt with according to a standard
operational procedure for evaluation of PT-results.
The laboratory should avoid reporting results to the
PT-provider exclusively from the same method each
time. A rotating reporting system shall be in place.
Guidance about PT-participation in microbiology is
also given in NA Doc. 9.
3.
3.
Opprettholdelse av
analysegodkjenning/kompetanse
Laboratoriet skal ha et program som sikrer
vedlikehold av analysekompetanse hos godkjente
analytikere. Programmet skal være basert på en
risikovurdering. Følgende elementer bør minst tas i
betrakning:




Antall analyser som gjennomføres
Gruppering av analyser med identisk
analyseteknikk
Antall positive funn i rutinen hvor
målorganismen kan identifiseres
Interne og eksterne kontrollordninger
Metoder som bygger på samme analyseteknikk eller
prinsipp og med felles konfirmerings og
avlesningsprosedyrer kan behandles samlet som en
gruppe, og prøvingserfaringen kan baseres på et
samlet antall analyser i gruppen. Analyse av kimtall i
næringsmidler og vann kan eksempelvis slås sammen.
Analyser av vann og næringsmidler kan imidlertid ikke
uten videre slås sammen. Dette gjelder eksempelvis
koliforme bakterier hvor metodeforskjellene er for
store.
Laboratoriet bør ha et system for å dokumente
prøvingserfaringen. Dette inkluderer analyser av SLPprøver og referansematerialer. Registreringer må
være sporbare til alle godkjente analytikere. Dersom
mengden av rutineprøver er høy, og det kan
dokumenters at alle typer av analyser sirkuleres blant
Maintenance of competency and authorization
for testing
The laboratory shall establish a program ensuring
maintenance of competency of authorized analysts.
The program shall be risk based. The following
elements should at least be taken into consideration:
 The number of tests to be performed
 Grouping of tests with identical testing
techniques
 The number of results were the target
organism can be identified
 Internal and external control programs
Methods based on equal analytical techniques or
principles and with identical reading and confirmation
can be treated as a group. The testing experience can
be based on the total number of analyses in the group.
Examples of methods that can be pooled are aerobic
culturable microorganisms in food and water. On the
other hand, methods for enumeration of coliform
bacteria in food and water have too many differences
to be treated as a group.
The laboratory should establish records to
demonstrate testing experiences included PTperformances and performances of reference
materials. Data shall be traceable to all authorized
analysts. If the number of routine samples tested is
high, and the laboratory has rotating shifts that
ensures regular use of all methods in the accreditation
NA Dok. 57 / NA Doc. 57: Veiledning til akkrediteringskravene
for mikrobiologiske laboratorier (Guidelines on accreditation in
microbiology)
de godkjente analytikere, kan registreringen utelates.
Laboratoriet skal regelmessig vurdere analytikernes
kompetanse og opprettholdelse av den enkeltes
analysegodkjenninger. Objektive kriterier bør i størst
mulig grad legges til grunn for vurderingene.
Gjennomgangen bør dokumenteres.
Dok.id.:
VII.1.30
Versjon: 5.01
Side:
5 av 12
scope, the records can be omitted.
The laboratory shall regularly review the competence
and the maintenance of authorizations for all
analysts. As far as possible, evaluations should be
based on objective criteria. The evaluations should be
recorded.
For sesongavhengige analyser bør laboratoriet
beskrive en rutine for oppstart av analysen og regodkjenning av analytikere før sesongstart.
For seasonal methods, the laboratory should have a
procedure describing the seasonal start-up of the
method and re-authorizartion of the personnel
involved.
4.
4.
Måleusikkerhet
Alle bidrag til måleusikkerheten skal identifiseres og
innbyrdes vektes for alle metoder. Metoder som
bygger på samme analyseteknikk eller prinsipp og
med felles konfirmerings og avlesningsprosedyrer kan
behandles samlet som en enhet.
Measurement uncertainty
For all methods contributions to measurement
uncertainty shall be identified and weighted. Methods
based on equal analytical techniques or principles can
be treated as a group.
For kvantitative metoder skal måleusikkerheten
beregnes i hht. laboratoriets egen prosedyre. For
veiledning henvises det eksempelvis til rapport fra
NAs sektorkomite P9, ISO/TS 19036 og NMKL
prosedyre nr. 8. Se også NA Dok. 9. Beregnet
måleusikkerhet må etterprøves regelmessig.
