Transcript Sakupljanje krvotvornih matičnih stanica iz periferne krvi

Sakupljanje krvotvornih matičnih
stanica iz periferne krvi
Zavod za kliničku transfuziologiju
KBC Zagreb
Ines Bojanić
Sakupljanje i transplantacija KMS iz periferne krvi
PREDNOSTI
jednostavniji postupak sakupljanja
nije potreban operativni zahvat i anestezija
sigurniji postupak za davatelje s kroničnim
bolestima
manje neugodnosti i brži oporavak davatelja iza
zahvata
brži hematološki oporavak nakon transplantacije
zbog različitog sastava stanica
NEDOSTATCI
primjena citokina u zdravih davatelja
jači kronični GVHD
mogućnost neuspješnog sakupljanja
Davatelji i leukafereze učinjene u Zavodu za kliničku
transfuziologiju (1994.-2004.)
1600
1572
1400
1200
1000
davatelji
afereze
800
600
576
400
200
31
0
AUTOLOGNI
ALOGENI
88
Autologne krvotvorne matične stanice
Sakupljanje autolognih KMS
iz periferne krvi u Zavodu za kliničku transfuziologiju
250
200
150
bolesnici
(N=576)
100
afereze
(N=1572)
50
0
1994
1996
1998
2000
2002
2004
Obilježja bolesnika/davatelja autolognih KMS
(N = 576)
SPOL M/Ž
312 (54,2%) / 264 (45,8%)
DOB god
44 (3 – 68)
DIJAGNOZA






NHL
Mb Hodgkin
Multipli mijelom
AML
ALL
Solidni tumori
160
80
131
137
41
27
(27,7%)
(13,9%)
(22,8%)
(23,8%)
(7,1%)
(4,7%)
Mobilizacija autolognih KMS
Kemoterapija + G-CSF
Samo G-CSF (5-10 μg/kgTT)
Kada početi sakupljanje?
CD34+>10 x 106/L
Cilj
CD34+ >3,5 x 106/kgTT
Sakupljanje autolognih KMS
Stanični separator
COBE Spectra (MNC procedure)
Fenwal CS 3000
Venski pristup
centralni venski kateter (v. subclavia,
v.femoralis, v. jugularis)
periferne vene
Obilježja autolognih leukafereza N = 1572
median(raspon)
2 (1-5)
Ulazni protok krvi (mL/min)
82 (16-135)
Trajanje sakupljanja (min)
240 (80-324)
Volumen utrošenog ACD-A (mL)
921 (133-1827)
Ukupno procesiran volumen krvi(mL) 1900 (2700-38221)
Procesiran ukupan volumen krvi (x) 3,56 (0,86-6,30)
Volumen pripravka (mL)
227 (87 – 335)
Rezultati sakupljanja autolognih stanica
MNC x 108/kg TT
4,76 (0,69-12,7)
CD34+ x 106/kg TT
4,49 (0,03-42,64)
CFU-GM x 104/kg TT
54,4 (2-3916)
Sakupljen transplantat (%) 483 / 576 (83,8%)
Broj CD34+ stanica u produktu s obzirom na
broj leukocita u perifernoj krvi
CD34+ stanice (x10e6/kg)
u produktu
1000
r=-0.04
n=112
100
10
1
0,1
1
10
L (x10e9/L)
u perifernoj krvi
100
1000
Broj CD34+ stanica u produktu s obzirom na
broj CD34+ stanica u perifernoj krvi
CD34+ stanice (x10e6/kg)
u produktu
1000
r=0.98
n=61
100
10
1
0,1
1
10
100
CD34+ stanice (x10e6/L)
u perifernoj krvi
1000
Poboljšanje sakupljanja KMS iz
periferne krvi
povećanje doze citokina
različite vrste kemoterapije + citokini
sinergističke kombinacije citokina
povećanje učinkovitosti leukafereze
procesiranje većeg volumena krvi
tijekom afereze: leukafereze velikog
volumena (LVV)
Planiranje početka leukafereze
ako je broj CD34+ stanica u perifernoj krvi

