Transcript KAEDAH PENSTERILAN - Persatuan Juruteknologis Makmal UM

KAEDAH PENSTERILAN
Disediakan oleh: Mohd Hafiz Bin Mansor
Bahagian Mikrobiologi Dan Genetik
Institut Sains Biologi
Fakulti Sains
Universiti Malaya
1
2/2/2012
TUJUAN /OBJEKTIF
 Mengenali pelbagai teknik pensterilan untuk membasmi
mikroorganisma dengan menggunakan pelbagai teknik
pensterilan iaitu dengan menggunakan





2
Haba kering (Api)
Haba lembab(Autoklaf)
Kimia(Derivatif hidroklorit dan fenolik)
Pancaran(Cahaya UV)
Penapisan(Kertas turas)
2/2/2012
Pengenalan:
Definisi:
 Pensterilan merupakan satu proses untuk
membasmi semua organisma termasuk bakteria,
kulat,yis,actinomycete dan virus.
 Proses ini adalah penting dalam bidang pengajian
mikrobiologi.
 Melalui kaedah ini akan dapat memusnahkan kesemua
mikroorganisma hidup.
3
2/2/2012
Haba Kering
 Merupakan cara pensterilan dengan menggunakan api dengan
menggunakan penunu bunsen.
 Penunu Bunsen (bahasa Inggeris:Bunsen burner), dinamakan
bersempena Robert Bunsen, ialah radas makmal biasa yang
menghasilkan nyalaan gas terbuka tunggal, digunakan untuk
pemanasan, pensterilan, dan pembakaran.
 Tujuan kaedah ini adalah bagi mensterilkan keadaan sekeliling
semasa mengendalikan mikroorganisma agar tidak terkontaminasi.
 Disamping itu kaedah ini digunakan dalam teknik antiseptik bagi
mendapatkan ketulenan bakteria.
4
2/2/2012
Penunu Bunsen
5
Incinerator
2/2/2012
Teknik streaking single colony
Streak 3
Sterilkan inoculating loop dengan
menggunakan api.
Lakukan streak 1
panaskan inoculating loop semula
Lakukan streak 2 dan ulang cara yang
sama di atas.
6
Streak 2
Streak 1
2/2/2012
Haba Lembap(Autoclave)
 Kaedah ini menggunakan wap dan tekanan haba untuk pensterilan.
 Kaedah ini sesuai untuk bahantara kultur(media),dan larutan
cecair(broth).
 Pensterilan bergantung kepada suhu, masa, tekanan,
 Udara dalam alat autoklaf diganti dengan wap,kemudian
dipanaskan dengan tekanan suhu 121°C selama 20 minit.
 Autoklaf tape digunakan sebagai penanda aras sekiranya autoklaf
berjaya garisan hitam akan timbul.Ink hitam tersebut mengandungi
30.1% lead thiosulfate, 0.6% magnesium carbonate, 20.1%
neocryl B814, 30.1% ethanol, 22.7% ethyl acetate and 49% ink
solids.
7
2/2/2012
Autoklaf(Autoclave)
Autoclave-Makmal
8
Autoclave- Hospital
2/2/2012
Prinsip Autoclave
9
2/2/2012
KIMIA
 Bahan kimia boleh mengugat kehadiran
mikroorganisma.Akan tetapi ianya perlu didedahkan lama
untuk pensterilan yang sempurna.contohnya tube atau tips
yang dicemari oleh mikroorganisma perlulah dibuangkan ke
dalam savlon,clorox,dll(agen disinfektant).
 Derivatif hiploklorit seperti sabun dan detergent digunakan
dalam membunuh mikroorganisma.
 Derivatif fenolik seperti phenol digunakan oleh Lister(1867)
sebagai disinfektant dan telah digunakan sebagai piawai.
10
2/2/2012
Ujian bahan kimia ke atas plate
Control Savlon Dettol Clorox
Clorox
Control
Savlon
Dettol
Kaedah kertas turas
Direndam dalam agen kimia dan diuji keatas
piring yang mempunyai organisma hidup kultur
S.aureus ujian zon perencatan(Inhibition) diukur.
11
2/2/2012
PANCARAN
 Terdapat pelbagai bentuk pancaran seperti UV,X-ray,gelombang
mikro dan elektron yang boleh mengawal pertumbuhan
mikroorganisma contohnya:
 Sinar uv,sinar gamma x ray,elektron berupaya membunuh bakteria
vegatif(bakteria berubah bentuk),spora kulat,yis,dan virus.Ini
kerana kesan antimikrob oleh gelombang UV akibat kesan
cahayanya.
 UV yang berukuran (220-300nm)berupaya memecahkan struktur
DNA dan membunuh mikroorganisma.
 Pancaran mampu meleraikan RNA,DNA mengikut masa semakin
lama semakin berkesan.
12
2/2/2012
Laminar flow,Fume cupboard &
Biosafety cabinet.
Laminar flow
13
Fume cupboard
Biosafety cabinet
2/2/2012
Prinsip Laminar flow,Fume cupboard
& Biosafety cabinet.
Laminar Flow
Biosafety cabinet
14
Fume cupboard
2/2/2012
PENAPISAN
 Terdapat juga bahan-bahan yang tidak dapat menahan dan musnah
pada suhu yang tinggi seperti serum darah,sesetengah gula dan
larutan antibiotik.Untuk mesterilkan bahan-bahan tersebut kertas
turas yang mengandungi meliliang yang kecil digunakan bagi
menapis mikorganisma dan mensterilkan larutan cecair dan media
kultur contohya antibiotik chloromphenicol di dalam ros bengal
digunakan bagi membunuh sesetengah bakteria bagi mendapatkan
kulat dan actinobakteria.
 Kebiasaannya filter jenis methyl cellulase 0.22mm digunakan
untuk menapis bakteria manakala 0.45mm digunakan untuk
menapis sampel filter air seperti lumut(algae).
 Filter jenis PPFE digunakan untuk menapis alkohol,alkali,acid dll.
15
2/2/2012
Penapisan(Filtration)
Kertas Turas(Filter
paper).
Alat penapisan
16
S.aureus bacteria
Swenex
2/2/2012
KESIMPULAN
 Kaedah pensterilan penting di dalam bidang mikrobiologi
bagi tujuan penyelidikkan dan kawalan bagi membunuh
mikroorganisma dalam kerja-kerja penyelidikkan
mikrobiologi.
 Melalui kaedah pensterilan ini kerja-kerja di dalam
mikrobiologi dapat dijalankan dengan sempurna tanpa ada
kontaminasi.
 Pencemaran dan penyakit dapat dielakkan dengan
menggunakan teknik pensterilan.
 Tidak semua media dapat disterilkan dengan menggunakan
autoklaf.
17
2/2/2012
18
2/2/2012
RUJUKAN
 Buku Pengenalan Mikrobiologi.
 J.Heritage,E.G.V Evan & R.A Kelington
 Internet
19
2/2/2012