Transcript Voir la présentation de la société Sythéon

8ème Rencontre SFC / CED
Lyon, mardi 25 septembre 2012
Synovea DOI
l’Hydratation Rémanente,
l’Amélioration de la Fonction Barrière
et la Restauration de l’Architecture Epidermique et Dermo-Epidermique
Place des diesters d’Isosorbide dans l’Industrie
 Les diesters d’Isosorbide ont un développement récent dans le
domaine des bioplastifiants en alternatives aux phtalates.
 Les esters C8-C10 ont fait l’objet d’un enregistrement REACH >
1000 tonnes.
 Principal domaine d’application: Sols PVC
 Propriétés: Bio-plastifiants et lubrifiants biodégradables
2
Origine et synthèse: Un procédé « vert »
Céréales (blé, maïs)
Huile végétale
Amidons
Glucose
Extraction
Acide Octanoïque
hydrogénation
Sorbitol
Double déshydratation
Catalyse acide
Isosorbide
T°
Esterification
Purification
Décoloration
Isosorbide Dicaprylate
3
Fiche signalétique Synovea® DOI
Synovea® DOI: R = C7H15
Dioctanoyl Isosorbide
Nom commercial:
Synovea DOI
Nom chimique:
Dioctanoyl Isosorbide
Formule brute :
C22H38O6
N° CAS :
64896-70-4
Nom INCI :
Isosorbide dicaprylate
Apparence:
Liquide huileux incolore à jaune paille
Miscibilité:
Bon nombre d’esters émollients
hydrophobes et solubilisants
Pureté:
97% min
Brevets:
US App. Ser. No 12/938743
PCT/US10/55357
4
Fonctions et attributs
5
Homeostasie hydrique: La voie Aquaporines

L’Homéostasie hydrique dans l’épiderme est essentielle pour
l’hydratation du Stratum Corneum et la préservation des
équilibres biologiques de la peau
 La perte d’hydratation entraîne:
 Rugosité de surface, desquamation, ridules, sensation de sécheresse
cutanée et inconfort

Une perméabilité de la couche cornée accentuée affectant la matrice extracellulaire de l’épiderme
 L’ homéostasie hydrique est un facteur déterminant pour:
 L’apparence visuelle de la peau,
 Les propriétés mécaniques,
 Les fonctions barrières,
 Les fonctions métaboliques
6
Aquaporines, Hydratation et différenciation cellulaire
 Dans la peau, l’Aquaporine 3 (AQP-3) est une aquaglycéroprotéineclé, exprimée dans la membrane basale des Kératinocytes
épidermiques
 Elle est impliquée dans la régulation de la prolifération et de la
différenciation des kératinocytes.

Les Aquaporines (AQP)
sont une famille de
protéines membranaires
intégrales transportant
l’eau et dans certains cas
(les aquaglycéroporines)
les solutés compatibles
de petite taille comme
l’urée ou le Glycérol.


Dans le processus de cicatrisation, elle conditionne les canaux hydriques facilitant la
migration cellulaire
La perméabilité de AQP3 au transport du glycérol facilite la synthèse de
phosphatidylglycérol, activateur de protéine Kinase C (PKC) [J Invest Dermatol
121:1487–1495, 2003]
Des défisciences en AQP-3 causent

