Transcript H - Fapet C 2010

Laboratorium FisIologi Ternak dan BIokimia
FAKULTAS PETERNAKAN UNIVERSITAS PADJADJARAN
PROTEIN ADALAH MAKRO MOLEKUL
B.M. 5000 spi 1 JUTA
DITEMUKAN PADA SETIAP BAGIAN DARI SEL
50% BOBOT KERING SEL
A. FUNGSI BIOLOGI PROTEIN
•ENZIM
•PROTEIN STRUKTURAL
•PROTEIN MOTIL
•PROTEIN NUTRIEN
•PROTEIN HORMON
•PROTEIN TRANSPOR
•PROTEIN ANTIBODI
•PROTEIN LAIN :
MONELIN
RASA AMAT MANIS
PLASMA DARAH BEBERAPA JENIS IKAN
ANTI BEKU
RESILIN, PERSENDIAN (ELASTIS) SAYAP INSEKTA
•PROTEIN BERSIFAT RACUN
B. BERAT MOLEKUL BEBERAPA PROTEIN
PROTEIN
BM

INSULIN (SAPI)

RIBONUKLEASE (PANCREAS SAPI)
12.640

LISOSINI (PUTIH TELUR)
13.930

MIOGLOBIN (JANTUNG KUDA)
16.890

KHIMOTRIPSIN (PANCREAS SAPI)
22.600

HEMOGLOBIN (MANUSIA)
64.500

SERUM ALBUMIN (MANUSIA)
68.500

HEKSOKINASE
102.000

- GLOBULIN (KUDA)
149.900

GLUTAMAT DEHIDROGENASE (HATI SAPI)
5.733
1.000.000
C. PENGGOLONGAN PROTEIN BERDASARKAN FUNGSI BIOLOGIS


GOLONGAN
ENZIM
CONTOH
- RIBONUKLEASE
PROTEIN TRANSPORT
- TRIPSIN
- HEMOGLOBIN
- ALBUMIN SERUM
- MIOGLOBIN

PROTEIN NUTRIEN
- 1 – LIPOPROTEIN
- GLIADIN (GANDUM)
- OVALBUMIN (TELUR)
- KASEIN (SUSU)

PROTEIN KONTRAKTIL
- FERITIN
- AKTIN
- MIOSIN
- TUBULIN

PROTEIN STRUKTURAL
- DYNEIN
- KERATIN
- FIBROIN
- KOLAGEN
- ELASTIN

PROTEIN PERTAHANAN
- PROTEOGLIKAN
- ANTIBODI
- FIBRINOGEN
- TROMBIN
- TOKSIN BOTOLINUS
- TOKSIN DIFTERI

PROTEIN PENGATUR
- BISA ULAR
- INSULIN
- KORTIKOTROPIN
- GH
• PROTEIN
ASAM AMINO
HIDROLISIS
(MAKRO MOLEKUL)
C,H,N,O,S,P, Fe,Cu,Zn,I
HIDROLISIS
(UNIT MOLEKUL)
(UNSUR)
• SEMUA JENIS PROTEIN DENGAN FUNGSI YANG
BERANEKA HANYA DIBANGUN DARI 20 A.A. SAJA
TIAP JENIS PROTEIN MENGANDUNG PROPORSI A
SAM AMINO YANG BERBEDA NYATA DENGAN JENIS LAIN
• BEBERAPA PROTEIN MENGANDUNG GUGUS KIMIA LAIN DISAMPING A.A.
 PROTEIN SEDERHANA
HANYA MENGANDUNG ASAM AMINO, TIDAK GUGUS KIMIA LAIN
 PROTEIN KONYUGASI
MENGHASILKAN KOMPONEN KIMIA LAIN DISAMPING ASAM AMINO
SETELAH DIHIDROLISIS
GUGUS PROSTETIK
D. PROTEIN KONYUGASI
GOLONGAN
GG.PROSTETIK
CONTOH

