Transcript IZOLOVANJE DNK IZ BILJNIH ĆELIJA

Kičmu svakog polinukleotidnog lanca DNK čine
fosfatni i šećerni ostaci nukleotida i ovi ostaci se
naizmenično smenjuju, dok se baze nukleotida
projektuju ka unutrašnjosti dvolančanog heliksa i
uspostavljaju vodonične veze. Ova struktura DNK
označena je kao sekundarna struktura DNK. Primarnu
strukturu DNK predstavlja redosled nukleotida u
jednom polinukleotidnom lancu.
Cilj vežbe:
Izolacija DNK iz različitih tipova plodova
Materijal:
- Luk, kivi, pomorandža, jabuka
- Ekstrakcioni rastvor (kašiku NaCl + 5ml deterdženta
+ destilovana voda)
- Filter papir
- Levak
- Epruvete
- Alkohol 96%
- Petrol-etar
- Blender
Oguliti i iseći 1/3 ploda kivija ili glavice crnog luka i staviti u
blender. Zatim dodati 3 ml
ekstrakcionog rastvora i sačekati 10ak sekundi. Deterdžent
je u stanju da dezintegriše ćelijsku
membranu i time se oslobađa DNK iz nukleusa. Dodavanjem
ekstrakcionog rastvora se smanjuje
površinski napon i povećava permeabilitet membrane.
Nakon mlevenja u blenderu, sadržaj preneti
na filter papir i dobijenu kašu profiltrirati u epruvetu. Po
završenoj filtraciji izvršiti precipitaciju
DNK molekula uz stalno mešanje i dodavanje 6 ml alkohola
i 3 ml petrol-etra.Alkohol je "zarobio"
vlakna, jer se ne rastvaraju u njemu već samo u vodi.
DNK se može jasno zapaziti u vidu kraćih ili dužih
beličastih niti, a dužina niti zavisi od biljne vrste.