<10 x 106/L
odgoditi aferezu

10-20 x 106/L

>20 x 106/L
razmotriti leukaferezu
velikog volumena (LVV)
leukafereza standardnog
volumena (LSV)
Leukafereza velikog volumena (LVL)
Volumen krvi
Standardna
2-3 x TBV
LVV
3-6 x TBV
Antikagulans
ACD
ACD/Heparin
Inlet:AC Ratio
12:1
24:1
Inlet Pump Flow Rate
Collect Pump Flow Rate
2 x veći
1.0 ml/min
LSV (N=166) vs. LVV (N=155)
trajanje (min)
procesiranTBV (x)
procesirano L
ulazni protok (mL/min)
LSV
240 (150-284)
2,2 (1,8-2,5)
12,3 (7-18,2)
51,8 (35-66)
LVV
240 (80-322)
4,7 (3,7-6,3)
23,5 (9,4-38,2)
98,6(42-121)
LSV
LVV
TNC x 108/kgTT
3,07(0,55-9,84)
3,28(0,71-11,71
MNC x 108/kgTT
1,63(0,51-4,72)
2,15(0,56-6,12) 0,00001
CD34+ x 106/kgTT 2,11(0,09-19,03)
NS
2,73(0,09-26,65) 0,01
Leukafereze velikog volumena krvi
Prednosti

manji broj postupaka leukafereze
pogodnije za davatelja/bolesnika
manji troškovi
Nedostatci



potreban visok protok krvi
metaboličke komplikacije (hipokalcemija)
veći gubitak drugih krvnih stanica:
trombocitopenia
Komplikacije leukafereze
hemodinamske promjene
vaskularni pristup
reakcije na antikoagulans i druge otopine
gubitak ostalih krvnih stanica
infekcije
greška u radu staničnog separatora
Nuspojave tijekom leukafereza



762 autologne leukafereze / 235 hematološkoonkoloških bolesnika
mobilizacija:
kemoterapija + G-CSF
samo G-CSF
stanični separatori:
 COBE Spectra (MNC procedure)
 Fenwal-CS 3000
Vrste nuspojava
UKUPNO
137/762
18,0%
hipokalcemija
101(73,8%)
vazovagalne reakcije
24 (17,5%)
hemoragička dijateza (petehije, epistaksa)
2 (1,4%)
alergijska reakcija
1 (0,7%)
(fascikulacije mišića lica, mišični tremor, grčevi prstiju)
BLAGE, SREDNJE TEŠKE (mučnina, povraćanje, hiperventilacija)
TEŠKE (hipotenzija, kolaps sinkopa) 2
(urtike)
komplikacije venskog pristupa
CENTRALNI KATETER (krvarenja, ugrušci) 7
PERIFERNE VENE (hematomi)
2
22
9 (6,6%)
Nuspojave zbog kojih su prekinute
leukafereze
UKUPNO
4/762
0,57%
vazovagalne reakcije
2
smetnje perifernog venskog pristupa
2
(hipotenzija 1; prekordijalna bol bez EKG znakova ishemije
miokarda 1)
(bolni hematomi)
Učestalost nuspojava ovisno o vrsti
separatora, spolu, dobi i tjelesnoj težini
bolesnika
Separator
COBE Spectra
Fenwal CS3000
Spol
muški
ženski
Dob
20 god
>20 god
Težina
<50 god
50 god
Nuspojave N(%)
p
125 (17.8%)
12 (20.3%)
0.6231
44 (13,1%)
93 (21.9%)
0.0006
14 (18.2%)
123 (18.0%)
0.9610
15 (26.8%)
122 (17.32%)
0.0746
Sakupljanje KMS u pedijatrijskih
bolesnika
Obilježja pedijatrijskih bolesnika (N=25)
SPOL (m/ž)
DOB god
TEŽINA kg
TBV mL
DIJAGNOZE
Neuroblastom
Mb. Hodgkin
Akutne leukemije
NHL
Ganglioneuroblastom
Ewingov sarkom
Meduloblastom
10/15
15 (3-18)
51 (16-67)
3483 (1135-4831)
8
7
6
1
1
1
1
Obilježja leukafereza u pedijatrijskih
bolesnika
Vrsta mobilizacije


kemoterapija + G-CSF
samo G-CSF
20 (80%)
5 (20%)
Venski pristup dvoluminalni centralni venski kateter