La déshydratation du stratum corneum
 La perte d’élasticité, l’altération des fonctions barrière et l’affection de la
biosynthèse des lipides de l’épiderme
7
HYDRATATION REMANENTE:
Synovea® DOI Stimule la synthèse d’Aquaporine-3
Etudes Ex-Vivo sur épiderme complet et explant de peau
Expression génique
rt PCR: Enrichissement en AQP3
Amplification en Chaîne par Polymérase
Puces à ADN:
Tissus épidermique d’épaisseur totale de Mattek
Profile d’expression génique
Gène
Description
Fonction
% /témoin
AQP3
Aquaporine-3
Water &
barrier
homeostasis
340
Quantification de l’ARN messager .
Tissus épidermique d’épaisseur totale de Mattek
AQP3
Description
Taux d’ Amplification/
témoin
Aquaporine-3
2,83
Etude Ex-Vivo
Explant de peau de paupière
 Volontaire de 51 ans
 Incubation Ex Vivo de 10 jours
Préparation cosmétique placebo contre
Placebo contenant 4% Synovea DOI
 Anticorps monoclonaux Aquaporin-3
Placébo
Synovea DOI
8
Etude clinique n°1 : Cantor Research Lab. NY
Arrêt du traitement
Mesure de l’hydratation à long terme sur peaux sèches
14
jours
PROTOCOLE
15 panélistes
Equipement: Novamètre
Durée de l’étude::
-14 jours d’application bi-quotidienne/
hautbras
-1 semaine de mesures post-traitement
Laboratoire d’étude: Cantor Research Labs, NY
Produits testés: émulsion neutre H/E
DOIG = Synovea® DOI (2%) + Glycérol (2%)
DOI = Synovea® DOI (2%)
G = Glycérol (2%)
P = émulsion seule
Synovea® DOI contribue à une hydratation
à long terme par le transport du glycerol
via AQP3
ETUDE CLINIQUE n° 2: Cyber-Derm
Hydratation rémanente sur peaux sèches (Jambes)
Formulation H/E à 2%
PROTOCOLE
Durée de l’étude: 17 jours
Nombre de pannélistes: 18
Sexe & age: Femmes de 40 à 64 ans
Sites traités: Jambes
Application: 2x/ jour; Arrêt de tout traitement au 14ème jour
Nombre de visites au Laboratoire: 7
Instrumentation : Conductimètre IBS Skicon-200
Laboratoire d’étude: Cyber-Derm, PA
INCI name
Phase A
Eau (demineralized)
Disodium EDTA
Glycérine 99% USP
Phase B
Caprylic/Capric Triglycerides
Vitamin E acetate
% w/w
Glyceryl Stearate, PEG-100 Stearate
Dimethicone
Isosorbide Dicaprylate
3.00
2.00
2.00
Cetyl Alcohol
Phase C
Hydroxyethylacrylate/sodium
acryloyldimethyltaurate copolymer &
squalane & polysorbate 60
Phase D
Phenoxyethanol, Ethylhexylglycerine
Total
1.00
Qs
0.10
2.00
6.00
0.20
2.00
1.00
100.00
10
ETUDE CLINIQUE n° 2: Cyber-Derm:
Mesure de l’hydratation à J+14 et J+17 jours
Application biquotidienne sur 15 Volontaires à peau sèche
Traitement de 2 semaines sur les jambes.
IBS Skicon-200
Conductance
Résultats hautement significatifs
Zone Traitée: Synovea DOI
Zone non traitée
Valeur moyenne : Microsiemens
Les résultats par conductance
électrique révèlent une forte
augmentation de
l’hydratatation de l’épiderme
après 2 semaines d’application.
Cette amélioration nette est
persistance 3 jours après l’arrêt
de tout traitement.
p-value = <0.01
Jour 0
Rémanence 3 j.
Jour 14
Arrêt du traitement
Jour 17
11
ETUDE CLINIQUE n° 2: Cyber-Derm:
Evaluation visuelle de la sécheresse cutanée
Score dermatologique sur 15 Volontaires à peau sèche
Traitement de 2 semaines sur les jambes.
Echelle:
0 = aucun signe de sécheresse
à 8 = Sécheresse cutanée trés prononcée: squames épaisses et larges, peau craquelée évoluant en
fissuration; présence potentiel d’érythème, épaississements locaux
p-value = <0.01
Témoin = Zones non traitées
6
Score Moyen
Résultat:
Amélioration nette de
l’état de surface cutanée
après 2 semaines
d’application. Rémanence
des bénéfices 3 jours
après l’arrêt de tout
traitement.
Traitement = Synovea DOI Lot# P8537
Rémanence 3 j.
4
2
Forte significativité des
résultats
0
Jour 0
Jour 14
Arrêt du traitement
Jour 17
12
ETUDE CLINIQUE n° 2: Cyber-Derm:
Evaluation visuelle de la rugosité tactile
Score dermatologique sur 15 Volontaires à peau sèche
Traitement de 2 semaines sur les jambes.
Echelle:
0 = Peau normale—Souple, douce, résiliente et élastique sans marquage de ride au plissement
À 8 = Rugosité élevée, dure et cassante, inflexible au pincement
8
Treatment = Synovea DOI Lot# P8537
Control = No Treatment
6
Rémanence 3 j.
Score Moyen
Résultat:
Amélioration nette de
l’état de surface cutanée
après 2 semaines
d’application. Rémanence
des bénéfices 3 jours
après l’arrêt de tout
traitement.
Forte significativité des
résultats
4
p-value = <0.001
<0,01
2
0
Jour 0
Jour 14
Arrêt du traitement
Jour 17
13
Résultats d’étude clinique Cyber Derm sur volontaires:
ex.: Panéliste n°1
Avant traitement
Aprés 14 jours de traitement
Résultats d’étude clinique Cyber Derm sur volontaires:
ex.: Panéliste n°2
avant treatment
Aprés 14 jours de traitement
LES FONCTIONS BARRIERE: Epiderme, un épithélium
pavimenteux, stratifié kératinisé.
Il existe trois types de jonctions intercellulaires:


