Transcript Strumentazione per analisi cliniche da laboratorio

Strumentazione per analisi
cliniche da laboratorio
Viene determinata la composizione del fluido biologico
per ottenere informazioni utili per la diagnosi e stimare l’efficacia di una terapia
Tipi di strumentazione
• Preparazione del campione
– riscaldatori, centrifughe, dispositivi per cromatografia
ed elettroforesi
• Analisi del campione
– Plasma (che contiene numerose sostanze in soluzione e in
sospensione)
• Fotometro (colorimetro)
• Spettrofotometro
• Analizzatore
– Elementi corpuscolari del sangue (globuli rossi, globuli
bianchi, piastrine)
Analisi del plasma
La concentrazione delle sostanze presenti nel plasma viene
determinata da specifiche tecniche analitiche tramite reazioni chimiche
in grado di produrre derivati colorati, la cui concentrazione viene
determinata con una misura di assorbanza (A)
I0
I
I = I0exp(-aCL)
C concentrazione della sostanza
a coefficiente di assorbimento per unità
L
di lunghezza e unità di concentrazione
A=ln(I0/I)=aCL
Analisi cliniche del plasma
Esame
Campo di Normalità
Unità di misura
Azotemia
8-16
mgN/100ml
Glucosio
70-90
mg/100ml
Fosfati
3-4,5
mg/100ml
Calcio
9-11,5
mg/100ml
Creatina
0,6-1,1
mg/100ml
Acido Urico
3-6
mg/100ml
Proteine
6-8
g/100ml
Albumina
4-6
g/100ml
Colesterolo
160-200
mg/100ml
Bilirubina
0,2-1
mg/100ml
SGOT
20-50
mU/ml
Sodio
135-145
mEq/l
Potassio
3,5-5
mEq/l
Cloro
95-105
mEq/l
CO2 totale
24-32
mEq/l
Fotometro (colorimetro)
V0 = k I0
V1 = k I1
I1 = I0exp(-A)
A=ln(V0/V1)
Fotometro a fiamma
concentrazione di metalli puri (sodio, potassio)
Spettrofotometro
Fluorometro
• Fenomeno della fluorescenza
Vantaggi:
•sensibilità
•specificità
Svantaggi:
•sensibilità al pH e a T
Elettrochemiluminescenza
In ECL technology, this
electrochemiluminescent
quality is integrated with
conventional antigen (Ag) and
antibody (Ab) reactions. These
reactions take place on the
surface of a streptavidincoated
paramagnetic
microparticle
during
two
incubations. The incubation
time is dependent upon the
assay.
Analizzatore
• Caricatore di campioni
• Pompa e il collettore
• Riscaldatore
• Colorimetro
• Registratore
Elementi corpuscolari del sangue
• globuli rossi (RBC), globuli bianchi (WBC), piastrine
MCV 
10HCT
10Hb
(mm3) MCH 
(pg)
RBCcount
RBCcount
MCHC 
100Hb
HCT
(%)
Conteggio RBC, WBC, Hb
Diluting
fluid
Diluter I
Lysing
agent
Diluter II
Lysing
and
mixing
Hgb
Hemoglobinometer
WBC
bath
RBC
bath
C
C
C
C
C
Analyzer computer
Laboratory
computer
system
Data
management
system
Printer
C
Apparecchiature
Vacuum (6"Hg)
Aperture
current
Internal
electrode
100 mm
+
75 mm
External
electrode
-
Blood
cell
suspension
Sample
beaker
Aperture
Aperture tube
Detail of
aperture
(WBC)
Differenziazione dei globuli bianchi
• Neutrofili, linfociti, monociti, eosinofili e basofili
• Diffrazione della luce laser: il campione viene iniettato in una cella a
flusso e le cellule allineate singolarmente diffrangono una luce laser
Angolo e intensità della luce diffratta dipendono dal volume e
caratteristiche della cellula.
Emoglobinometro
L’emoglobina reagisce con il cianuro di potassio o con il ferrocianuro di potassio
per produrre cianometaemoglobina.
ln( I 0 / I s )
c
a ( )d
Pulsossimetro
c  cHb  cHbO2
S
c HbO2
c Hb  c HbO2
r
r
I r  I0r exp((aHb
cHb  aHbO
c
)d )
2 HbO2
I i  I0i exp(a i cd )
r
r
r
r
a
c

(
a

a
)
c

ln(
I
/
I
)
/d
a c  ln( I0 / I ) / d Hb
HbO 2
Hb
HbO
0
i
i
2
ai
S r
a a r
Hb
HbO2
r
a Hb
ln( I 0 / I ) r
( i 
)
i
a
ln( I 0 / I )