2,藍藻Phormidiumの光特性とカビ臭物質の発生機構の解明プロジェクト

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No.2
藍藻Phormidium tenueの光特性と
カビ臭物質の発生機構の解明プロジェクト
Study on optical characteristics
and musty odor compound of Phormidium tenue
参加登録学生: 福山 朝子(Fukuyama Asako),劉 顯傑(Ryu Kenketsu)
指導担当教員: 浅枝 隆(Asaeda Takashi)
学外の連携組織: (財)ダム水源地環境整備センター(WEC)
(株)環境科学コーポレーション
東京都水道局水源管理事務所
和文要約******************************************************************
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ダム湖に発生する藍藻Phormideium tenueはカビ臭を発生させることが知られている。ここでは、室内実験や
野外観測によって、Phormidiumのカビ臭発生の特性およびPhormidium自体の増殖についての分光特性を
調べ、カビ臭の発生抑制の方法を理論的に確立する。
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English summary**********************************************************
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It is known that Phormideium tenue generated in the dam lake are generated of the moldy smell. So the
spectrum characteristic of the proliferation of the characteristic of the moldy smell generation of Phormidium
and Phormidium is examined by the laboratory experiment and the field observation, and the generation
control of moldy smell method is established theoretically.
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背景・目的
全国のダム貯水池、自然湖沼で存在が確認されている藍藻Phormideium tenueは2-MIB(ジメチルイソボルネオール)によるカビ臭を発生させることが知られ
ている。現在Phormidium tenueは誤同定によって複数種を含んでおり、緑株と茶株の存在が知られている。そこで、今回のプロジェクトではこれまで
Phormidiumの代表的な株として、多くの研究で使用されてきた国立環境研究所の3種の株を用いて室内実験や野外観測を行い、Phormidiumのカビ臭発生の
特性およびPhormidium自体の増殖についての分光特性を調べる。また、カビ臭の発生抑制の方法を理論的に確立することを目的とする。
<培養に用いる株>
培養試験の流れ
NIES-30:秋田産→Leptolyngbya sp.(緑株)
NIES-512:名古屋産→Pseudanabaena galeata (緑株)
現在進行中
NIES-611:琵琶湖産→ Pseudanabaena sp.(茶株)
③培地の準備、添加株の濃度確
認、培養庫の設定
Fig1.NIES-30
Fig2. NIES-512
①前培養
↓
②前培養中のモニタリング
↓
③分析検体の準備
↓
④本培養の準備
↓
⑤本培養中のモニタリング
↓
⑥本培養の完了
Fig3. NIES-611
④前培養時と同じ培地を準備し、
①N/P比を32に設定したCT培地を使用し、
培養株3種類(分譲先:国立環境研究所)を
添加株の濃度を確認する。
植えつける。
培養庫の温度、光、明暗周期の設定を確認する。
⑤1日1回程度藻類が固まらないようにフラスコを振倒する。
②落射蛍光顕微鏡を用いて細胞数のカウント
細胞数/ml=(細胞数/視野数)×面積計数÷ろ過量
また、株の増殖の様子を定期的な計数によって確認し、
※少なくとも数百万細胞/mlまで増殖させる必要がある。 増殖カーブを作成する。
⑥計数によって増殖がとまっていることを確認し、
③前培養が終了した試料をろ過し、
試料のろ過、分析試料の準備を行う。
光合成色素分析を実施する。
<モニタリング時の計数結果>
N-30
N-512
N-611
-
60333.38
66023.29
細胞数/ml
Table1. result of count
Fig4.incubator
N-30では細胞の増加がまだ確認できなかったが、
N-512,N-611では著しい細胞の増加が見られた。
緑株のN-512では細胞が赤く見られるのに対し、茶
株のN-611では細胞がやや橙の光を発している。
Fig5. in incubator
•照度:75μMol/㎡
•温度:23℃
•明暗周期:6~18時(点灯)
18~6時(消灯)
•植え付け後2週間程度で増殖し始める
Fig8. N-512(2)
Fig9. N-611(2)
Fig10. N-30(2)
今後の研究方針について
フォルミディウムを数百万細胞/mlまで増殖させ、その後本培養によって光合成を促進させる波長を特定する。それによりフォルミディウムの発生について把握し、
またフォルミディウムの持つカビ臭発生の原因について検討する。また、Phormidiumの発生するダム湖等(渡良瀬遊水地)において生態的特性を調べる。
プロジェクトを進めるにあたって
プロジェクトを進めるには、まず目的、内容を先生と相談しながら決定するところから始まる。そして予算にかかる費用を見積もり、実験費が十分であるかを検討
した後に、WECの担当者の方と連絡を取りながら実験を進める。定期的な現状報告を行うことによって次の段階への実験内容や今後の予定のやり取り、ディス
カッションを行っている。