Les jonctions communicantes
Les jonctions serrées
Les jonctions adhérentes

Les desmosomes sont une forme différenciée de jonction adhérente (bouton pression) .

LES JONCTIONS INTERCELLULAIRES ET LA DIFFERENCIATION EPIDERMIQUES JOUENT UN
ROLE CAPITAL DANS LES FONCTIONS BARRIERE DE L’EPIDERME ET SA MORPHOGENESE

Jonctions adhérentes
Jonctions communicantes
jonctions serrées
Desmosomes
16
Jonctions serrées (ou jonctions étanches ou “Kissing points”)
Jonctions serrées
Jonctions adhérentes

JONCTIONS ETANCHES OU IMPERMEABLES

ASSURENT LA COHESION DES CELLULES ENTRE 2
FEUILLETS

EMPECHENT LE TRANSPORT MOLECULAIRE ENTRE
LES CELLULES (protéines, glucose…)

MAINTIENNENT LA POLARITE DES CELLULES
ENDOTHELIALES
Filaments d’actomyosine
Jonctions communicantes
Filaments intermédiares
Desmosomes
Hemidesmosomes
Lame basale
Tissue conjonctif
Ex. Cellule d’épithélium
Les jonctions serrées ou zonula
occludens (ZO), sont composées de
protéines inter-membranaires marquant
aussi la frontière entre deux zones de la
membrane plasmique des cellules
épithéliales, la membrane apicale et la
membrane basale, fonctionnellement
très différentes.
17
Protéines transmembranaires des jonctions serrées
Occludines,
claudines
et
JAMs
s'assemblent pour former un réseau de
fibrilles qui ceinture le domaine apical
des cellules épithéliales (ou le domaine
membranaire
latéral
des
cellules
endothéliales). Les jonctions serrées sont
liées avec des protéines intracellulaires
comme ZO-1 et ZO-2 (zonula occludens)
qui à leur tour sont liées au cytosquelette
(actine). Cette interaction (avec le
cytosquelette) détermine la localisation
de la jonction au domaine apical de la
cellule.
Claudines
[M Furuse et al., J Cell Biol, 156(6):1099-1111, 2002]
Protéines essentielles dans les fonctions barrières, présentes dans le Stratum Granuleux
Un déficit en Claudine-1 conduit à une perte d’eau léthale chez la souris .
Occludines [T Yamamoto et al., Arch Dermatol Res, 300(2):61-68, 2008]
L’Occludine est la seule protéine membranaire intégrale connue des jonctions serrées .
Le renouvellement de la barrière épidermique est accéléré par la production et densification des Occludines dans les interfaces
kératinocytaires du stratum granulosum.
Junctional Adhesion Molecule [Nelson CM, J Invest Dermatol, 127:2525–2532, 2007]
Les JAMs constituent le 3ème groupe de récepteurs transmembranaires au sein des jonctions serrées
Les JAMs sont impliquées dans les adhésions homophiles et hétérophiles.
Synovea® DOI amplifie la synthése des protéines des jonctions serrées:
Etudes Ex-Vivo sur épiderme complet et explant de peau de peaupière
Puces à ADN:
Tissus épidermique d’épaisseur totale de Mattek
Profile d’expression génique
Gène
Description
Fonction
%
d’expression
/ témoin
ZO-2
Protéine de jonction
serrée ou Zonula
occluden
Fonction
Barrière
542
ZO-1
Protéine de jonction
serrée ou Zonula
occluden
Fonction
Barrière
181
CLDN4
Claudine 4
Fonction
Barrière
316
JAM-1
Molécule d’adhésion
jonctionnelle 1
Fonction
Barrière
158
rt PCR: Enrichissement en Protéines des
jonctions serrées
Tissus épidermique d’épaisseur totale de Mattek
Amplification en Chaîne par Polymérase
Quantification de l’ARN messager
Notes: ZO-1 et JAM-1 non testées en rt PCR
Explant de peau de paupière
 Volontaire de 51 ans
 Incubation Ex Vivo de 10 jours
Préparation cosmétique placebo contre
Placebo contenant 4% Synovea DOI
 Anticorps monoclonaux Claudine-1
Placébo
Synovea DOI
19
Jonctions adhérentes: Les Cadhérines (Classiques)
Cadhérines: protéines d’adhésion liées au Calcium
La E-cadhérine joue un rôle important dans l’adhérence intercellulaire des
cellules épithéliales, la mise en place de la polarisation des cellules
épithéliales, la différenciation glandulaire et la stratification.
Un déficit d’expression induit une séparation des kératinocytes et un
affaiblissement des adhésions desmosomiales.
Elles régulent les contacts Ca2+ -dépendant entre les kératinocytes.
La E-Cadhérine est essentielle dans le fonctionnement des fonctions
barrières.
Effet fermeture éclair
Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
1.Des ions calcium se fixent entre
chaque domaine et maintiennent la
rigidité de la partie extracellulaire
de la protéine, changeant leur
conformation et permettant leur
dimérisation.
2. Les molécules de cadhérine des
cellules opposées agissent l'une sur
l'autre par inter-digitation ou
contact ‘tête à tête’, ce qui permet
de relier les membranes adjacentes.
cf. effet « fermeture éclair »
20
Synovea® DOI amplifie la synthése des Cadhérines (Classiques)
Etudes Ex-Vivo sur épiderme complet et sur Explant de peau de peaupière
Puces à ADN:
Tissus épidermique d’épaisseur totale de Mattek
Profile d’expression génique
Gène
Description
Fonction
% /témoin
CDH1
E Cadhérine
Adhésion des
Kératinocytes
496
Explant de peau de paupière
 Volontaire de 51 ans
 Incubation Ex Vivo de 10 jours
Préparation cosmétique placebo contre
Placebo contenant 4% Synovea DOI
 Anticorps monoclonaux E-Cadhérine
Placébo
SynoveaDOI
21
Les Desmosomes
Les desmosomes sont des structures d’interactions
intercellulaires contribuant à la résistance mécanique des
tissus en reliant les filaments intermédiaires (Keratines)
 Composition

