Pengendalian Mutu Simplisia dan Ekstrak Tanaman Obat

PEKALONGAN 18 JUNI 2014

ACUAN

O O O O Materia Medika Indonesia Farmakope Herbal Indonesia, 2008 Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat, Departemen Kesehatan, 2000 (Keputusan Menteri Kesehatan R.I No: 55/MENKES/SK/I/2000 Monografi Ekstrak Tumbuhan Obat Indonesia (METOI), Badan POM 2004

Bentuk bahan obat/produk kefarmasian

O O Simplisia O Produk dari P4TO Ekstrak O Produk dari PED

SIMPLISIA

Simplisia

O O Bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang belum mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dikatakan lain, berupa bahan yang telah dikeringkan (MMI) Jenis simplisia: O Simplisia nabati: simplisia yang berupa tumbuhan utuh, bagian tumbuhan atau eksudat tumbuhan. Eksudat tumbuhan adalah isi sel yang secara spontan keluar dari tumbuhan atau isi sel yang dengan cara tertentu dipisahkan dari tumbuhannya dan belum berupa senyawa kimia murni O O Simplisia hewani Simplisia pelikan (mineral)

O O Simplisia menurut MMI hanya untuk penggunaan pengobatan Secara umum adalah simplisia nabati yang telah melalui proses pasca panen dan proses preparasi secara sederhana menjadi bentuk produk kefarmasian yang siap pakai atau siap diproses lebih lanjut yaitu: O O O Jamu : siap pakai dalam bentuk serbuk halus untuk diseduh sebelum diminum Infus : siap dipakai untuk dicacah dan digodok sebagai jamu godokan Diproses lebih lanjut untuk dijadikan produk sediaan farmasi lain yang umumnya melalui proses ekstraksi, separasi dan pemurnian yaitu menjadi ekstrak, fraksi atau bahan isolat senyawa murni

O

Pentingnya kontrol mutu

Simplisia sebagai produk pertanian atau tumbuhan liar memiliki kualitas mutu yang dipengaruhi oleh: O O O O O Variasi bibit: Identitas (spesies) Tempat tumbuh dan iklim: lingkungan (tanah dan atmosfer), energi (cuaca, temperatur, cahaya) dan materi (air, senyawa organik dan anorganik) Proses tumbuh (fertilizer, pestisida,...) Kondisi panen (umur dan cara): Periode pemanenan hasil tumbuhan: dimensi waktu terkait metabolisme pembentukan senyawa terkandung Proses pasca panen dan preparasi akhir: O O O Untuk simplisia dari tumbuhan hasil budidaya, dipengaruhi juga oleh proses GAP (Good Agricultural Practice) Untuk simplisia dari tubuhan liar (wild crop), dipengaruhi juga oleh proses pengeringan yang umumnya dilakukan di lapangan.

Penyimpanan bahan tumbuhan: berpengaruh pada stabilitas bahan (kontaminasi biotik dan abiotik)

Mutu suatu simplisia/ekstrak dikontrol dengan melakukan STANDARDISASI

Standardisasi

O O O Serangkaian parameter, prosedur dan cara pengukuran yang hasilnya merupakan unsur-unsur terkait paradigma mutu kefarmasian umumnya.

, mutu dalam artian memenuhi standar (kimia, biologi dan farmasi), termasuk jaminan (batas-batas) stabilitas sebagai produk kefarmasian Proses menjamin bahwa produk akhir (obat, ekstrak atau produk ekstrak) mempunyai nilai parameter tertentu yang konstan dan ditetapkan (dirancang dalam formula) terlebih dahulu TUJUAN : agar diperoleh bentuk bahan baku atau produk kefarmasian yang bermutu , aman serta bermanfaat