For quantitative methods the measurement
uncertainty shall be estimated according to the
laboratory own procedure. Guidance documents are
available e.g. ISO/TS 19036, Report from NAs sectorial
committee P9 (only available in Norwegian), and
NMKL Procedure No 8. See also NA Dok. 9. Estimated
measurement uncertainty shall be regularly reviewed.
Beregnet måleusikkerhet for kvantitative metoder
skal være tilgjengelig for laboratoriets kunder.
Informasjonen må foreligge i en slik form at den er
forståelig for kunden.
Estimated measurement uncertainties for quantitative
methods shall be available to customers. The
information has to presented in a way that is
understandable to the customers.
Inkluderes grenseverdier i analyserapportene skal
også den beregnede måleusikkerheten tas med.
If specifications or tolerance limits are included in the
test report, the estimated measurement uncertainties
shall be reported too.
5.
5.
Kontroll av dyrkningsmedier
Quality control of culture media
Egenproduserte dyrkningsmedier:
Laboratoriet bør ha et kvalitetskontrollprogram for
egenproduserte dyrkningsmedier som benyttes i
akkrediterte analyser. Kontrollprogrammet kan
gjennomføres som en forhåndsgodkjenning før et
parti tas i bruk eller i tilknytting til den enkelte
analyseserie parallelt med rutineanalysene.
Laboratory made culture media:
The laboratory should establish a quality control
program for all in house produced culture media and
relevant reagents used for accredited analysis. Quality
control analysis may be performed beforehand of
ordinary use or in parallel with testing of customer’s
samples.
Kontrollprogrammet bør minimum bestå av følgende
elementer:
 Bruk av positive og negative/ikke-typiske
kontrollstammer får å demonstrere:
o Egnethet av selektive dyrkningsmedium
(kvalitativ kontroll)
o Reproduserbare resultater (kvantitativ
kontroll)
 Visuell utseende kontroll (mengde, inntørking,
overflate, osv)
 pH-kontroll
The control programme should at least consist of
following elements:
 Growth performance tests of culture media to
demonstrate
o suitability by use of positive and negative
control organisms (qualitative control)
o reproducible results (quantitative
control)
 Physical appearance (quantity, water loss, surface
etc)
 pH-control
NA Dok. 57 / NA Doc. 57: Veiledning til akkrediteringskravene
for mikrobiologiske laboratorier (Guidelines on accreditation in
microbiology)


Sterilkontroll
Volumkontroll (fortynningsrør etc.)
Dersom dehydrerte medier fra anerkjente, ISO 9001
godkjente produsenter anvendes, kan laboratoriet
redusere frekvensen for de kvantitative kontrollene.
Kontrollprogrammet bør utføres på alle partier som
produseres. Vurdering av utseende, pH-kontroll og
sterilkontoroll bør inngå hver gang. Kontrollfrekvens
for øvrige kontrollparametere settes på grunnlag av
blant annet produksjonsutstyr, lagringsforhold og
hvor ofte laboratoriet utfører analysen.
Bruksklare, kommersielle dyrkningsmedier:
Veiledning i EA-4/10, pkt. 7.3 bør følges.
Dokumentasjon av visuell inspeksjon ved mottak er et
minimumskrav. Øvrige kontroller kan dokumenteres
gjennom produsentens kontrollsertifikater.
Produsenten må være ISO-sertifisert eller tilsvarende
dersom produsentkontrollen skal kunne godkjennes.
Innholdet i kvalitetssertifikater skal følge prinsippene i
ISO/TS 11133. Er det fare for at produktene er blitt
skadet under transport må funktsjonskontroller
gjennomføres og dokumenteres. Skader kan oppstå
ved for høy temperatur, frost, fare for
krysskontaminasjon ved punktert emballasje og
lignende.


Dok.id.:
VII.1.30
Versjon: 5.01
Side:
6 av 12
Sterility control
Volume control (e.g. diluents tubes)
If dehydrated culture media is purchased from
recognized, ISO 9001 approved producers, the
laboratory can reduce the frequency of quantitative
control tests.
The control programme should cover all batches
produced. Physical appearance, sterility control and
pH-control shall be carried out each time. As for the
rest, the laboratory has to settle the control frequency
due to production equipments, storage conditions and
daily use.