Desmogléines & Desmocollines (membres non classiques de la
super-famille des Cadhérines)
 Intermédiaires d’adhésion des desmosomes. Assure l’intégrité
structurelle de l’épiderme, module la prolifération et la
différenciation des kératinocytes
 Plakoglobine & Plakophillines
 Recrûte les filaments intermédiaires sur la plaque
Effet bouton pression
d’assemblage cytoplasmique = intégrité du desmosome
 Desmoplakine
 Ancrage des fibres sur le cytosquelette =pivot dans le
développement épidermique

Reference: E Delva et al, The Desmosomes, Cold Spring Harbor Perspective in Biology,
2009, 1:a002543
22
Synovea® DOI stimule la synthèses des protéines constituant
les Desmosomes
Etudes Ex-Vivo sur épiderme complet et explant de peau
Puces à ADN:
Tissus épidermique d’épaisseur totale de Mattek
Profile d’expression génique
Gène
Description
Fonction
%
/témoin
DSG3
Desmogléine 3
Intégrité structurelle de l’épiderme
259
DSC2
Desmocolline 2
Intégrité structurelle de l’épiderme
420
JUP
Plakoglobine de jonction ( caténine)
Intégrité du desmosome
312
PKP1
Plakophiline 1
Intégrité du desmosome
166
DSP
Desmoplakine
Pivot du développement épidermique
167
Explant de peau de paupière
 Volontaire de 51 ans
 Incubation Ex Vivo de 10 jours
Préparation cosmétique placebo contre
Placebo contenant 4% Synovea DOI
 Anticorps monoclonaux: Desmosomes
Placébo
Synovea DOI
23
Différenciation Epidermique
Quatre couches peuvent être morphologiquement
distinguées dans un épiderme sain:
NICE-1
1. Stratum basal: Zone
proliférative. Point d’ancrage
ferme de l’épiderme sur la
membrane basale
2. Stratum spinosum: Zone
d’amorce du process de
différenciation par la
production de jonctions
intercellulaires, l’apparition d’un
cytosquelette, etc.
3. Stratum granulosum: Zone de
production de protéines
membranaires cornéifiées,
crosslinkages des enzymes et
lipides spécifiques.
4. Stratum corneum: Zone de
cellules mortes plates et
anucléées (cornéocytes), liées
par des protéines de liaison
(Desmosomes). Composée
essentiellement d’eau, de
Kératine et de lipides
24
Etude In Vitro sur Epiderme Mattek
Gènes de la différenciations épidermique modulés par Synovea®DOI
Puces à ADN:
Tissus épidermique d’épaisseur totale de Mattek
Profile d’expression génique (sélection des gènes spécifiques de la différenciation épidermiques
présentant un taux de sur-expression > 1,5)
Gène
Nom complet (GB)
Fonction
Taux de
sur-expression
K5+
Keratin 5
Différenciation épidermique au niveau de la couche
basale
1.7
K14+
Keratin 14
Différenciation épidermique au niveau de la couche
basale
1.7
IVL
Involucrin
Riche en Glutamine et lysine. Présente dans le Stratum