KONTROL MUTU BAHAN BAKU SIMPLISIA BASAH PROSES PASCA PANEN SIMPLISIA KERING EKSTRAKSI EKSTRAK CPOTB

Standardisasi/Kontrol mutu simplisia

Acuan: Materia Medika Indonesia O Kebenaran jenis (identifikasi spesies tumbuhan) O O O Parameter makroskopik : deskripsi morfologis simplisia Parameter mikroskopik : mencakup pengamatan terhadap penampang melintang simplisia atau bagian simplisia dan terhadap fragmen pengenal serbuk simplisia Reaksi identifikasi : Reaksi warna untuk memastikan identifikasi dan kemurnian simplisia (terhadap irisan/serbuk simplisia) O Kemurnian (bebas dari kontaminasi kimia, biologis): tidak selalu mungkin memperoleh simplisia sepenuhnya murni. Bahan asing yang tidak berbahaya dalam jumlah sangat kecil pada umumnya tidak merugikan O O O O Harus bebas dari serangga, fragmen hewan/kotoran hewan Tidak boleh menyimpang bau dan warnanya Tidak boleh mengandung lendir dan cendawan atau menunjukkan tanda-tanda pengotoran lain Tidak boleh mengandung bahan lain yang beracun/berbahaya

O Aturan penstabilan: wadah, penyimpanan, trasportasi O O O Pengawetan : Simplisia nabati boleh diawetkan dengan penambahan kloroform, karbon tetraklorida, etilenoksida atau bahan pengawet lain yang cocok, yang mudah menguap dan tidak meninggalkan sisa Wadah dan bungkus rapat.

: tidak boleh mempengaruhi bahan yang disimpan baik secara kimia/fisika, tertutup baik dan Penyimpanan : agar dihindari dari cahaya dan penyerapan air.

O O Simplisia sebagai bahan/produk yang dikonsumsi manusia sebagai obat: O Mutu, aman, manfaat Simplisia sebagai bahan dengan kandungan kimia yang bertanggungjawab terhadap respon biologis: harus memiliki spesifikasi kimia yaitu informasi komposisi (jenis dan kadarnya) senyawa kandungan.

Syarat baku simplisia

O O O O O Kadar air: tidak lebih dari 10% Angka lempeng total: tidak lebih dari 10 Angka kapang dan khamir: tidak lebih dari 10 Mikroba patogen: Negatif Aflatoksin: tidak lebih dari 30 bagian per juta Sari Jamu: O Diperbolehkan mengandung etanol tidak lebih dari 1% v/v (20 o C) O Kadar metanol: tidak lebih dari 0,1% dari kadar etanol

EKSTRAK

O O O O O

Standardisasi ekstrak

Simplisia sebagai bahan baku harus memenuhi persyaratan monografinya (MMI) Produk ekstrak harus memenui persyaratan: O Parameter standar umum O O Parameter standar spesifik Buku monografi Ekstrak : sediaan kental yang diperoleh dengan cara mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian rupa sehingga memenuhi baku yang telah ditetapkan Ekstrak cair : adalah sediaan dari simplisia yang mengandung etanol sebagai pelarut atau sebagai pengawet. Biasanya pada tiap ml ekstrak, mengandung senyawa aktif dari 1 g simplisia yang memenuhi syarat Infus : adalah sediaan cair yang dibuat dengan mengekstraksi simplisia dengan air pada suhu 90 o C selama 15 menit.

O

Faktor yang mempengaruhi mutu ekstrak

Faktor Biologi : Bahan asal tumbuhan O O O O O O O Identitas (spesies) Lokasi tumbuhan asal: lingkungan (tanah dan atmosfer), energi (cuaca, temperatur, cahaya) dan materi (air, senyawa organik dan anorganik) Periode pemanenan hasil tumbuhan: dimensi waktu terkait metabolisme pembentukan senyawa terkandung Penyimpanan bahan tumbuhan: berpengaruh pada stabilitas bahan (kontaminasi biotik dan abiotik) Umur tumbuhan dan bagian yang digunakan Untuk simplisia dari tumbuhan hasil budidaya, dipengaruhi juga oleh proses GAP (Good Agricultural Practice) Untuk simplisia dari tubuhan liar (wild crop), dipengaruhi juga oleh proses pengeringan yang umumnya dilakukan di lapangan.

