Transcript BTM GUARINI N1 - e

L’emocromo è l’esame specialistico
ed essenziale per l’ematologo
Indica che:
• Il midollo produce un numero
sufficiente di cellule mature di tutte
le linee emopoietiche
• Lo sviluppo di ogni linea emopoietica è
normale
EMOCROMO
• LA BUONA ESECUZIONE DEL
PRELIEVO
• IL TEMPO DAL PRELIEVO
• L’ANTICOAGULANTE IDONEO
• QUANDO USARE Na-Citrato COME
ANTICOAGULANTE
AUTOMAZIONE IN EMATOLOGIA
I “citometri automatici” sono in grado di contare
rapidamente un numero elevato di particelle e di
valutarne le dimensioni
Per queste caratteristiche possono in un tempo
molto breve fornire molti parametri con qualità
irraggiungibile dalle metodiche manuali
CONTATORE AUTOMATICO
CAMPIONE
Una porzione di sangue
viene lisata per:
Una porzione di sangue
viene diluita per:
- misurare la
concentrazione di
emoglobina
- contare il numero di
globuli bianchi
- contare i globuli rossi
- misurare il volume dei
globuli rossi
- contare le piastrine
GLOBULI ROSSI
PARAMETRI DIRETTI:
• CONTEGGIO GLOBULI
• DOSAGGIO Hb
• MCV
PARAMETRI DERIVATI:
• EMATOCRITO
• MCH
• MCHC
GLOBULI ROSSI
MCV = Mean Corpuscolar Volume
(fl = femtolitro)
MCH = Mean Corpuscolar Hemoglobin
(valore emoglobina/numero globuli rossi x 10)
MCHC = Mean Corpuscolar Hemoglobin
Concentration (valore emoglobina/
valore ematocrito)
NOMENCLATURA
•
•
•
•
•
•
•
ANISOCITOSI
ANISOPOCHILOCITOSI
MACROCITOSI
MICROCITOSI
IPOCROMIA
IPERCROMIA
MICROCITEMIA
CURVA DI DISTRIBUZIONE DEL VOLUME
ERITROCITARIO
CITOGRAMMA ERITROCITARIO DI VOLUME
E CONCENTRAZIONE DI EMOGLOBINA
macrocitosi
ipocromia
ipercromia
microcitosi
MICROCITOSI
Globuli Rossi = 4.710.000/ul
HGB = 10.6 g/dL
MCV = 70.0 fL
MACROCITOSI
Globuli Rossi =2.820.000/μl
HGB = 11,2 g/dL
MCV = 121,4 fL
V
O
L
U
M
E
Densità (concentrazione Hb)
Analisi RBC: citogramma volume/concetrazione
Macro
Y asse: Volumi
X asse: densità celllulare
120fl
60fl
Micro
Hgb.conc.
28g/dl
Ipo
41g/dl
Iper
RETICOLOCITI IN
AUTOMAZIONE
PARAMETRO ESSENZIALE NELLA DIAGNOSI DELLE
ANEMIE,ESPRIMONO LO STATO FUNZIONALE
DELL’ERITROPOIESI
LA STRUMENTAZIONE AUTOMATICA PERMETTE
UN CONTEGGIO ATTENDIBILE POTENDO
ANALIZZARE UN NUMERO DI EVENTI
SIGNIFICATIVO
RETICOLOCITI IN
AUTOMAZIONE
METODO: COLORAZIONI (auramina O,
arancio di tiazolo, oxazina, bleu di cresile)
evidenziano l’RNA dei reticolociti
PARAMETRI
% , VALORI ASSOLUTI, IRF
Analisi Reticolociti
High Angle (5-15 degrees)
GATED
Oxazine750 Absorption
GLOBULI ROSSI
RETICOLOCITI
L : Retic maturi
M : Retic a maturazione intermedia
H : Retic più immaturi, com maggiore qtà di RNA
•
•
2,98%
AUTOMAZIONE IN EMATOLOGIA:
FORMULA LEUCOCITARIA
- Contare correttamente le cellule normali
- Evidenziare la presenza di cellule
patologiche
-Identificare le cellule patologiche
FORMULA LEUCOCITARIA IN
AUTOMAZIONE
La presenza di cellule patologiche deve essere
sempre confermata e valutata insieme a tutti
i parametri dell’analisi dell’emocromo.
L’identificazione del tipo di cellula patologica
richiede ancor oggi l’uso di altri strumenti e/o
di altre metodiche.
