Transcript MELAN-A CEA MELAN-A S100 CEN 7 Yq12

Opsporing melanoom
Het lokaliseren van de primaire tumor van een metastase door analyse met een zelfgebouwde compound microscoop en biomarkers.
Deniz Ugurlu, Jet Bloem, Sven Eijpe, Patrick Blokzijl, Gaston Gabriel, Birgit Maas, Yaela Amsing, Marleen van der Weij
Introductie
Observaties met microscoop
Kanker is een groot gezondheidsprobleem over de hele wereld. Om
de levensverwachting van patiënten met kanker te verhogen, wordt
er veel onderzoek gedaan naar de ziekte. Belangrijk voor de
behandeling is waar een metastase vandaan komt. Tegenwoordig
wordt de oorsprong van een metastase achterhaald met behulp van
biomarkers. In dit onderzoek wordt een metastase in de lever
onderzocht. Het doel is om de oorsprong van deze metastase te
achterhalen met geschikte biomarkers en een zelfgebouwde
compound microscoop. Er zijn drie mogelijke primaire tumoren:
coloncarcinoom, maagcarcinoom of melanoom. In de HE coupe zijn
melanine makende cellen te zien, deze wijzen op een metastase
van melanoom. De kwantitatieve analyse wordt
gedaan door middel van immunohistochemie
(IHC). De tumorheterogeniteit en
proliferatiesnelheid wordt hiermee onderzocht.
Om chromosomale afwijkingen op te sporen en
Melanocyt in lever HE geslachtsbepaling wordt chromatische in situ
coupe
hybridisatie (CISH) gebruikt.
Methode
• 8 verschillende IHC primaire antilichamen van DAKO en SIGMA
toegevoegd aan 2 µm coupes.
Ki-67 (gezond)
PCNA (gezond)
Cdx-2
Ck 7
CEA
Ki-67
PCNA
MELAN-A
CDX2
CK7
CK20
PCNA
(proliferatie)
Ki67
(proliferatie)
Melanoom
✓
✕
✓
✕
✕
✕
✓
✓
Maagcarcinoom
✕
✓
✕
✓
✓
✕
✓
✓
Coloncarcinoom
✕
✓
✕
✓
✕
✓
✓
✓
CISH (Zytovision):
Biomarker Centromeer 7
Biomarker Yq12
 identificatie chromosomale afwijking
 geslachtsbepaling
Ck20
S100 Duplo
S100
Melan-A Duplo
Melan-A
0%
Positief MELAN-A  duidt op
melanoom
Minder positief  de tumor
heeft hoge heterogeniteit
S100
CEA
10%
20%
30%
40%
Aangekleurd
50%
60%
70%
80%
90%
100%
Niet aangekleurd
Discussie
Verbetervoorstellen eigen compound licht microscoop
• Opstelling: Lens verder van webcam → hogere vergroting &
verminderde aberratie.
Eigen mic
• Gebruikte materialen: Lenzen → niet goed geslepen, vies en
beschadigd.
Biomarkers:
S100
Resultaten
Percentage Aangekleurd per Biomarker
MELAN-A
• De coupes worden bekeken met een commerciële microscoop en
onze zelf gebouwde microscoop.
Melan-A CEA
Groep 2
Positief S100  duidt op
melanoom
CEN 7
Negatief  Versterkt ons
vermoeden  Niet maag/colon
• Vermindering non-chromatische aberratie → combinatie positieve en
negatieve lenzen.
Verbetervoorstellen onderzoek biomarkers
• Aansnijfenomeen
Yq12
Conclusie
Eigen mic
Bouw van de microscoop
 veel mutaties
 duidt op kanker
Geen spots  geen #Y
 Patiënt is vrouwelijk
Validatie van eigen microscoop (Ck 7)
Commerciële microscoop
Eigen microscoop
Er is bevestigd en bepaald dat de coupe leverweefsel bevat met
gemetastaseerde kankercellen. Met IHC biomarkers is er
geconcludeerd dat de metastase afkomstig is van een melanoom.
CISH biomarkers hebben chromosomale afwijkingen aangetoond
van chromosoom 7 en bepaald dat het weefsel afkomstig is van een
vrouwelijke patiënt. De resultaten van IHC en CISH zijn bekeken
met de zelfgebouwde compound microscoop, waarbij er goed
onderscheid gemaakt kan worden tussen kankerweefsel en gezond
weefsel. Kortom, melanoom is onze kanker en dit is te identificeren
met de zelfgemaakte compound microscoop.
Voor meer foto’s, informatie en referenties 