Transcript Bioterio Consideraciones Generales

Bioterio
Consideraciones Generales
Dr. Rubén Lijteroff
Bioseguridad y Gestión Ambiental
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• El BIOTERIO es un
departamento
especializado en la
reproducción,
mantenimiento y control
de diversas especies de
animales de laboratorio,
en óptimas condiciones,
los cuales son utilizados
para la experimentación
en Investigación Científica
y Desarrollo Tecnológico.
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¿Que son los animales de laboratorio?
Los ANIMALES DE LABORATORIO deben
considerarse como REACTIVOS BIOLÓGICOS.
Son un instrumento de medida que nos devuelve
resultados estandarizados.
Debemos usar animales acreditados de calidad
genética y estado de salud que nos permita
obtener resultados confiables, comparables y
reproducibles.
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ESPECIES MAS COMUNES USADAS EN INVESTIGACIÓN
Ratón ( Mus Musculus): Se utilizan en estudios renales,
neoplasias, virología, bacteriología, obesidad, toxicidad.
Ratas (Rattus norvegicus): Se utilizan en estudios de
neoplasia, efectos de drogas, metabolismo de lípido,
diabetes, artritis, nutrición.
Cobayo ( Cavia porcellus) : Se utilizan en estudios de
hipersensibilidad, alergia, anafilaxia, hormonas de la preñez.
Conejo (Ortyctolagus cuniculus): Se utilizan para estudios
fisiológicos, nutrición, reproducción, inmunología,
parasitarias, pruebas de irritantes cutáneos y oculares,
pruebas de piretógenos.
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Ratón
Rata
Cobayo
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¿POR QUÉ SE USAN LOS RATONES COMO MODELO
EXPERIMENTAL?
• Son mamíferos, por lo cual gran parte de los procesos
bioquímicos son similares al hombre.
• El tiempo generacional muy corto, muy prolíficos, fáciles
de criar, pequeños y se adaptan fácilmente a la vida del
bioterio, lo que permite controlar las variables ambientales
en las experimentaciones.
• Es una de las especies mejor estudiadas desde el punto
de vista genético, tienen alta variabilidad genética.
• Es el único animal que posee sistemas eficientes de
cultivo de células embrionarias pluri potenciales para
generar quimeras, lo que permite realizar mutaciones
dirigidas o condicionales.
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LEGISLACIÓN VIGENTE EN LA REPUBLICA ARGENTINA
Nuestro país carece de Legislación, Reglamentos, Guías
referidas al Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio.
Ley nacional 14346 sobre Protección de los Animales.
Septiembre 1954
Disposición 6344/96 ANMAT (Administración Alimentos y
Tecnología Médica) ”Reglamentación para Bioterios de
laboratorios elaboradores de especialidades medicinales y /o
de análisis para terceros”.1997
Resolución 617/02 SENASA ( Servicio Nacional de Sanidad
Animal y Calidad Agroalimentaria).
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NORMAS INTERNACIONALES
Buenas Prácticas de Laboratorios (BPL) OMS 1975.
Normas ISO 9000, 9001, 9002, 9003.(International
Organization for Standarization).
DOCUMENTO DE REFERENCIA INTERNACIONAL
Guide for the care and use of Laboratory Animals.
(NRC) National Research Council.USA.
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PRINCIPIOS PARA EL TRABAJO CON ANIMALES
(W. M. Russell y R. L. Burch – 1.959)
REEMPLAZO : Sustitución de animales vivos por
material insensible.
REDUCCIÓN : en el número de animales usados para
obtener la información de una determinada cantidad y
precisión.
REFINAMIENTO: Disminución en la incidencia o
severidad de procedimientos inhumanos (dolor y
disconfort) aplicados a estos animales que tienen que
ser utilizados.
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REEMPLAZO
1-USO DE SISTEMAS VIVIENTES
• Técnica in vitro: cultivo de células, tejidos y órganos.
Ejemplo: cultivo de células para producir anticuerpos
monoclonales.
• Animales invertebrados: Ejemplo Drosophila
melanogaster como modelo para estudio de genética,
especies marinas para estudio del sistema nervioso.
• Microorganismos: cultivo de Salmonella typhimurium
para la prueba de Ames de mutación / carcinogénesis.
• Plantas: estudio de mecanismos moleculares básicos,
ya que existe poca diferenciación de organelas aisladas
en plantas de los animales.
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REEMPLAZO
2-USO DE SISTEMAS NO VIVIENTES
• Técnicas Químicas: Las técnicas de inmunoquímica usan la
capacidad de acoplarse de anticuerpos altamente específicos
para encontrar cantidades mínimas de un antígeno.
• Sistemas Físicos y /o Mecánicos: Pueden reemplazar
animales vivos y son aplicables para enseñar habilidades
específicas y / o reacciones en un conjunto definido de
circunstancias predeterminadas.
• Simulación Computarizada: Para que un fenómeno
biológico sea adaptado a un modelo de computadora los
procesos básicos deben ser expresados en una fórmula
matemática, una vez desarrollada se puede introducir las
variables y ser expresadas. El elemento clave es realizar un
completo modelo matemático.
