Transcript Young Cell 的分佈Side Scatter (內容物結構)

Young Cell 的 分佈
Fluorescence (RNA ,DNA)
Aty-Lym
ProMyelo
Myelo
Blast
RBC Ghost
Side Scatter (內容物結構)
Resistant RBC既沒有RNA,
也沒有顆粒, 因此即使有
紅血球破壞不全的現象,
也不會干擾WBC的分類
Estimation of cell viability by flow
cytometry
Protocol for viability
細胞培養之細胞數約1×105~2×105/well，
加入不同濃度藥物，培養不同的
時間
↓
收細胞
↓
加入螢光染劑（PI for viability）
↓
流式細胞儀分析
(Death cells)
(Live cells)
Cell cycle analysis
Protocol for cell cycle
細胞培養之細胞數約1×105~2×105/well，加入不同濃度藥物，培養不同的時間
↓
收細胞
↓
加入70% ethanol，固定細胞。放入-20度冰箱儲存，至少24小時。
↓
將-20度中的sample從冰箱取出
↓
離心1500rpm，5mins
↓
倒掉上清液，並打散細胞
↓
PBS wash
↓
1500 rpm，5mins
↓
加入PI（for cell cycle）作用30分鐘
↓
流式細胞儀分析
☆ cell cycle所用的PI與viability所用的PI成分不同
Apoptosis
G0/G1
G2/M
S
G2/M
G2/M
G2/M
G2/M
G0/G1
G0/G1
G0/G1
Analysis of apoptosis by flow
cytometry
Phosphatidylserine (PS) and apoptosis
Apoptosis rate analysis using Annexin V/propidium iodide flow
cytometry in cancer cells treated with drug
Later stages of apoptosis and necrosis
Viable cells
Early stage of apoptosis
Apoptotic cells
Detection of intracellular/intranuclear
antigens
Detection of intracellular/intranuclear antigens
Tumor Antigen Markers