LIPOPROTEIN
LIPID
1- LIPOPROTEIN DARAH

GLIKOPROTEIN
KARBOHIDRAT
 - GLOBULIN DARAH

FOSFOPROTEIN
GG.FOSFAT
KASEIN - SUSU

HEMOPROTEIN
HEME
HEMOGLOBIN

FLAVOPROTEIN
FLAVIN - NUKLEOTIDA
SUKSINAT - DEHIDROGENASE

METALOPROTEIN
BESI, SENG
FERITIN, ALKOHOL
DEHIDROGENASE
INI BERBEDA
INI SAMA
PROTEIN DENGAN RATUSAN ATAU
RIBUAN MOLEKUL AA
AA BERSAMA-SAMA BERANTAI
MEMBENTUK PROTEIN
 20 AA DIKETEMUKAN DI DALAM PROTEIN, DINAMAKAN MONOMER
 SUATU RANTAI PROTEIN-PROTEIN DINAMAKAN POLYMER
 SETIAP AA DIBENTUK DARI C, H, O, N KADANG-KADANG S : C H O N
2 5 2
C6H14O2N2
C3H7O2NS
GLYCINE
LYSINE
CYSTEINE
ASAM AMINO
•  ASAM AMINO MEMPUNYAI GUGUS AMINO DAN GUGUS
KARBOKSILAT TERIKAT PADA  - ATOM KARBON YANG SAMA
O–H
O
ACID GROUP
(CARBOXYL)
C
(1)
H–C–N

(2)
R
H
BASIC GROUP
H
(AMINO)

MOLEKUL YANG MEMPUNYAI SIFAT ASAM DAN BASA DISEBUT : AMPHOTERIC
 PERBEDAAN AA k/ BEDA R GROUP
• MOLEKUL-MOLEKUL AMPHOTERIC MUNGKIN MEMBENTUK “
INTERNAL SALTS”, DISEBUT : ZWITTERIONS
O
C
O-– H
+
C–N
H
H
H
R
• PADA MOLEKUL ASAM  AMINO TERDAPAT ATOM C ASIMETRIK
PADA RUMUS RUANG (STEREO) POSISI –NH2 ADA DUA
(MEMILIKI 2 ISOMER RUANG)
R
R
H2N – C – H
H – C – NH2
C
O
C
OH
O
OH
L – ASAM  - AMINO
D – ASAM  AMINO
( LEAVO = KIRI)
( DEXTRO = KANAN)
 DI ALAM BANYAK DITEMUKAN :
L – ASAM  - AMINO
ATOM C PADA KE 20 AA ASIMETRIS, KECUALI PADA AA GLISINA
(GUGUS R-NYA ADALAH GUGUS H)
H
NH2 – C – H H
C
O
GLISINA
OH
• SINGKATAN AA
ASAM AMINO
SINGKATAN
LAMBANG
ALANIN
ALA
A
ARGININ
ARG
R
ASPARGIN
ASN
N
ASAM ASPARTAT
ASP
D
SISTEIN
CYS
C
GLUTAMIN
GLN
Q
ASAM GLUTAMAT
GLU
E
GLISIN
GLY
G
HISTIDIN
HIS
H
ISOLEUCIN
ILE
I
LEUCIN
LEU
L
LISIN
LYS
K
METIONIN
MET
M
FENILALANIN
PHE
F
PROLIN
PRO
P
SERIN
SER
S
TREONIN
THR
T
TRIPTOFAN
TRP
W
TIROSIN
TYR
Y
VALIN
VAL
V
• KE – 20 AA TERNYATA BERSIFAT OPTIKA  MAMPU MEMUTAR BIDANG SINAR
TERPOLARISASI KE KIRI ATAU KE KANAN  ALAT YANG DAPAT MEMBACA BESARNYA
PUTARAN : POLARIMETER, DENGAN RUMUS:
 