Ready to use commercial culture media:
Guideline EA-4/10, clause 7.3 should be followed. On
reception visual inspection and recording is a
minimum requirement. Control certificates from the
producers are accepted as documentation. The
producer has to be ISO certified or have similar
approvals on the same quality level. The content of
quality control certificates provided from the producer
should follow the principals given in ISO/TS 11133. If
there is a risk that the products are damaged during
transport quality controls must be performed and
documented. Damages may be caused by high
temperature, low temperature, cross contamination
due to punctured packaging etc.
Kjemikalier:
Kjemikalier og kit som brukes til
verifisering/konfirmering må kontrolleres og
dokumenteres i henhold til kravene i ISO/TS 11133.
Kontrollsertifikater fra produsenter godtas som
dokumentasjon. Produsenten må være ISO-sertifisert
eller tilsvarende dersom produsentkontrollen skal
kunne godkjennes. Er det fare for at produktene er
blitt skadet under transport må funktsjonskontroller
gjennomføres og dokumenteres. Skader kan oppstå
ved for høy temperatur, frost, fare for
krysskontaminasjon ved punktert emballasje og
lignende.
Relevant litteratur: EA-4/10, ISO/TS 11133 og NMKL
prosedyre 10.
Chemicals:
Chemicals and kits used for verification/confirmation
should be controlled and documented according to ISO
11133. Control certificates from the producer are
accepted as documentation. The producer has to be
ISO certified or have similar approvals on the same
quality level. If there is a risk that the products are
damaged during transport quality controls must be
performed and documented. Damages may be caused
by high temperature, low temperature, cross
contamination due to punctured packaging etc.
6.
6.
Holdbarhetstid på dyrkningsmedier, testkit og
lignende
Relevant literature: EA-4/10, ISO/TS 11133 and NMKL
Procedure No 10.
Shelf life of culture media, test kits etc
Holdbarhetstiden angir tidsperioden der produsenten
garanterer at produktet tilfredsstiller spesifiserte krav.
Bruk av kit-interne og kit-eksterne positive/negative
kontroller verifiserer at test systemene samsvarer
med kravene og at testen utføres korrekt.
Shelf lives determined by the producer are the period
where the producer guarantees that specified
requirements are met. Use of kit internal and kit
external positive and negative quality controls verifies
that test systems comply with the requirements and
that the tests are carried out correctly.
Som hovedregel skal produsentens holdbarhetstider
overholdes. Ved leveringsproblemer fra produsenten
In general, the laboratory shall comply with shelf lives
determined by the producer. Due to delivery problems,
NA Dok. 57 / NA Doc. 57: Veiledning til akkrediteringskravene
for mikrobiologiske laboratorier (Guidelines on accreditation in
microbiology)
kan medier, testkit og lignende hvor holdbarhetstiden
er overskredet benyttes i en kortere periode.
Forutsetningen er at laboratoriet kan dokumentere at
bestillingen er sendt inn i rimelig tid før holdbarheten
er utløpt, og at egnede kontroller gjennomføres for å
dokumentere at produktene fungerer som tilsiktet.
Permanent forlengelse av produsentens
holdbarhetstid må dokumenteres med full validering.
Stressete organismer må inkluderes i valideringen.
7.
Bruk av kjøleinkubatorer
Kjøleinkubering av agarskåler før avlesing aksepteres
uten validering når det er beskrevet i standard,
eksempelvis ISO 6222 (1999). I slike tilfeller må
laboratoriet kunne dokumentere kjøletemperatur og
tidsperiode for nedkjøling i tillegg til
inkuberingstemperaturen.
Dok.id.:
VII.1.30
Versjon: 5.01
Side:
7 av 12
it is satisfactory to use culture media or test kits
exceeding expiry dates for a limited period. The
condition is that consumables are ordered in due time
before the expiry date and that evidence in form of
orders exists. To check the performance of expired
culture media and kits, suitable controls have to be
included on use.
Permanent extension of the producer’s shelf life
should be fully validated. The validation study should
include use of stressed microorganisms.
7.
Use of cooling incubators
For cultural methods it is acceptable to use
programmed cooling incubators without further
validation when this is described as a part of a
standard method, e.g. ISO 6222 (1999). In addition to
the incubation temperature, the laboratory should
measure and record the cooling time and the cooling
temperature.
Dersom kjøleinkubering ikke er omtalt i standard
metoden, er dette å anse som en modifisering av
metoden og må valideres. Krav til validering av
modifiserte metoder og egenutviklede metoder er
nærmere beskrevet i NA Dok 25/31.