O Faktor Kimia : O O Faktor internal: O Jenis senyawa aktif dalam bahan O Komposisi kualitatif senyawa aktif O Komposisi kuantitatif senyawa aktif O Kadar total rata-rata senyawa aktif Faktor eksternal: O O O O O O Metode ekstraksi Perbandingan ukuran alat ekstraksi (diameter dan tinggi alat) Ukuran, kekerasan dan kekeringan bahan Pelarut yang digunakan dalam ekstraksi Kandungan logam berat Kandungan pestisida

O O Mutu ekstrak berkaitan dengan senyawa kimia yang dikandung karena respon biologis yang diakibatkan oleh ekstrak disebabkan oleh senyawa kimia Ditinjau dari asalnya, senyawa kimia dalam ekstrak terbagi menjadi: O O O O Senyawa kandungan asli dari tumbuhan asal: senyawa yang memang sudah ada sejak masa tumbuhan tsb hidup Senyawa hasil perubahan dari senyawa asli: Dari penelitian telah diprediksi terjadinya perubahan kimia senyawa asli karena sifat fisikokimia yang labil Senyawa kontaminasi: polutan atau aditif Senyawa hasil interaksi kontaminasi dengan senyawa asli atau senyawa perubahan

PARAMETER NON SPESIFIK

O O O O O O O Kadar air dan Susut Pengeringan Kadar abu Sisa Pelarut Residu Pestisida Cemaran logam berat Cemaran mikroba Kadar Sari Larut Air dan Larut Etanol

PARAMETER SPESIFIK

O Identitas: Meliputi deskripsi tata nama, bagian tumbuhan yang digunakan dan senyawa identitas.

O Organoleptik Meliputi penggunaan panca indera untuk mendeskripsikan bentuk (padat, serbuk, kental, cair), warna, bau dan rasa O Kandungan kimia Untuk memberikan gambaran awal jumlah senyawa terkandung

UJI KANDUNGAN KIMIA EKSTRAK

O O O Pola kromatogram: KLT, KCKT, KG Kadar Total Golongan Kandungan Kimia: spektrofotometri, titrimetri, volumetri, gravimetri dll: O O O O O O O Golongan minyak atsiri Golongan steroid Golongan tanin Golongan flavonoid Golongan triterpenoid (saponin) Golongan alkaloid Golongan antrakinon Kadar kandungan kimia tertentu: senyawa identitas atau senyawa kimia utama atau senyawa aktif O Densitometer, KG, KCKT

PENGUJIAN SAMPEL TANGGAL : : Berat Sampel (gram) [a] Berat Sampel Setelah Pemanasan 105 o C [b] Berat Penyusutan =[a-b] Kadar Susut Pengeringan (%) = [a-b]/a x 100% Kadar rata-rata susut pengeringan KESIMPULAN 1. 1. 1. 1.

LEMBAR KERJA

: KADAR SUSUT PENGERINGAN 2. 2. 2. 2. 3. 3. 3. 3. Dilaksanakan oleh (__________________________) Diperiksa oleh Penanggungjawab lab. Tanggal, (____________________________)

Lampiran 1. Contoh Catatan Hasil Pengujian

Nama Perusahaan Alamat Perusahaan Telp. …… Fax ……. Nama Sampel : Simplisia Rajang

LAPORAN PENGUJIAN No. …../..…/…../20..

Tanggal Penerimaan Rimpang Kunyit Asal Sampel : ……………… No. Batch : ……………… Metoda SK Menkes RI : ………………. : FHI Edisi I 2008 No. 661/Menkes/SK/VII/1994

No.

1.