v. subclavia
v. jugularis
v. femoralis
10
2
13
Ukupan broj leukafereza 73

median (raspon)
2 (1-6)
Obilježja leukafereza u pedijatrijskih
bolesnika
COBE Spectra (MNC procedure): LVL
antikoagulans: ACD-A + heparin
grijač za krv Specra-THERM
volumen krvi u ekstrakorporalnoj cirkulaciji: 284 mL
bolesnici TT <25 kg: N=8
“primig” separatora s ozračenim koncentratom
eritrocita sa smanjenim brojem leukocita
trajno praćenje vitalnih funkcija (RR, puls, EKG)
nakoknada kalcija u infuziji
Rezultati sakupljanja autolognih stanica u
pedijatrijskih bolesnika
MNC x 108/kg TT
6,01 (0,97-12,73)
CD34+ x 106/kg TT
3,5 (0,19-28,01)
CFU-GM x 104/kg TT
66,31(3,6-180,7)
Sakupljen presadak (%)
21 / 25 (84,0%)
Nuspojave tijekom pedijatrijskih afereza
simptomi hipokalcemije uzrokovani citratom
(perioralne ili periferne parestezije)
4
problemi s centralnim venskim kateterom
2
(krvarenje, smetnje protoka)
Ukupno
6/73 (8,21%)
Alogene krvotvorne matične stanice
Sakupljanje alogenih KMS
iz periferne krvi u Zavodu za kliničku transfuziologiju
davatelji
(N=31)
afereze
(N=88)
16
14
12
10
8
6
4
2
0
1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 5. mj.
2005
Obilježja primatelja alogenih KMS (N = 31)
SPOL M/Ž
DOB god
TJELESNA TEŽINA kg
DIJAGNOZA









ALL
AML
CLL
CML
NHL
Mb Hodgkin
Ca renis
Aplastična anemija
SCID
10
6
2
5
2
1
1
3
1
17 (54,8%) / 14 (45,2%)
29 (0 – 53)
56 (8 – 100)
Obilježja srodnih davatelja alogenih KMS (N 31)
SPOL M/Ž
DOBgod
TJELESNA TEŽINAkg
SRODSTVO
13(41,9%) / 18(58,1%)
42 (11 - 77)
72 (35 - 108)
brat
sestra
majka
otac
11
10
8
2
(35,5%)
(32,3%)
(25,7%)
(6,5%)
identični
haploidentični
27
4
(87,1%)
(12,9%)
HLA PODUDARNOST
Mobilizacija i sakupljanje alogenih KMS
G-CSF (5-10 μg/kgTT)
4-5 dana
Cilj
“standardni” transplantat

CD34+ >3 x 106/kgTT primatelja
“mini transplant”

CD34+ >5 x 106/kgTT primatelja
haploidentični davatelj (CD34 selekcija
transplantata)
6
 “megadoze” CD34+ >10 x 10 /kgTT primatelja
Obilježja sakupljanja
Venski pristup
periferne vene (100%)
Stanični separator
COBE Spectra (MNC procedure)
LVV
kontinuirano praćenje vitalnih funkcija
(EKG, RR) u koronarnoj jedinici:
davateljica 76 god.
Obilježja leukafereza N = 88
median(raspon):
3 (1-5)
Ulazni protok krvi (mL/min)
63 (33-110)
Trajanje sakupljanja (min)
240 (106-300)
Volumen utrošenog ACD-A (mL)
868 (847-1208)
Ukupno procesiran volumen krvi(mL) 12509(4643-23782)
Procesiran ukupan volumen krvi (x) 3,08 (0,86-5,18)
Volumen pripravka (mL)
266 (97 – 496)
Rezultat sakupljanja alogenih stanica
TNC x 108/kg TT
21,66 (7,06-190,72)
MNC x 108/kg TT
20,23 (7,25-190,72)
CD34+ x 106/kg TT
5,11 (1,36 – 37,09)
Sakupljen transplantat 29/31 (93,5%)
Laboratorijske vrijednosti prije i nakon leukafereze
Parametar
Hb (mg/L)
prije
128 (110-161)
nakon
125(103-148)
NS
L (x 109/L)
40 (10-76)
26,4 (10,9-54,4)
0,0001
Tr (x 109/L)
141 (98-311)
88 (67-187)
0,0001
Ca (mmol/L)
2,39 (2,07-3,99)
2,39 (2-2,66)
NS
Nuspojave tijekom leukafereze
UKUPNO
14 / 88 (15,9%)
komplikacije venskog pristupa

bolovi u rukama, pucanje vena i smetnje protoka
glavobolja
hipokalcemija fascikulacije mišića lica, grčevi prstiju
alergijska reakcija urtike
8
3
2
1
Nuspojave zbog kojih su prekinute leukafereze
UKUPNO
•
•
3 / 88 (3,4%)
bolovi u rukama
pucanje vena i nemogućnost održavanja protoka
1
2
Regenereacija
tkiva
Stanična
terapija
Genska
terapija
Transplantacija
Vakcine
Matična
stanica