Valideringen kan for eksempel bestå av
sammenligning av analyseresultater før og etter
kjøleinkubering. Valideringsstudiet må inkludere
prøver med samme matriks og bakgrunnsflora som de
rutineprøver laboratoriet normalt håndterer.
Valideringsdata fra andre laboratorier eller
samarbeidspartnere aksepteres dersom valideringen
er omfattende nok og studiet innholder relevante
matriks.
Use of programmed cooling incubators in standard
methods not describing such equipment is regarded as
a modification of the method and has to be validated.
NA Doc 25/31 gives further information about
requirements for validation of modified methods and
in-house developed methods. The documentation can
e.g. be comprised of results obtained before and after
use of the cooling stage in the method. The validation
study should include matrixes regularly analysed in
the laboratory. Validation data obtained from other
laboratories or joint venture partners is acceptable if
relevant matrixes are included.
8.
8.
Registrering av rådata
Tilstrekkelig informasjon for kunne rekonstruere
analyse resultater må registreres. Eksempel på slik
informasjon er:
 Prøvebehandling og fortynningsfaktorer
 Utstyr og forbruksmateriell (fortynningsvæsker,
dyrkningsmedier, test kit og reagenser)
 Resultater (antall kolonier, karakteristika eller
koloniutseende, konfirmerte kolonier og
beregninger)
 Kvalitetskontroll resultater
Alle arbeidsoperasjoner skal være sporbare til
personell som har gjennomført det enkelte steg.
Overføring av data skal kontrolleres på en systematisk
måte. Papirbasert og elektronisk dokumentasjon
sidestilles.
9.
Testkit og kommersielle metoder
Som for standardiserte metoder, skal laboratoriet ha
etablert et system for styring og regelmessig
Recording of raw data
Information needed to reconstruct test results shall be
recorded. Examples are:
 sample handling and dilution factors
 equipments and consumables (diluents, culture
media, test kits or reagents)
 Results (number of colonies, characteristics or
physical appearance of colonies, number of
confirmed colonies, calculations)
 quality control results
All working steps shall be traceable to the specific
operators. Transferences of data or test results shall
be systematically checked. Paper based systems and
electronically systems are equal.
9.
Test kits and commercial methods
As for standard methods, the laboratory shall have
established a system for document control in
NA Dok. 57 / NA Doc. 57: Veiledning til akkrediteringskravene
for mikrobiologiske laboratorier (Guidelines on accreditation in
microbiology)
Dok.id.:
VII.1.30
Versjon: 5.01
Side:
8 av 12
gjennomgang av valideringssertifikater og
pakningsvedlegg (brukerveiledning) for kommersielt
tilgjengelige metoder.
connection to test kits and commercial methods.
Validity of validation certificates, user instructions and
kit inserts shall be reviewed on regular basis.
Det skal foreligge dokumentasjon på tilfredsstillende
validering før testkit og kommersielle metoder tas i
bruk. Dokumentasjonen fra produsent skal
fortrinnsvis inkludere tredje parts validering for
eksempel fra AOAC, AFNOR eller NordVal. Dersom
tilfredsstillende dokumentasjon ikke foreligger, må
laboratoriet gjennomføre supplerende utprøvinger.
Documentation of validation shall be available for
commercial test kits before use. Documentation from
the producer shall preferably contain third party
evaluations, e.g. from AOAC, AFNOR or NordVal. If
satisfactorily documentation is not provided,
supplementary in house validation has to be carried
out.
Dersom beskrivelser i pakningsvedlegg
(brukerveiledning) for kommersielt tilgjengelige
metoder avviker fra beskrivelsene i gyldig
valideringssertifikat, er det laboratoriets ansvar å
validere endringene eller fremskaffe
valideringsdokumentasjon.
If instructions in user guides and kit insert deviate
from valid validation certificates and validation
reports, the laboratory has the responsibility to
validate the deviation or obtain correct validation
documentation.
10. Overgang til ny utgave av metoder
10. Implementation of revised versions of methods
Reviderte versjoner av standardmetoder og
tredjepartsvaliderte kommersielle metoder skal
implementeres raskest mulig, senest 6 måneder etter
utgivelsesdato (NA Dok 25/31 pkt. 2.2). Ved overgang
til ny versjon skal laboratoriet sende melding til
saksbehandler i Norsk Akkreditering. Dersom den
reviderte versjonen medfører vesentlige, tekniske
endringer må laboratoriet søke Norsk Akkreditering
om godkjenning for overgang til ny utgave. Uansett
grad av endringer må det utarbeides en rapport som
oppsummerer de evalueringer som er gjennomført,
behovet for validering/innkjøring og evt. resultater og
konklusjoner fra validering/innkjøring.
