Transcript Смотреть презентацию - Citymed

Реймерс Н.Ф. , 1991
Кузьмичев Л.Н.,2005
Дата и место
исследования
США
1930 - 1980
Европа
1938 - 1990
Франция
1989 - 1997
2002
Характеристики эякулята
Концентрация
(млн./мл.)
140
113
60
85,6
66
20
66,6
Подвижность
(%)
52,2
морфология
(%)
61,7
Объем
эякулята
(мл.)
Данные
ВОЗ
45,3
25% - А
50% - А+В
51,9
14%
На 0,7 мл.
уменьшился
2 – 6 мл.
Кузьмичев
Л.Н.,2005
объем
эякулята
Irvine S. et al, 1996
120
100
80
60
40
20
0
1913
1960
1970
1980
?
• Оценка наличия спермиев
• Оценка подвижности спермиев
• Однородность препарата
• Агглютинация и аггрегация
• Предварительная оценка воспаления
• Наличие лецитиновых зерен
• Кристаллы Бетхера
Показатели
спермогр.
клиники
Концентрация
(млн./мл.)
Подвижность
(А+В, %)
N морфология
(%)
Объем
Концентрация
Подвижность
Нормальное строение
2-5 мл.
20 млн./мл.
более 60%
более 60%
Карманный справочник по диагностическим тестам.
В.С.Камышникова, 2004 г.
ВОЗ 2002
Объем эякулята
1,5 мл. (1,4-1,7)
Концентрация сперматозоидов 15 млн./мл.(12-16)
Подвижность:
прогрессивноподвижных форм
32% (31-34)
подвижных форм
40% (38-42)
Морфологически нормальных форм 4% (3-4)
Human Reproduction Update , 2009
Есть ли
сперматозоиды?
Центрифугирование эякулята,
исследование осадка.
Появились спермии?
-
Исследование центрифугата
посторгазменной мочи.
Появились спермии?
-
+
+
Исследование концентрации
спермиев в камере Горяева
без разведения
Подвижные
они?
-
Исследование окрашенного
мазка эякулята. Клетки
сперматогенеза найдены?
+
+
-
Тест с
эозином.
Живые
есть?
-
+
+
-
Стандартная
спермограмма
Некроспермия
Аспермия
Азооспермия
Ретроградная
эякуляция
• Репродуктивная
группа ВОЗ
различает
•
• а). Сперматозоиды с
активно поступательным
движением
• наличие поступательного
движения
• скорость спермия 25-50мкм/с
• а > 25%
• b). Сперматозоиды с
поступательным
движением
• наличие поступательного
движения
• скорость спермия < 25мкм/с
• а + b > 50%
• c). Сперматозоиды без
поступательного
движения
• Феномен качания
• Манежные спермии
• скорость спермия < 3мкм/с
• d) Неподвижные
сперматозоиды
• d) Отсутствие любой
подвижности
Отличия
•
Нормы:
• c < 3%
• d) нет своей нормы
Спермий человека
«Строгие критерии»
морфологии по T. Kruger
• Головка
• длина 4,0-5,5 мкм
• ширина 2,5-3,5
• длина/ширина = 1,50-1,75
• Площадь акросомы = 40-70%
площади головки
• Хвост
• прямой
• не закрученный
• одинаковой толщины на всем
протяжении
• уже шейки
• длиной около 45мкм
• Шейка
• толщина менее 1 мкм
• длина 1,5 длины головки
• прикреплена к головке вдоль оси
• Цитоплазматические капли не
более 1/2 размера головки
Микроскопия
мазка
N морф. меньше 4% - оплодотворялось
7,6% ооцитов
N морф. от 4-14% - оплодотворялось
63,9% ооцитов
N морф. более 14% - оплодотворялось
85-88% ооцитов, при этом 99% эмбрионов
имплантиравалось.
Генные
Хромосомные
Нарушение компактизации хроматина
ядра
Фрагментация хроматина ядра
Показания к анализу фрагментации
ДНК
• бесплодие неясной этиологии
• привычное невынашивание
• варикоцеле
• половые инфекции
• возраст более 45 лет, курение,
токсические агенты
• перенесенные воспалительные
заболевания
•отбор доноров спермы
Tunel ( terminal deoxynucleotidye transferase
(tdt) mediated dUTP nick end labeling) –
выявляет дефекты и разрывы в ДНК с помощью
уридина на 3 он конце.
SCSA (sperm chromatin structure assay) – выявляет
ss и ds ДНК с помощью акридинового оранжевого
и позволяет определить индекс фрагментации
Comet – электрофорез фрагментов ДНК,
полученных в нейтральных условиях ( ds разрывы
ДНК) и с помощью алкалина ( ss разрывы ДНК).
набор Halosperm
Компания Halotech DNA
- денатурация ДНК, с удалением
ядерных белков (кислотная
обработка и лизис с DTT и Triton
X100)
- петли ДНК формируют ореол
дисперсии хроматина
- ядра сперматозоидов с
фрагментированной ДНК не
развивает ореол дисперсии или
ореол минимален
-В отсутствии национального стандарта оценки
эякулята , необходимо пользоваться стандартами
ВОЗ
-В выборе тактики лечения, по данным
спермограммы , необходимо взаимодействие с
клиниками ВРТ (урологами – андрологами,
клиническими эмбриологами)
-Своевременно принимать решения о переходе
к методикам IVF – ICSI - IMSI
СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