O
25 C
D
0
a

pxc
LAMBANG
PUTARAN KHAS
25OC = KONDISI SUHU PENGAMATAN
D
= PANJANG GELOMBANG
aO
= PUTARAN KHAS
p
= PANJANG TABUNG
POLARIMETER (dm)
c
= KONSENTRASI DALAM gr/ml
Andi Mushawwir, S.Pt., MP.
 PUTARAN KHAS BEBERAPA AA
AA
PUTARAN KHAS
L-ALANIN
+ 1,8
L-ARAGININ
+ 12,5
L-ISOLEUCIN
+12,4
L-PENILALANIN
- 34,5
L-HISTIDIN
- 38,5
L-GLUTAMAT
+ 12,0
L-PROLIN
- 86,2
GAMBAR IKATAN PEPTIDA
O
O
O
-------- HN – CH – C –
R1
NH – CH – C
R2
O
CH – C ---------NH R3
IKATAN
PEPTIDA
RESIDU
ASAM AMINO-1
RESIDU
ASAM AMINO-2
RESIDU
ASAM AMINO-3
 ASAM AMINO BERIKATAN (SECARA KOVALEN) SATU
DENGAN YANG LAIN DALAM VARIASI URUTAN YANG
BERMACAM-MACAM MEMBENTUK SUATU RANTAI
POLIPEPTIDA
IKATAN PEPTIDA MERUPAKAN IKATAN ANTARA GUGUS  - KARBOKSIL DARI ASAM
AMINO YANG SATU DENGAN GUGUS  - AMINO DARI ASAM AMINO YANG LAINNYA
MAKA ILLUSTRASI PROTEIN SEBAGAI BERIKUT :
R1
O
C
C
N
N
C
H
R2
IKATAN PEPTIDA
R3
H
C
C
O
IKATAN PEPTIDA
N
H
 BANYAK PERBEDAAN DIANTARA PROTEIN  PERBEDAAN PROTEIN
MENGANDUNG PERBEDAAN KOMBINASI ASAM-ASAM AMINO,
ABAB
BERBEDA DENGAN
BABA
B
CONTOH : TELUR
DAGING
WOOL
ENZIM
INSULIN
51 AS.
AMINO
BM. 6000
B
A
A
HEMOGLOBIN
MANUSIA
578 AS. AMINO
BM. 63000
SUATU ENZIM UREASE DARI
KACANG-KACANGAN
4500 ASAM AMINO
BM. 473000
 ASAM-ASAM AMINO TIDAK HANYA DIPERGUNAKAN UNTUK MEMBENTUK
PROTEIN-PROTEIN, TAPI BEBERAPA JUGA MERUPAKAN AWAL UNTUK SINTESIS
KOMPONEN-KOMPONEN DI DALAM SEL, CONTOH :
AMINO ACIDS
ASPARTIC
ACID
GLISINE
GLUTAMIC
ACID
PART OF
PYRIMIDINE
MOLECULE
PART OF
PURINE
MOLECULE
PART OF
PORPHYRIN
MOLECULE
CYTOCHROMES
NUCLEIC
ACIDS
HEMOGLOBIN
CONTOH LAIN :