Revised versions of standard methods and third party
validated commercial methods shall be implemented
as fast as possible not later than 6 month after issuing
(NA Doc 25). When implementing new versions of
standard methods, information shall be given to the
case officer in Norwegian Accreditation. If essential
changes are performed according to a standard
method, the laboratory shall in advance of
implementation, apply Norwegian Accreditation for
approval. Regardless seriousness of changes, a
summary report shall be worked out for all kinds of
validation and implementation.
Tillegg (Amendment) til standard metoder som utgis
av et standardiseringsorgan skal betraktes som en del
av standard metoden. Som for standard metoder skal
implementering foretas raskest mulig, senest 6
måneder etter utgivelsesdato.
An amendment to a standard method issued by a
standardization body shall be apprehended as a part
of the standard method. Like standard methods,
amendments shall be implemented as fast as possible
not later than 6 month after issuing.
11. Avvik fra standard metoder
11. Deviation from standard methods

ISO 9308-1 Påvisning og telling av E.coli og
koliforme bakterier
Standardmetodens punkt 8.3, Note 2 beskriver en
tilfredsstillende måte å forhindre bakgrunnsvekst.
o
Inkubering av et ekstra filter ved 44 C ligger innefor
anvendelsesområdet til standardmetoden, men anses
som en valgfri del av metoden.



ISO 6222 Bestemmelse av dyrkbare
mikroorganismer (kimtall)
Standardmetodens punkt 6 angir at analysestart skal
finne sted innen 12 timer etter prøveuttak. Norsk
Akkreditering aksepterer at laboratoriet utvider
ISO 9308-1 Detection and enumeration of E. coli
and coliform bacteria
The standard method, clause 8.3, Note 2,
describes an acceptable procedure for reducing
background flora. Incubation of an extra filter at
o
44 C is within the scope of the standard method,
but this working step is not mandatory.
ISO 6222 Enumeration of culturable microorganisms, Colony count by inoculation in a
nutrient agar culture medium
The standard method, clause 6, requires analysis
within 12 hours after sampling. Norwegian
NA Dok. 57 / NA Doc. 57: Veiledning til akkrediteringskravene
for mikrobiologiske laboratorier (Guidelines on accreditation in
microbiology)
denne tidsgrensen til 24 timer under forutsetning av
at prøvene er tilfredsstillende nedkjølt under
transport og lagring. I analyserapporten skal det da
anmerkes at tiden fra prøvetaking til analysestart
avviker fra standardmetodens krav. I tillegg skal antall
timer fra prøvetaking til analysestart oppgis.
Dok.id.:
VII.1.30
Versjon: 5.01
Side:
9 av 12
Accreditation accepts that the laboratory extend
the time limit to 24 hours. If the time limit is
extended, the laboratory has to keep the sample
satisfactorily cooled during transportation and
storage. A statement about the deviation from
the requirements in the standard method shall
be given in the test report. In addition, the
number of hours from sampling to analysis shall
be given.

Bestemmelse av koliforme bakterier; metoder
o
som angir dyrkning ved 35 ± 1 C
o
Norsk Akkreditering aksepterer angivelse av 36 ± 2 C
o
og bruk av 37 ± 1 C uten at valideringsdokumentasjon
fremlegges. Det skal fremgå av laboratoriets
dokumentsjon at laboratoriet avviker fra standard
metode eller fra brukerveiledninger for tredjeparts
validerte kommersielle metoder. I
akkrediteringsdokumentet vil avvikende
dyrkningstemperatur bli angitt i merknadsfeltet.

12. Hygiene/overflatekontroll
12. Hygiene- and surface control
Akkreditering kan innvilges for prøvetaking og/eller
analyse ved bruk av:
 Svaber og tampong til kvalitativ analyse
 Svaber og Petrifilm til kvantitativ analyse
Accreditation may be granted for sampling and/or
testing using:
 Swabs and tampons for qualitative testing
 Swabs and Petrifilms for quantitative testing
Standardiserte metoder bør benyttes både for
prøvetaking og analyse. Ikke-standariserte metoder
skal være fullt ut validerte. Instrukser fra nasjonale
myndigheter er ikke alltid tilfredsstillende validerte,
f.eks. nasjonal instruks utgitt av Mattilsynet for
prøvetaking i forbindelse med overflatekontroll av
slakteskrotter.