Formula leucocitaria misurata con
metodo impedenziometrico
30
100
200
300
400
fL
V
o
l
u
m
e
Attività perossidasica
Intracellular Peroxidase
Flow Cytometric Analysis
1
5
2
3
4
Tecnologia Baso
BASOFILI
MONO + LINFO
NEUTR + EOSINO
BLASTI
LINFOCITOSI
LEUCOCITI =
16,600/μl
LINFOCITI =
12,100/μl
LUC= 14,0%
LEUCOCITI= 7.680
LEUCOCITOSI
149,000/μl
LMC
Peripheral Blood
Peripheral Blood
Basophil granulocyte
CONTEGGIO PIASTRINE
IMPORTANZA DELLA BUONA
ESECUZIONE DEL PRELIEVO
QUANDO NON E’ INDICATO
L’ANTICOAGULANTE EDTA
PARAMETRI PIASTRINICI
MPV = MEAN PLATELET VOLUME
PDW = PLATELET DISTRIBUTION WIDTH
PCT = PLATELETCRIT
SONO FORTEMENTE INFLUENZATI DALLE
CONDIZIONI E DAL TEMPO DI
ESECUZIONE DEL PRELIEVO
METODO ADVIA
volume
densità
PIASTRINE = 2,000/μl
Conteggi piastrinici non attendibili si
ottengono quando sono presenti
aggregati, oppure piastrine
giganti,oppure microciti o frammenti di
eritrociti o leucociti
PIASTRINE
78,000/μl
AGGREGATI
PIASTRINICI
Ethnic differences in normal blood cell values
Men
Caucasian
n=100
Afrocarribean
n=51
Women
African
n=65
Caucasian
n=100
Afrocarribean
n=51
African
n=50
White cell
count*
5.7(3.6-9.2)
5.2(2.8-9.5)
4.5(2.8-7.2)
6.2(3.5-10.8)
5.7(3.3-9.9)
5.0(3.2-7.8)
Neutrophil
count
3.2(1.7-6.1)
2.5(1.0-5.8)
2.0(0.9-4.2)
3.6(1.7-7.5)
3.0(1.4-6.5)
2.4(1.3-4.2)
Lymphocyte
count
1.7(1.0-2.9)
1.9(1.0-3.6)
1.8(1.0-3.2)
1.8(1.0-3.5)
2.0(1.2-3.4)
2.0(1.1-3.6)
Monocyte
0.34(0.18-0.62)
0.33(0.18-0.52)
0.29(0.15-0.58)
0.30(0.14-0.61)
0.31(0.16-0.59)
0.28(0.15-0.39)
Eosinophil
count
0.12(0.03-0.48)
0.13(0.03-0.58)
0.12(0.02-0.79)
0.13(0.04-0.44)
0.10(0.03-0.33)
0.10(0.02-0.41)
Platelet count
218(143-332)
196(122-313)
183(115-290)
246(149-374)
236(149-371)
207(125-342)
Hematological values for normal infants and children. Amalgamation of data
derived from various sources, expressed as mean ± 2SD or 95% range
Birth
Day 3
1 month
2 months
3-6 months
1 year
2-6 years
6-12 years
Red cell count
x 1012/l
6.0±1.0
5.3±1.3
4.2 ±1.2
3.7± 0.6
4.7± 0.6
4.5 ±0.6
4.6± 0.6
4.6 ±0.6
Hemoglobin
g/l
180 ±40
180± 30
140± 25
112± 18
126 ±15
126 ±15
125 ±15
135 ±20
0.60± 0.15
0.56± 0.11
0.43 ±0.10
0.35 ±0.07
0.35 ±0.05
0.34 ±0.04
0.37 ±0.03
0.40± 0.05
110 ±10
105±13
104±12
95±8
76±8
78±6
81±6
86±9
34±3
34±3
33±3
30±3
27±3
27±2
27±3
29±4
Mean cell Hb conc
(MCHC) g/l
330± 30
330± 40
330± 40
320± 35
330± 30
340± 20
340± 30
Reticulocytes
x 109 /l
120-400
50-350
20-60
30-50
40-100
30-100
30-100
30-100
18±8
15±8
12±7
10±5
12±6
11±5
10±5
9±4
Neutrophils
x 109 /l
4-14
3-5
3-9
1-5
1-6
1-7
1.5-8
2-8
Lympocytes
x 109 /l
3-8
2-8
3-16
4-10
4-12
3.5-11
6-9
1-5
Monocytes
x 109 /l
0.5-2.0
0.5-1.0
0.3-1.0
0.4-1.2
0.2-1.2
0.2-1.0
0.2-1.0
0.2-1.0
Eosinophils
x 109 /l
0.1-1.0
0.1-0.2
0.2-1.0
0.1-1.0
0.1-1.0
0.1-1.0
0.1-1.0
0.1-1.0
Platelets
x 109 /l
150-450
210-500
210-650
200-550
200-550
200-450
180-400
Packed cell volume
(PCV) l/l
Mean cell volume
(MCV) fl
Mean cell Hb
(MCH) pg
White cell count
x 109 /l
340± 30