GLISINE
DIPERLUKAN UNTUK MENSINTESIS
MAKRO MOLEKUL HEM
DARI HEMOGLOBIN

TRIPTOPAN
DIPERLUKAN UNTUK MENSINTESIS
SENYAWA PADA SISTEM
SYARAF

TIROSIN
DIPERLUKAN UNTUK MENSINTESIS
KOMPONEN KULIT, yi.
MELANIN
•ASAM AMINO ESENSIAL (BAGI HEWAN ATAU MANUSIA)
SEL TUBUH HEWAN/MANUSIA TIDAK DAPAT MENSINTESIS AA YANG DIPERLUKAN OLEH
JARINGAN TUBUHNYA SENDIRI  AA JENIS INI HARUS DIDATANGKAN D
ARI LUAR (MAKANAN)  AA INI DISEBUT AA ESENSIAL
CONTOH :
HISTIDIN, METIONIN, VALIN, ISOLEUCIN, TREONIN, LISIN, TRIPTOPAN,
ARGININ HANYA ESENSIAL PADA MASA BAYI
 AA NON PROTEIN
AA YANG TIDAK TERGOLONG PADA 20 AA PEMBENTUK PROTEIN DISEBUT AA
NON PROTEIN. FUNGSINYA BEBERAPA SUDAH ADA YANG DIKETAHUI
H
CH3
C4
3CH2
H5
2CHCOOH
NH
CH2
N
5
H
CHOH
(CH2)2
4 – HIDROKSI PROLIN
2
CHNH2
1
COOH
5 - HIDROKSILISIN
 KEDUA AA INI DITEMUKAN PADA KOLAGEN DARI JARINGAN PENGIKAT
CH3
NH
6
(CH2)4
2
CHNH2
1
COOH
AA INI DITEMUKAN
PADA MIOSIN YAITU
PROTEIN OTOT UNTUK
KONTRAKSI
6 – N – METILISIN
• BERDASARKAN KENYATAAN DI ATAS MAKA YANG MEMBEDAKAN KE 20 AA
TERSEBUT ADALAH GUGUS R-NYA
SIFAT – KIMIA FISIK DARI KE-20 ASAM -AMINO
TERLETAK PADA GUGUS R-NYA
SIFAT-SIFAT GG.R DARI 20 AA INI PADA
LARUTAN BER- pH 7, SBB :
1. NON – POLAR, HIDROFOBIK
 TIDAK DAPAT MEMBENTUK IKATAN HIDROGEN DENGAN H2O
ALANIN
(Ala/A)
ISOLEUSIN
(Ileu/I)
LEUSIN
(Leu/L)
METIONIN
(Met/M)
FENILALANIN
(Phe/F)
PROLIN
(Pro/p)
TRIPTOFAN
(Trip/W)
VALIN
(Val/V)
2. POLAR, TETAPI TIDAK BERMUATAN
 DAPAT MEMBENTUK IKATAN HIDROGEN DENGAN H2O
ASPARAGIN
(Asn/N)
SISTEIN
(Cys/C)
GLUTAMIN
(Gln/Q)
GLISINA
(Gly/G)
SERINA
(Ser/S)
TREONIN
(Thr/T)
TIROSIN
(Tyr/Y)
3. GUGUS R BERMUATAN NEGATIF
ASAM ASPARTAT
(Asp/D)
ASAM GLUTAMAT
(Glu/E)
4. GUGUS R BERMUATAN POSITIF
ARGININ
(Arg/R)
HISTIDIN
(His/H)
LISINA
(Lys/K)
•SIFAT YANG BERBEDA-BEDA DARI GUGUS R AMAT PENTING KARENA AKAN
BERPERANAN DALAM MEMBICARAKAN PEPTIDA DAN TERHADAP PROTEIN
PRIMER, SEKUNDER, TERSIER DAN KUARTER
• KELOMPOK (1)  8 AA
 PROLIN, GUGUS -AMINONYA DISUBSTITUSI OLEH GUGUS R-NYA
SEHINGGA TIDAK BEBAS DAN TERBENTUKALAH STRUKTUR AROMATIK
INDOL
TRIPTOFAN, GUGUS R-NYA MENGANDUNG GUGUS INDOL YANG
BANYAK DITEMUKAN PADA BERBAGAI ZAT BIOLOGI
H
• KELOMPOK (2)  7 AA
GUGUS R-NYA WALAUPUN TIDAK BERMUATAN, TETAPI POLAR, BERARTI DAPAT
BERINTERAKSI DENGAN MOL. H2O MEMBENTUK IKATAN HIDROGEN DAN
DIKATAKAN HIDROFILIK (SUKA AIR), ARTINYA AKAN LARUT DALAM AIR
1. AA DENGAN GUGUS R NON POLAR
COOH
I
H2N – C – H
CH
CH3
COOH
I
C–H
HN
CH
H3C
CH2
H2C
CH2
COOH
I
H2 N C H
COOH
I
H2N– C – H
COOH
I
H2N– C – H
CH3
LEUCIN
PROLIN
CH3
ISOLEUCIN
CH3
VALIN
COOH
I
H2 N– C – H
CH2
CH2
H3C
ALANIN
H – C – CH3
COOH
I
H2 N– C – H
COOH
I
H2N – C – H
CH2
CH2
CH2
C= CH
S
C
NH
CH3
FENILALANIN
TRIPTOFAN
METIONIN