Standardized methods should be used both for
sampling and for analytical methods. Nonstandardized methods shall be fully validated.
Instructions from national authorities are not always
validated, e.g. national instructions for sampling of
carcass surfaces issued by the Norwegian Food Safety
Authority.
Dersom både prøvetakingsmetode og analysemetode
er akkreditert, skal resultatet angis som kolonier pr.
arealenhet der hvor standardisert areal prøvetas.
Alternativt rapporteres resultatet sammen med en
beskrivelse av svabret område, pr. antall svabrete
enheter eller lignende.
If both the sampling method and the analytical
method are included in the accredited scope, the test
result shall be reported as colonies pr area sampled if
a defined area is sampled. Alternatively can the
number of units sampled or a description of the area
sampled, be attached to the result.
Dersom prøvetakingsmetoden ikke er inkludert i
akkrediteringen må dette klart framgå av
prøvingsrapporten. Resultatet skal da kun angis som
kolonier pr. svaber, tampong eller Petrifilm.
Opplysninger om svabret areal kan gis i
kommentarfelt på rapporten sammen med en
presiserering om at prøvetakingen ikke er akkreditert.
If the sampling method is not included in the
accredited scope, this shall be clearly specified in the
test report. The test result shall be reported as
colonies pr swab, tampon or Petrifilm. Additional
information about the sampled area can be given.
13. PCR-metoder
13. Polymerase Chain Reactions (PCR) methods
Norwegian Accreditation is using the standards ISO
22174, ISO 20838, ISO 20837 and ISO/TS 20836 for
assessment of PCR methods. The standard methods
point out requirements for validation, sample
handling, nucleic acid preparation, working
Norsk Akkreditering legger ISO 22174, ISO 20838, ISO
20837 og ISO/TS 20836 til grunn ved bedømmelse av
PCR metoder. Disse standardene stiller spesifikke krav
til validering av PCR baserte metoder,
Determination of coliform bacteria by methods
o
using incubation temperature of 35±1 C
Norwegian Accreditation accepts that the
laboratory gives an incubation temperature of 36
o
± 2 C in the standard operation procedure and
o
use 37 ± 1 C in practice. Deviations from the
original method shall be clearly pointed out in
the standard operation procedure. A
corresponding remark about the deviation in the
incubation temperature will be given in the
accreditation document.
NA Dok. 57 / NA Doc. 57: Veiledning til akkrediteringskravene
for mikrobiologiske laboratorier (Guidelines on accreditation in
microbiology)
Dok.id.:
VII.1.30
Versjon: 5.01
Side:
10 av 12
prøvebearbeiding, nukleinsyre-ekstraksjon,
arbeidsprosedyrer, lokaler/miljø, instrumenter/utstyr
og kvalitetskontroller. Norsk Akkreditering benytter
følgende krav/retningslinjer:
instructions, facilities/environment,
instruments/equipments and quality control. In
addition, Norwegian Accreditation applies the
following requirements/guidelines:
Validering:
I dag benyttes ofte PCR metoder som er kommersielt
tilgjengelige eller publiserte. Valideringsinformasjon
skal i slike tilfeller være tilgjengelig. Laboratoriet skal
ha vurdert metodens hensiktsmessighet. Full
validering skal gjennomføres for egen utviklete
metoder.
Validation:
Laboratories often use commercial available or
published PCR methods. Validation data for the
methods shall be easily accessible. The suitability of
the test shall be evaluated by the laboratory. In-hose
developed methods shall be fully validated.
Kommersielle kit kan også benyttes for begrensede
oppgaver som prøvepreparering og nukleinsyre
ekstraksjon. Som beskrevet ovenfor skal
valideringsdata være tilgjengelig og i tillegg vise at
kitet er hensiktsmessighet i forhold til laboratoriets
bruk.
Commercial kits can also be used for sample
preparation and nucleic acid extraction. As pointed
out above, validation data from the producer shall be
accessible, and validation data should prove suitability
of the kit in regular use.
Lokaler, miljø og arbeidsprosedyrer:
Arbeidsområdene skal være utformet for å forebygge
kontaminering. Arbeidsoppgaven skal organiseres
etter ”forward flow” prinsippet. Det skal benyttes
ulike frakker i pre- og post-PCR områder.
Engangshansker skal benyttes under prøvebehandling
og mens PCR settes opp. Frakker og hansker skal
byttes ved passende frekvens.
