Transcript 短路电流测定装置
USSING CHAMBER SYSTEM 尤斯灌流系统 上皮离子转运测量装置 北京金工鸿泰科技有限公司 刘金红 内容 • • • • • 原理 技术参数 使用范围 注意事项 维护 History of Ussing chambers •以发明人Hans H. Ussing (1911–2000) 命名。 •ussing chamber最初设计是用于研究青蛙表皮的矢量离子转运，后 来出现了多种多样的用途，包括研究细胞层的完整性、癌细胞的侵蚀 性等。 •Ussing Chamber系统主要由两个功能单元组成，一是ussing chamber本身，另一个是电路系统。到目前为止两个功能单元都有大 量的技术改进。 •Ussing chamber有各种各样的尺寸和形状，而电路系统不仅可以测 量电阻、电流和电压，而且还可以测量诸如阻抗和电容等复杂的参数。 Dr. Hans Ussing in 1955 Dr Hans H Ussing and his assistant Birgit Hasman ussing chamber结构原理 经典的ussing chamber P2300 Ussing Chamber Physiologic Instruments 2.0-8.0ml 多通道ussing chamber 完整的ussing chamber系统 • • • • ussing chamber 电流电压钳（voltage / current clamp） 数据采集单元 其他辅助设备及附件 完整的ussing chamber系统 电流电压钳 电流电压钳的主要技术参数 • 2-8个独立控制的电压/电流钳； • 跨上皮电压或电流数字显示； • 可在±10 mV 或 ±100 mV范围内自行选择对电极不对 称电位进行补偿； • 可对与上皮细胞相连的流体阻抗产生的电位误差自动 补偿——流体阻抗补偿； • 输入阻抗：1 x 1010Ω • 漂移：0.5 μV/℃ max • 一个内置脉冲发生器用于监测组织的电导； • 脉冲发生器输出可提供 +、- 或双极脉冲； • 可在±100 mV或 uA范围内钳制电压或电流至任何直流 电水平； • 中央控制开关允许“一键”控制所有通道； Electrolyte transport across epithelia Kirchhoff’s law (Rapical + Rbasolateral) · Rshunt Rt = Rapical + Rbasolateral + Rshunt Ohm’s law U Rt = Rshunt Rapical Rbasolateral I 离子转运等效电路 Basic principle of transepithelial measurement Rshunt Vapical Rapical Vbasolateral Rbasolateral Vte Vte = Vbasolateral - Vapical Ohm’s law ISC= Vte R Open-circuit mode R= Vte I Basic principle of ISC measurement Vbasolateral Vapical Short-circuit mode Rshunt V R= Rapical ISC Rbasolateral Ucommand ISC measurements calculate (using the computer) the flow of ions across the epithelium in each solution from the equation: ion flow (µmol / sec) = current (µA)/F where, F = Faraday's constant (96,490 coulombs/mole). Making electrodes Ag-AgCl wire Plunger Filled with 3 M KCl Agar filled micropipette tip Start Compensation Mounting tissue Stabilization Short-circuit mode Open-circuit mode Experiment - + P2300 Ussing Chamber P2305 is an oblong 4.5 x 11.2 mm slider for rat and larger animal intestine. 8 pins along the side of the aperture facilitate tissue mounting and stretch. Area = 0.49 Spare electrode tips for P2020 Ag/AgCl Electrodes P2020-IS Electrode Set VCC MC2 Dual Channel Voltage/current Clamp EM-CSYS-2 Ussing Chamber Systems P2020-IS Electrode Set DM MC6 Single Channel Electrode Input Module and Dummy Membrane Thanks very much