granuleux. Liée aux desmoplakines, et avec l’envoplakine
et la périplakine, elle constitue un support à l’enveloppe
cornée
1.5
SPRR3
Small proline-rich protein 3
Pontage des proteines membranaires des cornéocytes;
Protéines détoxifiantes (ROS) avec effet de migration
cellulaire.
3.3
NICE1/
CRCT1
Protein NICE1/Cysteinerich C-terminal protein 1
Différenciation épidermique
(Mareholz et al, Genome Res, 11:341-355, 2001)
3.0
TGM1
Transglutaminase 1
Pontage des proteines membranaires des cornéocytes
2.9
25
Etude In Vitro sur Epiderme Mattek
Gènes de la différenciations épidermique modulés par Synovea®DOI
Gène
Nom complet (GB)
Fonction
Taux de
sur-expression
LCE1E
Late cornified envelope protein 1E
Essentielle dans la maintenance des fonctions
barrières
2.0
LCE3A
Late cornified envelope protein 3A
Essentielle dans la maintenance des fonctions
barrières
2.6
LCE3B*
Late cornified envelope protein 3B
Essentielle dans la maintenance des fonctions
barrières
2.9
LCE3C*
Late cornified envelope protein 3C
Essentielle dans la maintenance des fonctions
barrières
5.6
LCE3D
Late cornified envelope protein 3D
Essentielle dans la maintenance des fonctions
barrières
3.5
S100A10
S100 calcium-binding protein A10
1.7
S100A11
S100 calcium-binding protein A11
Présence dans les membranes cornéfiées
impliquent une coopération fonctionnelle entre les
protéines structurelles et calcium-liantes dans la
phase terminal de différenciation des kératinocytes
(Robinson et al, J. Biol. Chem. 272:12035–12046)
4.1
26
Etude Ex Vivo: Remodèlement de la Jonction DermoEpidermique d’une Peau Agée et Différenciation Epidermique
Traitement Placébo: Crème neutre
Crème neutre contenant 4% Synovea DOI
Explant de peau de paupière
 Volontaire de 51 ans
 Incubation Ex Vivo de 10 jours
Préparation cosmétique placebo contre
Placebo contenant 4% Synovea DOI
Coloration histochimique au bleu de
toluidine en milieu alcalin
27
Synovea DOI is une nouvelle substance efficace dans:
1.
L’hydratation persistante en combinaison avec le glycérol par la
voie des Aquaporines (AQP-3)
2.
La restauration des fonctions barrière par la synthèse des
protéines composant les jonctions serrées, les jonctions
adhérentes et les desmosomes
3.
Le remodelement de l’architecture épidermique par
l’amélioration des fonctions barrières et la stimulation des génes
spécifiques de la différenciation cellulaire
 C’est un actif de haute tolérance convenant aux peaux trés sensibles
 Un émollient élégant intéressant dans la vectorisation d’actifs
cosmétiques
28
MERCI DE VOTRE ATTENTION!
Sytheon France, 92100 Boulogne Billancourt
+33(0)1 41 10 81 82
E-mail: [email protected]
Website: www.sytheonltd.com
29