Facilities, environment and working procedures
Facilities shall be designed to prevent DNA
contamination. Dedicated work areas shall be
organized according to ”forward flow” principal.
Different laboratory coats shall be worn in pre-PCR
area and post-PCR area. Disposable gloves should be
used during sample preparation and set up of the PCR
reaction. Laboratory coats and gloves shall be
changed at adequate intervals.
Pipetter:
Minst tre sett skal benyttes:
 prøve behandling
 master miks tillaging
 post amplifiseringstrinn
I laboratorier som benytter real time PCR metoder
kan antall pipettesett begrenses til to.
Pipettes
At least three sets of pipettes shall be used:
 Sample preparation
 Preparation of master mix
 Post amplifying process
In laboratories using real time PCR methods, the sets
of pipettes can be restricted to two. Filter tips shall be
used.
Det skal benyttes pipettespisser med filter.
Termocyklere:
Temperaturen/temperatursyklusen skal kontrolleres
før instrumenter tas i bruk og senerere ved
regelmessig intervaller. Kontrollen kan foregå enten
indirekte med en biokjemisk metode eller direkte med
tilfredsstillende sporbare referansenormaler. Begge
metoder er beskrevet i ISO 20836, punkt 6.2 og 6.3.
Thermocyclers:
The temperature/temperature cycle shall be checked
before taking the instrument into use and later on
regular intervals. The performance shall be checked
indirectly with a biochemical method or directly with a
physical method (Temperature measurement). Both
methods are described in ISO 20836, clause 6.2 and
6.3. Temperature measurement equipment with
proper traceability has to be used for the physical
method.
Kvalitetskontroll:
Kontrollene som kreves i PCR-reaksjoner er angitt i
ISO 22174, punkt 9.3, tabell 1. Kontrollfrekvensene
skal fastsettes som en del av laboratoriets
kvalitetsstyringssystem. Intern eller ekstern
amplifikasjonskontroll skal benyttes i hver PCR
Quality control:
Controls required for PCR-reactions are described in
ISO 22174:2005, clause 9.3, table 1. Frequency of
different control reactions shall be given in the
management system. Internal or external
amplification control shall be included in every PCR
NA Dok. 57 / NA Doc. 57: Veiledning til akkrediteringskravene
for mikrobiologiske laboratorier (Guidelines on accreditation in
microbiology)
Dok.id.:
VII.1.30
Versjon: 5.01
Side:
11 av 12
reaksjon. Avhengig av tilgjengelighet bør
referansematerialer (RM/SRM) og referansekulturer
inkluderes som positive og negative kontroller.
reaction. Depending on the availability, reference
materials (RM/CRM) and reference cultures should be
included as positive and negative controls.
Bruk av CT-verdier ved repportering av kvalitative
analyser:
Enkelte laboratorier ønsker å oppgi CT verdier ved
rapportering av positivt PCR resultat for kvalitative
analyser. CT verdier er semikvantitative og angir om
det er mye eller lite DNA/RNA til stede i prøven. Når
CT-verdier inkluderes i analyserapporter skal dette
oppfattes som en fortolkning av resultatet, og dette
skal fremgå i rapporten. For laboratorier som ikke er
akkreditert for vurdering og fortolkning skal dette
vare angitt i analyserapporten.
Use of CT-values for qualitative analysis in test
reports:
Some laboratories want to include the CT-value when
reporting positive PCR results from qualitative
analysis. The CT-values are semi-quantitative and is an
expression of the DNA/RNA content (high or low) in
the sample. When CT-values are included in the test
report shall they be regarded as an interpretation of
the test result, and this shall be expressed as such in
the report. Laboratories not accredited for opinions
and interpretations shall label the CT-values with “not
accredited” in the test report.
14. Relevant litteratur
EA-4/10 Accreditation for Microbiological laboratories
(www.european-accreditation.org ).
14. Relevant literature
EA-4/10 Accreditation for Microbiological
Laboratories. (www.european-accreditation.org )
ISO 7218 Mikrobiologi i matvarer og dyrefôr Generelle krav og veiledning for mikrobiologiske
undersøkelser.
ISO 7218 Microbiology of food and animal feeding
stuffs -- General requirements and guidance for
microbiological examinations.
