Transcript Document

Définition d’un système nerveux ?
+ de cellules gliales que la normale
DEVELOPPEMENT DES CELLULES GLIALES CHEZ LA DROSOPHILE
SYSTEME NERVEUX = NEURONES + CELLULES GLIALES
V
E
N
T
R
A
L
L
A
T
E
R
A
L
SNC
SNP
Cerveau
22C10 (neurones)
Repo (cellules gliales)
Corde ventrale
Merge
Le ratio neurones/cellules gliales augmente avec l‘évolution
- drosophile: 10 neurones pour 1 cellule gliale
- homme: 1 neurone pour 1 (10) cellule gliale
Fonction des cellules gliales ?
- Support
- Nutrition des neurones
- Isolation électrique (Myelin)
- Modulation de la transmission synaptique…
CELLULES GLIALES DU SNC EMBRYONNAIRE ET LARVAIRE DE DROSOPHILE
SNC embryon
SNC larve LIII
Glial marqueur (Repo)
CELLULES GLIALES DU SNC ADULTE DE DROSOPHILE
SNC adulte
DIFFERENTS LIGNAGES PRODUISENT DES CELLULES GLIALES
Précurseurs neuraux purs
Neuroblaste (NB)
Glioblaste (GB)
NB
GB
NB
GMC
g
NB
NB
NB
NB
g
GMC
n
GMC
n
n
n
n
n
Plusieurs cellules gliales
DIFFERENTS LIGNAGES PRODUISENT DES CELLULES GLIALES
Précurseurs neuraux mixtes
Précurseurs neuraux purs
Neuroblaste (NB)
Neuroglioblaste (NGB)
Glioblaste (GB)
Type 1
(NGB6-4T)
Type 2
(NGB1-1A)
NGB
NGB
NB
GB
NGB
GMC
NB
NB
GMC
g
NB
NB
NB
NB
GB
g
n
GMC
GMC
n
GMC
n
n
n
n
NB
Plusieurs cellules gliales
GMC
n
n
Glie
Glie
n
n
g
n
GMC
NGB
n
g
DIFFERENTS LIGNAGES PRODUISENT DES CELLULES GLIALES
DIFFERENTS LIGNAGES PRODUISENT DES CELLULES GLIALES
Neuroblaste ?
Glioblaste ?
Neuroglioblaste ?
LES GENES gcm ET gcm2 CODENT POUR DEUX FACTEURS DE TRANSCRIPTION
HOMOLOGUES DANS LEUR DOMAINE DE LIAISON À L’ADN
Définition d’un
facteur de transcription ?
gcm = glial
cell missing
Autorégulation
LES GENES gcm ET gcm2 CODENT POUR DEUX FACTEURS DE TRANSCRIPTION
HOMOLOGUES DANS LEUR DOMAINE DE LIAISON À L’ADN
1
Protéine Gcm
504
N
L
S
DBD
P
E
S
T
AD
DBD: DNA Binding Domain
NLS: Nuclear Localisation Signal
PEST: Protein degradation motif
AD: Activation Domain
Autorégulation des gènes gcm-gcm2
30B
gcm
gcm2
1
2 3
4
5 67
8 9 10
1 kb
Gcm Binding Site (GBS) = AT(G/A)CGGG(C/T)
30C
PHENOTYPE DES MUTANTS gcm, gcm2 et gcm-gcm2
Mutant gcm
Mutant gcm2
Mutant gcm-gcm2
Glial marqueur (Repo)
Sauvage
Comment expliquer que:
1) le mutant gcm2 n’a pas de phénotype ?
2) le phénotype du double mutant gcm-gcm2 est plus fort que celui du mutant gcm ?
SUREXPRESSION DES GENES gcm, gcm2 et gcm-gcm2
Sauvage
GOF gcm
GOF gcm2
Comment expliquer que le phénotype gain de fonction
de gcm-gcm2 est plus fort que celui de gcm et gcm2 ?
GOF gcm-gcm2
A QUEL MOMENT LES GENES gcm-gcm2 SONT EXPRIMÉS ?
Précurseurs neuraux mixtes
Précurseurs neuraux purs
Neuroblaste (NB)
Neuroglioblaste (NGB)
Glioblaste (GB)
Type 1
(NGB6-4T)
Type 2
(NGB1-1A)
NGB
NGB
NB
GB
NGB
GMC
NB
NB
GMC
g
NB
NB
NB
NB
GB
g
n
GMC
GMC
n
GMC
n
n
n
n
NB
Plusieurs cellules gliales
GMC
n
n
Glie
Glie
n
n
g
n
GMC
NGB
n
g
A QUEL MOMENT LES GENES gcm-gcm2 SONT EXPRIMÉS ?
Précurseurs neuraux mixtes
Précurseurs neuraux purs
Neuroblaste (NB)
Neuroglioblaste (NGB)
Glioblaste (GB)
Type 1
(NGB6-4T)
Type 2
(NGB1-1A)
NGB
NGB
NB
GB
NGB
GMC
NB
NB
GMC
g
NB
NB
NB
NB
GB
g
n
GMC
GMC
n
GMC
n
n
n
n
NB
Plusieurs cellules gliales
GMC
n
n
Glie
Glie
n
n
g
n
GMC
NGB
n
g
LES GENES gcm ET gcm2 SONT NECESSAIRES ET SUFFISANTS
POUR INDUIRE LA DIFFERENTIATION GLIALE
Sauvage
Précurseur
Neural (PN)
NGB
PN
neurone Cellule gliale
Mutant gcms
NGB
PN
Surexpression gcms
NGB
PN
LES GENES gcm ET gcm2 SONT NECESSAIRES ET SUFFISANTS
POUR INDUIRE LA DIFFERENTIATION GLIALE
Sauvage
Précurseur
Neural (PN)
NGB
PN
Mutant gcms
Surexpression gcms
NGB
PN
NGB
PN
neurone Cellule gliale
Gène maître = suffisant pour induire
un programme développemental
Pax6
LES GENES gcm ET gcm2 NE SONT PAS SUFFISANTS
POUR INDUIRE LA DIFFERENTIATION GLIALE CHEZ LA LARVE
Sauvage
Gcm GOF
Repo (cellules gliales)
Comment expliquer que gcm-gcm2 sont capables d’induire
de la gliogénèse chez l’embryon mais pas chez la larve ?
COMMENT IDENTIFIER LES GENES CIBLES DES GENES gcm-gcm2 ?
Gcm et Gcm2 = facteurs de transcription
Phénotypes perte et gain de fonction chez l’embryon
COMMENT IDENTIFIER LES GENES CIBLES DES GENES gcm-gcm2 ?
Identification des séquences GBS dans le génome
Analyse par hybridations sur puces à ADN (LOF/GOF)
COMMENT IDENTIFIER LES GENES CIBLES DES GENES gcm-gcm2 ?
ARN gcm
ROLE NEUROGENIQUE DES GENES gcm-gcm2 CHEZ LA LARVE
LPCs
GPCs
Sauvage
gcm-gcm2 mutant
LN
ARN gcm2
LPCs
GPCs
Marqueur neuronal (Dac)
Précurseurs gliaux (GPCs) et
neuronaux (LPCs) de la lamina
Comment des gènes gliogéniques peuvent avoir un rôle neurogénique ?
LE GENE gcm1 DE POULET EST NECESSAIRE
ET SUFFISANT POUR INDUIRE DES NEURONES
c-gcm1 LOF
Tuj1
GFP
Sauvage
Tuj1 : marqueur neuronal
c-gcm1 GOF