PEMERIKSAAN

Pemerian

SPESIFIKASI

Bentuk kepingan ringan, rapuh, warna kuning jingga, kuning jingga kemerahan sampai kuning jingga kecoklatan, bau khas, rasa agak pahit, agak pedas, lama kelamaan menimbulkan rasa tebal

HASIL

2. 3. 4. 5. Mikroskopik Pola kromatografi Susut pengeringan Abu total Sesuai FHI Edisi I 2008 Sesuai FHI Edisi I 2008 Tidak lebih dari 12% Tidak lebih dari 8,2% 6. 7. 8. 9. Abu tidak larut asam Sari larut air Sari larut etanol Kandungan kimia simplisia : a. a. Kadar minyak atsiri b. b. Kadar kurkuminoid 10. Tidak lebih dari 0,9% Tidak kurang dari 11,5% Tidak kurang dari 11,4% Tidak kurang dari 3,02% Tidak kurang dari kurkumin Tidak lebih dari 10 7 6,60% dihitung sebagai Mikrobiologi : a. Angka Lempeng Total b. Angka Kapang dan Khamir c. Bakteri Pathogen -

E. coli Salmonella sp. Staphylococcus aureus

-

Pseudomonas aeruginosa

Tidak lebih dari 10 Negatif Negatif Negatif Negatif 4

Kesimpulan : memenuhi syarat

Nama Kota, Tanggal Penanggung Jawab Pengujian ………………………

O

STANDARDISASI

TOTAL FLAVONOID Kurva Linier Standar Rutin 0,5 y = 0,0116x + 0,0533 R² = 0,9987 0,4 0,3 0,2 0,1 0 0 10 20 30 40 Sampel Daun Sirih Merah Kulit Manggis Keladi Tikus Daun Sirsak Berat (µg) A1 A2 A3 1000 1080 6144 1683 0,751 1,624 0,424 1,925 0,753 2,242 0,415 1,926 0,764 1,858 0,477 1,052 Arata-2 Kadar Total Flavonoid equivalen rutin (μg) dalam ekstrak 0,756 1,908 0,439 1,634 60,58 159,89 33,22 136,30 % Kadar Total Flavonoid dalam ekstrak 6,06 14,80 0,54 8,10

O TOTAL FENOL 2,500 2,000 1,500 1,000 0,500 0,000 0 Kurva Linier Standar Pyrogallol 10 20 y = 0,0483x + 0,0387 R² = 0,9969 30 40 50 Sampel Daun Sirih Merah Kulit Manggis Keladi Tikus Daun Sirsak Berat (μg) A1 A2 A3 84,48 69,24 0,170 0,254 0,228 0,074 0,086 0,034 687,00 0,143 0,152 0,146 68,70 0,416 0,416 0,420 Arata-rata total Fenol eq pyrogallol (µg) dalam ekstrak 0,217 0,065 0,147 0,417 3,70 0,54 2,24 7,84 % Kadar total fenol eq. pyrogallol dalam ekstrak 4,38 0,79 0,33 11,41

O KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS O ekstrak Kulit manggis menggunakan standar α-mangostin Ekstrak Kulit Manggis α- mangostin

O Daun Sirih Merah dan Daun Sirsak Standar Rutin Ekstrak Daun Sirsak Ekstrak Daun Sirih Merah Sampel Konsentr asi (μg/µl) Vol penotol an sampel (μl) Berat sampel (µg) D1 Daun Sirsak Daun Sirih Merah 11,44 10,7 5 5 57,2 1001,8 1491,4 53,5 474,7 D2 476,7 D3 513,4 Drata rata 1701,4 1398,2 488,3 Kadar rutin (μg) dalam ekstrak % kadar rutin dalam ekstrak 1,16 0,58 2,03 1,08

Prosedur Uji Fitokimia

O Terpenoid Pada plat tetes, sejumlah sampel di oles pada plat tetes kemudian ditambahkan vanillin dan 2 tetes asam sulfat pekat (H2SO4p. p.a). Diamati perubahan warna yang terjadi. Senyawa golongan terpenoid positif jika terjadi warna merah sampai ungu +

O Steroid/triterpenoid Pada plat tetes, sejumlah sampel dioles pada plat tetes, kemudian ditambahkan asam asetat anhidrid sampai terendam selama 5 menit, kemudian ditambahkan 1 tetes asam sulfat pekat. Diamati perubahan warna yang terjadi. Senyawa golongan steroid positif jika terjadi warna hijau kebiruan dan senyawa golongan triterpenoid berwarna merah sampai ungu . + + +

O Saponin Sejumlah sampel di masukkan kedalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan aquadest sampai terendam dan dipanaskan dalam waterbath 100 arah vertical. Senyawa golongan saponin o C selama 15 menit. Setelah dingin dikocok kuat-kuat positif jika terbentuk busa yang mantap.