ISO/TS 19036 Microbiology of food and animal
feeding stuffs -- Guidelines for the estimation of
measurement uncertainty for quantitative
determinations
ISO/TS 19036 Microbiology of food and animal
feeding stuffs -- Guidelines for the estimation of
measurement uncertainty for quantitative
determinations
ISO/TS 11133-1 Fôr- og næringsmiddelmikrobiologi Retningslinjer for produksjon av dyrkingsmedier - Del
1: Generelle retningslinjer for kvalitetssikring ved
tillaging av dyrkingsmedier
ISO/TS 11133-1 Microbiology of food and animal
feeding stuffs -- Guidelines on preparation and
production of culture media – Part 1: General
guidelines on quality assurance for the preparation of
culture media in the laboratory
ISO/TS 11133-2 Fôr- og næringsmiddelmikrobiologi Retningslinjer for produksjon av dyrkingsmedier - Del
2: Praktiske retningslinjer for kontroll av
dyrkingsmedier
ISO 22174 Fôr- og næringsmiddelmikrobiologi Polymerasekjedereaksjon (PCR) for påvisning av
matvarebårne patogener - Generelle krav og
definisjoner
ISO 20838 Mikrobiologi i matvarer og dyrefôr Polymerasekjedereaksjon (PCR) for påvisning av
matbårne patogener - Krav til sekvensformering og påvisning ved kvalitative metoder
ISO 20837 Mikrobiologi i matvarer og dyrefôr Polymerasekjedereaksjon (PCR) for påvisning av
matvarebårne patogener - Krav til prøvetilberedning
for kvalitativ påvisning
ISO/TS 20836 Fôr og næringsmiddel mikrobiologi Polymerase chain reaction (PCR) for påvisning av
ISO/TS 11133-2 Microbiology of food and animal
feeding stuffs -- Guidelines on preparation and
production of culture media – Part 2: Practical
guidelines on performance testing of culture media
ISO 22174 Microbiology of food and animal feeding
stuffs -- Polymerase chain reaction (PCR) for the
detection of food-borne pathogens – General
requirements and definitions
ISO 20838 Microbiology of food and animal feeding
stuffs -- Polymerase chain reaction (PCR) for the
detection of food-borne pathogens – Requirements for
amplification and detection for qualitative methods
ISO 20837 Microbiology of food and animal feeding
stuffs -- Polymerase chain reaction (PCR) for the
detection of food-borne pathogens – requirements for
sample preparation for qualitative detection
ISO/TS 20836 Microbiology of food and animal
NA Dok. 57 / NA Doc. 57: Veiledning til akkrediteringskravene
for mikrobiologiske laboratorier (Guidelines on accreditation in
microbiology)
matbårne patogener - Prøving av apparaturens
temperaturnøyaktighet
NA Dok. 9 Veiledning til akkrediteringsvilkår for
laboratorier (www.akkreditert.no).
NA Dok. 25/31 Akkrediteringsvilkår
(www.akkreditert.no).
NMKL prosedyre nr.8 Måleusikkerhet ved kvantitativ
mikrobiologisk undersøkelse av næringsmidler.
(www.nmkl.org).
NMKL prosedyre nr.10 Kontroll av mikrobiologiske
dyrkningsmedier. (www.nmkl.org).
NMKL prosedyre nr.18 Bruk av referansematerialer,
referansestammer og kontrollkort i mikrobiologiske
næringsmiddellaboratorier. (www.nmkl.org).
Dok.id.:
VII.1.30
Versjon: 5.01
Side:
12 av 12
feeding stuffs -- Polymerase chain reaction (PCR) for
the detection of food-borne pathogens – Performance
testing for thermal cyclers
NA Doc 9 Guidance to the accreditation conditions for
laboratories (www.akkreditert.no).
NA Doc 25/31 Accreditation conditions
(www.akkreditert.no).
NMKL Procedure No 8 Estimation of Measurement
Uncertainty in Quantitative Microbiological Testing of
Foods (www.nmkl.org).
NMKL Procedure No 10 Control of microbiological
culture media (www.nmkl.org).
NMKL Procedure No 18 Use of reference materials,
reference strains and control charts in a food
microbiology laboratory (www.nmkl.org).
NordVal ( www.nmkl.org/NordVal/ ).
NordVal ( www.nmkl.org/NordVal/ ).
Rapport fra NAs sektorkomite P9: Måleusikkerhet ved
mikrobiologiske metoder (www.akkreditert.no).
Kryssreferanser
Eksterne referanser
Report from NAs sectorial committee P9:
Measurement uncertainty in microbiology (only
available in Norwegian) (www.akkreditert.no).