2. AA DENGAN GUGUS R POLAR TAK BERMUATAN
COOH
I
H2N C – H
COOH
I
H2N C – H
COOH
I
H2N- C – H
CH2OH
H C – OH
H
GLISINE
COOH
I
H2N C – H
SERIN
CH3
TREONIN
COOH
I
H2N C – H
CH2
SH
SISTEIN
C
COOH
I
H2N C – H
COOH
I
H2N – C – H
CH2
C
CH2
OH
CH2
O
TIROSIN
C
H2N
H2N
ASPARGIN
O
GLUTAMIN
3. AA DENGAN GUGUS R BERMUATAN NEGATIF
COOH
I
H2N – C – H
CH2
COOASAM ASPARTAT
COOH
I
H2N – C – H
CH2
CH2
COOASAM ASPARTAT
4. AA DENGAN GUGUS R BERMUATAN POSITIF
COOH
I
H2N C – H
COOH
I
H2N - C – H
COOH
I
H2N – C – H
C- H2
C- H2
CH2
C- H2
C- H2
C – NH
C- H2
C- H2
C- H2
N- H
N+H3
C=N+H2
LISIN
NH2
ARGININ
CH
C – N+
H
HISTIDIN
•YANG MENGANDUNG GUGUS HIDROKSIL IALAH AA SERIN, THREONINA DAN TIROSINA
GUGUS HIDROKSIL TIROSINA ADA PADA FENOL YANG BERFUNGSI SEBAGAI DONOR
PROTON YANG LEMAH ATAU DIKATAKAN ASAM LEMAH
O- + H+
OH
PROTON
•ASPARAGIN DAN GLUTAMIN MENGANDUNG GUGUS AMIDA
 GUGUS R. AA INI MIRIP DENGAN GUGUS R PADA ASAM ASPARTAT
DAN ASAM GLUTAMAT PADA KELOMPOK (3)
O
O
- CH2 – C
- CH2 – C
O-
NH2
ASPARAGIN
ASAM. ASPARTAT
O
O
- CH2 – CH2 – C
- CH2 – CH2 – C
O-
NH2
GLUTAMIN
ASAM. GLUTAMAT
•SISTEIN MENGANDUNG GUGUS SULFIDRIL ATAU TIOL YANG CENDERUNG AKAN
MELEPASKAN H+
SISTEIN DAPAT MEMBENTUK SISTIN JIKA DUA MOL SISTEIN BERINTERAKSI MEMBENTUK
IKATAN KOVALEN SEBAGAI JEMBATAN DISULFIDA, MISAL PADA PROTEIN
COOH
I
H2N C – H
2H
C- H2
SH
SISTEIN
H S
C- H2
H – C – NH2
COOH
SISTEIN
COOH
I
H2N – CH
C- H2
JEMBATAN DISULFIDA
S–S
C H2
H – C – NH2
SISTIN
COOH
SISTIN DITEMUKAN PADA MAKMOLEKUL INSULIN DAN IMMUNOGLOBULIN DIMANA
JEMBATAN DISULFIDA MENGHUBUNGKAN DUA RANTAI POLIPEPTIDA
•GUGUS R DARI GLISIN BERUPA ATOM HIDROGEN YANG PENGARUHNYA TERHADAP
GUGUS  AMINO DAN KARBOKSIL SEDIKIT SEKALI
• KELOMPOK (3)  2 AA
 R – KEDUANYA BERMUATAN TOTAL NEGATIF PADA pH 7.0, KEDUANYA MEMILIKI
GUGUS KARBOKSIL
 KEDUA AA INI HANYA SEDIKIT BERBEDA DENGAN ASPARAGIN DAN GLUTAMIN
• KELOMPOK (4)  3 AA
GUGUS R- NYA BERMUATAN TOTAL POSITIF PADA pH 7,0
GUGUS R LISIN MENGANDUNG GUGUS ASAM AMINO PADA POSISI E
(UJUNG RANTAI)
ARGININ PADA GUGUS R-NYA MENGANDUNG GUGUS GUANIDIUM YAITU SUATU
BASA N
 BASA GUANIDIUM KIRA-KIRA 1000 KALI LEBIH KUAT DARI BASA NH3
NH+3
C
ION GUANIDIUM
H2N
NH2
(ASAM KONYUGAT BASA GUANIDIN)
• HISTIDIN PADA GUGUS R-NYA MENGANDUNG GUGUS INI DAZOL
 GUGUS IMIDAZOL INI SEDIKIT SEKALI MENGION DAN DAPAT BEKERJA MENGIKAT
ION LOGAM
N:
HN
GUGUS IMIDAZOL
• AA DALAM LARUTAN
JIKA AA DILARUTKAN DALAM AIR, MAKA KEDUA GUGUS FUNGSIONIL AKAN
MENGALAMI IONISASI/DISOSIASI
• MISAL ALANIN
H
I
R – C – COONH3
+
H
R – C – COO- + H+
NH2
AKAN MENGHASILKAN H+ BERARTI
SEBAGAI DONOR PROTON, SEHINGGA
BERPERAN ASAM
• ATAU
H
I
R – C – COO- +H+
NH3
+
H
R – C – COOH
NH3
+
AKAN MENERIMA H+ BERARTI SEBAGAI AKSEPTOR
