Transcript Arabidopsis
Genome-Wide Analysis of the Core DNA Replication Machinery in the Higher Plants Arabidopsis and Rice Randall W. Shultz2, Vinaya M. Tatineni, Linda Hanley Bowdoin*, and William F. Thompson Arabidopsis thaliana Arroz (Oryza sativa) Denise Raddatz Mota Replicación del ADN en Eucariontes • Numerosos complejos de multiproteínas. - Iniciación - Elongación - Maduración de los fragmentos de Okasaki ¿Qué se sabe sobre la Maquinaria de la Replicación del ADN? Levaduras Modelo Animal > Plantas • Combinación de información experimental publicada con análisis bioinformáticos de la secuencia genómica en Arabidopsis y arroz. Estrategia • Ensamblaje de base de datos a partir de las proteínas (maquinaria de replicación del ADN) de levadura y animal. • Se obtuvo la base de datos del genoma traducido de Arabidopsis con el algoritmo BLAST. • Las secuencias de Arabidopsis se utilizaron para encontrar homólogos en arroz. • Para el análisis filogenético de las proteínas se utilizó el programa ClustalW. • Para el alineamiento de las múltiples secuencias de complejos de proteína se utilizó el algoritmo ClustalW. Maquinaria de la Replicación del ADN en Eucariontes Pre-iniciación Complejo de pre-replicación (pre-RC): ORC1-6 + CDC6 + MCM2-7 Iniciación Supercomplejo con función de helicasa: GINS + MCM2-7 +CDC45 Elongación GINS + MCM2-7 +CDC4 5 + Pol E Maduración Fragmentos de Okasaki: Pol D + FEN1 + LIG 1 + PCNA Genes de la Maquinaria de Replicación de ADN en la Pre-Iniciación Genes de la Maquinaria de Replicación de ADN en la Iniciación Genes de la Maquinaria de Replicación de ADN en la Elongación Genes de la Maquinaria de Replicación de ADN en la Elongación Genes de la Maquinaria de Replicación de ADN en la Maduración Alineamientos de Secuencias Múltiples de proteína ORC6 Alineamientos de Secuencias Múltiples de proteína PSF1 Alineamientos de Secuencias Múltiples de proteína PSF2 Alineamientos de Secuencias Múltiples de proteína PSF3 Alineamientos de Secuencias Múltiples de proteína SLD5 PSF1 PSF2 PSF3 SLD5 Múltiples Copias de Genes de la Maquinaria de Replicación de ADN GENE ORC1 CDC6 CDT1 CDC45 TOPBP1 PSF3 POLD4 POLE1 POLE2 POLE3 POLE4 PCNA RPA1 RPA2 RPA3 FEN1 LIG1 Humano 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 1 1 1 Levadura 1 1 1 1 1 1 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Arabidopsis 2 2 2 1 2 2 1 2 1 GF GF 2 5 2 2 1 3 Arroz 1 1 2 2 3 1 2 1 2 GF GF 1 3 3 1 2 1 Conclusiones • La maquinaria de replicación del ADN de animales y levaduras, está conservada en plantas, mostrando muchas características en común con otros eucariontes y otras que son únicas en plantas. • Las proteínas de replicación del ADN en plantas, son más similares a las del humano que a las de levaduras. • Los modelos animales pueden ser más importantes para el estudio de replicación del ADN en plantas que los de levadura.