Teknologi DNA Rekombinan

Download Report

Transcript Teknologi DNA Rekombinan

•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
DASAR-DASAR PENGKLONAN GEN
PENGKLONAN :
Perbanyakan Suatu Bahan Hayati yang
Menghasilkan Bahan Yang Identik
Dengan Bahan Asalnya.
KLON :
Kumpulan Individu (Bahan) yang
Identik yangDiperbanyak Dari
Individu (Bahan) yang Sama
•
TUJUAN PERBANYAKAN GEN :
• Mendapatkan Gen Sebagai Penelusur
• Mendapatkan Gen Untuk Dianalisis
Urutan Nukleotidanya
• Mendapatkan Untuk Diekspresikan di
Sel Inang
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
TAHAPAN KLON GEN :
• Isolasi DNA (gen)
• Penyisipan DNA ke Dalam Vektor
Untuk Membentuk Rekombinan
• Pemasukan Vektor Rekombinan Yang
Membawa Sisipan ke Dalam Sel Inang
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
KOMPONEN YANG DIPERLUKAN DALAM
KLON GEN :
• DNA Asal
• Vektor Pembawa Molekul DNA (gen)
• Enzim Restriksi
• Enzim Ligase
• Sel Inang
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
1. DNA Asal :
- Tumbuhan
- Hewan
- Bakteri
2. VEKTOR
- Plasmid
- Kosmid
- Virus / Fage
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
VEKTOR :
Wahana Untuk Membawa Fragmen
DNA Asing ke dalam Sel Inang dan
Bertanggung Jawab atas Replikasinya
Sendiri
PLASMID
• DNA Ekstrakromosom
• DNA Utas Ganda Sirkuler Berukuran
Kecil
• Dapat Melakukan Replikasi
• Secara Genetik Dapat Ditransfer Secara
Stabil
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
MACAM PLASMID :
•
•
•
•
•
Plasmid F (Fertilitas) membawa gen tra
Plasmid R (resistensi)
Plasmid Col (toksin )
Plasmid Tol (degradatif)
Plamid Virulensi (pTi)
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
PLASMID F
•
REPLIKASI PLASMID
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
FAGE / BAKTERIOFAGE
Virus Yang Menginfeksi Bakteri
FAGE MEMPUNYAI 2 SIKLUS HIDUP :
- Siklus Litik
- Siklus Lisogenik
FAGE YANG DIGUNAKAN DALAM KLON
GEN
- Fage 
- M13
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
STRUKTUR FAGE
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
PERBANYAKAN FAGE
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
MOLEKUL DNA 
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
PEMAKETAN DNA 
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
KOSMID
Gabungan Antara Bagian Plasmid
dan Bagian Sisi Cos dari
Bakteriofage 
BAGIAN PLASMID
• Titik Replikasi (ORI)
• Penanda Ketahanan Genetik
• Tempat-tempat Restriksi Untuk
Penyisipan Gen
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc
KLONING MENGGUNAKAN KOSMID
•
Terima kasih telah mengunjungi http://masbudi.net.tc