PROTON, SEHINGGA BERPERAN BASA
COOH
I
H2N – C – H
R
BENTUK NON-ORGANIK
COOH3+N – C – H
R
BENTUK DIPOLAR (ZWITERION)
TITIK ISOLISTRIK (TIL)
pH TIL
 REAKSI SPESIFIK AA
AA APAPUN JIKA DIREAKSIKAN DENGAN 2 MOL NINHIDRIN, AKAN MENGHASILKAN
PIGMEN BIRU, KECUALI PROLIN DAN HIDROKSIPROLIN AKAN MENGHASILKAN
PIGMEN KUNING
O
C
R – CH –
+2
C
NH3+
C
OH
O
AA
O
O
C
C
C
OH
COO-
N
NINHIDRIN
O
+R
C
C
C
O-
O
PIGMEN BIRU
C
+ 3H2O +
H
CO2 + H+
GUGUS AMINO DENGAN 1- FLUORO 2,4 – DINITRO BENZEN (FDNB) AKAN
MENGHASILKAN SENYAWA TURUNAN DINITROFENIL (DNP) YANG BERWARNA
KUNING-MERAH SPESIFIK
NO2
NH3+
R – CH – COO- + O2N
F
NO2
O2N
NH
TURUNAN DNP
(MERAH – KUNING)
R
CH + HF
COO-
PEPTIDA
UNIT KERANGKA SUATU PEPTIDA DISEBUT RESIDU AA
 DIPEPTIDA DIBANGUN OLEH DUA RESIDU AA  DST
UJUNG-UJUNG SUATU PEPTIDA MASIH MEMILIKI GUGUS KARBOKSIL DAN GUGUS AMINO
BEBAS DISEBUT :
- UJUNG C
- UJUNG N
PENAMAAN PEPTIDA DIDASARKAN PADA KOMPONEN ASAM AMINONYA. URUTAN DIMULAI
DARI RANTAI N-UJUNG
O
O
O
O
NH2 – CH – C – NH
CH2
O
O
CH – C – NH
CH
H
CH2
C – NH
CH –
CH3
OH
N - UJUNG
SER
GLI
O
O
- C – NH
OH
CH – COOH
CH2
C- UJUNG
CH
SERILGLISILTIROSILALANILLESINA
TIR
(CH3)2
LES
ALA
SIFAT ASAM-BASA PEPTIDA DITENTUKAN OLEH GUGUS UJUNGNYA NH2 DAN –COOH DAN
GUGUS R YANG DAPAT BERIONISASI
(1) N-UJUNG (BASA), (2) C-UJUNG (ASAM), (3) GUGUS R (ASAM/BASA)
 PROTEIN
PROTEIN DIBANGUN DARI UNIT KERANGKA 20 RESIDU AA
 SIFAT-SIFAT KIMIA FISIK PROTEIN MENGIKUTI SIFAT KIMIA FISIK AA SEBAGAI
UNIT KERANGKA
 PROTEIN STRUKTUR PRIMER
R1
H
O
R2
C
C
H
C
N
N
C
C
N
O
R2
H
H
H
H
O
N
C
C
C
O
R4
S
S
H
O
R2
H
O
R4
C
C
N
C
C
H
N
C
N
O
C
N
C
R1
H
C
R3
H
O
PROTEIN STRUKTUR SEKUNDER
C
II
O
H
I
N
C
II
O
H
I
N
STRUKTUR PRIMER BERPILIN
SATU PUTARAN PENUH,
MENGANDUNG 3,6 RESIDU AA
PROTEIN STRUKTUR TERSIER
COOH
NH2
PROTEIN STRUKTUR KWARTERER
+
DUA MOL.
PROTOMET.
PROTEIN STRUKTUR
KWARTNER
 REAKSI WARNA ASAM AMINO
REAKSI NINHIDRIN
ASAM
AMINO
PEPTIDA
+ NINHIDRIN
ZAT WARNA BIRU
 ANALISA ASAM AMINO
BERDASARKAN DAYA LARUT DAN SIFAT ASAM BASANYA
•KROMATOGRAFI PARTISI
•KROMATOGRAFI PENUKAR ION
•KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
•ELEKTROFORESIS
 DENATURASI
PERUBAHAN STRUKTUR PROTEIN AKIBAT PEMANASAN  60 – 70OC
CONTOH :
PUTIH TELUR
PUTIH BENING
DIPANASKAN
PUTIH PADAT
TIDAK DAPAT KEMBALI BENING
 SUBSTITUSI & TRANSMISI ASAM AMINO
ASAM AMINO ESENSIAL
DAPAT DIBENTUK (DISUBSTITUSI) DARI
ASAM AMINO NON ESENSIAL
CONTOH : METIONIN, DISUBSTITUSI DENGAN SISTIN
FENILALANIN, DISUBSTITUSI DENGAN TIROSIN
 ISOLASI/PEMURNIAN PROTEIN
RUMIT DAN SULIT
CONTOH :
ISOLASI PROTEIN YANG ADA DALAM SUKSINAT DEHIDROGENASE
(ADA DALAM MITOCHONDRIA)
TAHAP PEMURNIAN /ISOLASI
o PEMECAHAN SEL
o PEMISAHAN MITOCHONDRIA
o FRAKSINASI PROTEIN TAHAP DEMI TAHAP