-

O Fenol Pada plat tetes, sejumlah sampel dioleskan pada plat tetes kemudian ditambahkan larutan FeCl yang terjadi. Senyawa golongan fenol 3 (10% b/v dalam etanol). Diamati perubahan warna positif jika terjadi warna hitam, ungu, hijau, + + +

O Flavonoid Sejumlah sampel dimasukkan kedalam tabung reaksi dan ditambahkan butiran Mg. Kemudian ditambahkan HCl 2N sampai terendam dan dipanaskan pada waterbath 100 C selama 15 menit. Setelah dingin ditambahkan 5 tetes amyl alcohol. Senyawa golongan flavonoid positif jika terjadi warna merah sampai jingga pada lapisan amil alcohol.

-/+

O Tannin Sejumlah sampel dimasukkan kedalam tabung reaksi. Kemudian ditambahkan larutan HCl 2N sampai terendam dan dipanaskan dalam waterbath 100 C selama 15 menit. Setelah dingin ditambahkan 5 tetes amil alcohol. Senyawa golongan tannin positif jika terbentuk warna merah-jingga pada lapisan amil alkohol -

O Alkaloid Sejumlah sampel dibasakan dengan menggunakan Ammonia 10%, kemudian di ekstraksi dengan pelarut organik kloroform. Filtrat kloroform diambil dan ditambahkan HCl 2N, kemudian lapisan air diambil dan direaksikan dengan reagen Dragendorf. Senyawa golongan alkaloid positif jika terbentuk endapan berwarna merah bata .

+

TAMBAHAN

O Farmakope Herbal Indonesia: buku standar di bidang farmasi terutama untuk simplisia dan ekstrak yang berasal dari tumbuhan atau bahan alam lainnya, metode analisis, prosedur dan instrumennya, bahan baku pembanding, sediaan umum, ketentuan umum, lampiran2 dan penetapan standar yang berkaitan dgn standardisasi di bidang farmasi

O O O O O O O O O O O O

Dasar Hukum

UU No.36 Tahun 2009 tentang Kesehatan UU No.5 Tahun 1984 tentang Perindustrian PP No.17 Tahun 1986 tentang Kewenangan Pengaturan, Pembinaan dan Pengembangan industri Kepmenkes Nomor HK.03.01/60/I/2010 tentang Rencana Strategis Kementerian Kesehatan Tahun 2010 – 2014 Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 1144/MENKES/PER/VIII/2010 tentang Organisasi dan Tata Kerja Kementerian Kesehatan Permenkes 1799 Tahun 2010 tentang Industri Farmasi Peraturan Pemerintah No.72 Tahun 1998 tentang Pengamanan Sediaan Farmasi dan Alat Kesehatan Keputusan Ka BPOM no. HK.00.05.4.2411 tahun 2004 tentang Ketentuan Pokok Pengelompokkan dan Penandaan Obat Bahan Alam Indonesia Kepmenkes No. 381 Tahun 2007 tentang Kebijakan Obat Tradisional Nasional (KOTRANAS) Peraturan Menteri Kesehatan No. 1109/Menkes/Per/IX/2007 tentang Penyelenggaraan Pengobatan Komplementer dan Alternatif di Fasilitas Kesehatan Masyarakat Kepmenkes No.121 Tahun 2008 tentang Standar Pelayanan Medik Herbal Peraturan Menteri Kesehatan No.003/Menkes/Per/I/2010 tentang Saintifikasi Jamu dalam Penelitian Berbasis Pelayanan Kesehatan