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REDUCCIÓN
Reducir significativamente el número de animales usados
dentro de una institución. Es difícil pero efectivo.
• Diseño estadístico mejorado: diseño experimental y uso
de métodos estadísticos correctos, resultan en reducción de
animales en uso.
• Animales de Calidad: animales experimentales de
excelente calidad genética, sanitaria y ambiental conduce a
un menor uso de animales y menos dispersión de datos.
• Banco de Datos: Publicación de resultados negativos para
no repetir. Acceso a literatura especializada
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REFINAMIENTO
Técnicas que reducen el dolor y molestia al animal.
• Uso de técnicas no invasivas o telemétricas: proporciona
datos más consistentes y reproducibles.
• Mejora de instrumentos para monitoreo de animales y
análisis de muestra: permiten minimizar el stress del animal
por medio de reducción de nivel de restricción /
manipulación para obtener muestras biológicas (catéteres)
y uso de equipos de diagnóstico que requieran por ejemplo,
micro litros de sangre.
•Uso de anestésicos, analgésicos y tranquilizantes.
• Eutanasia anticipada.
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TIPOS DE BIOTERIO
INSTALACIONES CONVENCIONALES: Los cuartos para
animales tienen un solo acceso por el que entran y salen
artículos limpios y sucios. Existe riesgo de contaminación
cruzada entre los cuartos. Debe tener un flujo de aire
apropiado, es decir dentro del cuarto debe haber presión
negativa y afuera positiva.
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TIPOS DE BIOTERIO
CORREDORES LIMPIO y SUCIO: Existe un flujo de tráfico en
una sola dirección, la entrad conduce desde el corredor limpio
al cuarto y la salida del cuarto conduce al pasillo sucio. El flujo
de aire tiene diferentes presiones.
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TIPOS DE BIOTERIO
BIOTERIO DE BARRERA Y CONTENCIÓN: mantiene la
contaminación fuera de un área y de contención mantiene la
contaminación dentro de un área.
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2-AREAS FUNCIONALES
Las instalaciones de un bioterio se dividen en varias áreas,
cada una equipada para facilitar las actividades:
Salas de cría y producción
Sala de cuarentena
Depósito de materiales sucios
Depósito de comida
Baños
Oficinas
Sala de necropsia
Recepción
Depósito de materiales limpios
Lavadero
Duchas y vestuarios
Cocina
Sala de cirugía
Sala de máquinas
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AMBIENTE
Macroambiente
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AMBIENTE
Microambiente
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4-SEGURIDAD EN AMBIENTES DE TRABAJO CON
RIESGO BIOLÓGICO
Al igual que los laboratorios, los bioterios pueden
clasificarse en cuatro niveles de bioseguridad, con arreglo
a una evaluación del riesgo y al grupo de riesgo al que
pertenecen los microorganismos investigados.
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PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO Y EQUIPO DE
SEGURIDAD
1
Acceso restringido, ropa y guantes protectores
2
Procedimientos del NBSA-1, más señales de advertencia del
riesgo. CSB de clase I o II para las actividades que producen
aerosoles. Descontaminación de desechos y jaulas antes del
lavado.
3
Procedimientos del NBSA-2, más acceso controlado. CSB y
ropa protectora especial para todas las actividades.
4
Procedimientos del NBSA-3, más acceso estrictamente
restringido. Muda de ropa antes de entrar. CSB de clase III o
trajes de presión positiva. Ducha a la salida.
Descontaminación de todos los desechos antes de su salida
de las instalaciones.
NBSA: nivel de bioseguridad de las instalaciones para los animales;
CSB: cámaras de seguridad biológica.
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ACCIDENTES DERIVADOS DEL ANIMAL
Los animales de laboratorio como “reservorios y
trasmisores de zoonosis y causantes de agresiones”.
Los mecanismos generales de transmisión pueden ser:
mordeduras, arañazos, contaminación de heridas
existentes, vía digestiva y vía aerógena.
Los animales de laboratorio como fuente de “alergenos”.
La principal fuente de alergenos son ratas y ratones
producidas por la orina (prealbúmina, albúmina,
globulinas), descamaciones de la piel, pelo y plumas,
sangre y ácaros de polvo.
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MEDIDAS PARA PREVENIR ACCIDENTES
• Calidad sanitaria de los animales.
• Control sanitario periódico de los animales.
• Educación sanitaria del personal e instrucción en la
prevención de accidentes.
• Adiestramiento en el manejo y manipulación de los
animales.
• Prohibición de fumar, comer, beber y maquillarse en
las habitaciones de los animales y laboratorios.
• Inmunoprofilaxis del personal.
• Sedación de los animales, si el experimento lo
permite.
• Uso de jaulas con mecanismos de inmovilización y
técnicas de sujeción adecuadas.
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MEDIDAS PREVENTIVAS
• Informar casos de lesiones producidas por animales.
• Realizar un examen médico pre ocupacional y
ocupacional periódico con ausencia de alergia.
• Recurrir al botiquín de primeros auxilios.
• Uso de elementos de protección personal: (Ropa de
trabajo adecuada, protectora y cómoda, guantes,
barbijos, anteojos y semi máscara con filtros y cofias).
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