Transcript Ontogenia de la Serie Blanca

Serie Blanca: Morfología y
Citoquímica
Kevin Goad
Katherine Miranda
Moisés Serrano
Moisés Serrano
Morfología de células halladas en frotis de sangre periférica de un individuo normal.
Célula madre
Mieloblasto
Monoblasto
Linfoblasto
Promonocito
Prolinfocito
Promielocito
Mielocito
Metamielocito
Célula en banda
Monocito
Célula segmentada
Linfocito
Estadios de Maduración en la
Granulopoyesis
MIELOBLASTO
PROMIELOCITO
MIELOCITO
METAMIELOCITO
BANDA
SEGMENTADO
TAMAÑO
NUCLEO
Mieloblasto
FORMA
Grande, oval, amorfo
COLOR
púrpura
CROMATINA
NUCLEOLO
COLOR
CITOPLASMA
11 a 18 µm
CONTENIDO
Laxa, fina, aspecto
reticulado
2a5
Escaso e
intensamente
basófilo
No posee
granulaciones
TAMAÑO
NUCLEO
Promielocito
FORMA
Excéntrico, redondo
COLOR
púrpura
CROMATINA laxa
NUCLEOLO
CITOPLASMA
10 – 20 µm
puede o no tener
COLOR
Menos basófilo que
el mieloblasto
CONTENIDO
Granulaciones
azurófilas oscuras
(primarias).
Contienen: fosfatasa
ácida, lisozima,
mucopolisacáridos
sulfatados y
proteínas básicas
TAMAÑO
Mielocito
FORMA
12 – 18 µm
Excéntrico, redondo u
oval. Menor tamaño
NUCLEO
Mieloblasto
Promielocito
CROMATINA Más gruesa
NUCLEOLO
No tiene
Metamielocito
Célula en banda
Célula segmentada
CITOPLASMA
Mielocito
CONTENIDO
Aparecen
granulaciones
secundarias
específicas, que
varían dependiendo
de la afinidad y que
pueden cubrir el
núcleo
TAMAÑO
Mielocito Neutrófilo
NUCLEO
FORMA
Excéntrico, redondo u
oval. Menor tamaño
CROMATINA Más gruesa
NUCLEOLO
CITOPLASMA
12 – 18 µm
No tiene
COLOR
Granulaciones
azurófilas
CONTENIDO
Aparecen
granulaciones
secundarias
específicas.
TAMAÑO
Mielocito Eosinófilo
NUCLEO
FORMA
Excéntrico, redondo u
oval. Menor tamaño
CROMATINA Más gruesa
NUCLEOLO
COLOR
CITOPLASMA
12 – 18 µm
CONTENIDO
No tiene
Granulaciones
grandes color rojo
ladrillo
Aparecen
granulaciones
secundarias
específicas.
TAMAÑO
Mielocito Basófilo
NUCLEO
FORMA
Excéntrico, redondo u
oval. Menor tamaño
CROMATINA Más gruesa
NUCLEOLO
COLOR
CITOPLASMA
12 – 18 µm
CONTENIDO
No tiene
Granulaciones
grandes color
púrpura oscuro
Aparecen
granulaciones
secundarias
específicas.
Granulaciones
grandes color
púrpura oscuro
TAMAÑO
Metamielocito
FORMA
1 – 18 µm
Tiene apariencia de
frijol
NUCLEO
Mieloblasto
Promielocito
CROMATINA Compacta
NUCLEOLO
No tiene
Metamielocito
Célula en banda
Célula segmentada
CITOPLASMA
Mielocito
CONTENIDO
Granulaciones
secundarias
específicas, que
varían dependiendo
de la afinidad de la
célula y que pueden
cubrir el núcleo
TAMAÑO
Metamielocito Neutrófilo
NUCLEO
FORMA
Tiene apariencia de
frijol
CROMATINA Compacta
NUCLEOLO
COLOR
CITOPLASMA
1 – 18 µm
CONTENIDO
No tiene
Granulaciones
azurófilas
Granulaciones
secundarias los cuales
contienen: fosfatasa
alcalina, lisozima,
aminopeptidasas,
colagenasa y proteínas
básicas.
Se puede apreciar un
'sol naciente' por las
características núcleocitoplasma.
TAMAÑO
Metamielocito Eosinófilo
NUCLEO
FORMA
Tiene apariencia de
frijol
CROMATINA Compacta
NUCLEOLO
CITOPLASMA
1 – 18 µm
No tiene
COLOR
Granulaciones
grandes color rojo
ladrillo
CONTENIDO
Granulaciones
secundarias los
cuales contienen:
fosfatasa alcalina,
lisozima,
aminopeptidasas,
colagenasa y
proteínas básicas.
Afinidad con eosina
TAMAÑO
Metamielocito Basófilo
NUCLEO
FORMA
Tiene apariencia de
frijol
CROMATINA Compacta
NUCLEOLO
COLOR
CITOPLASMA
1 – 18 µm
CONTENIDO
No tiene
Granulaciones
grandes color
púrpura oscuro
Granulaciones
secundarias los
cuales contienen:
fosfatasa alcalina,
lisozima,
aminopeptidasas,
colagenasa y
proteínas básicas.
TAMAÑO
Célula en Banda
FORMA
NUCLEO
Mieloblasto
Promielocito
10 – 16 µm
Indentación
pronunciada con forma
de herradura
CROMATINA Compacta
NUCLEOLO
No tiene
Metamielocito
Célula en banda
Célula segmentada
CITOPLASMA
Mielocito
CONTENIDO
Granulaciones
secundarias
específicas, que
varían dependiendo
de la afinidad de la
célula y que pueden
cubrir el núcleo
TAMAÑO
Neutrófilo en Banda
NUCLEO
FORMA
Indentación
pronunciada con forma
de herradura
CROMATINA Compacta
NUCLEOLO
COLOR
CITOPLASMA
10 – 16 µm
CONTENIDO
No tiene
Granulaciones
azurófilas
Granulaciones
secundarias
específicas, que
varían dependiendo
de la afinidad de la
célula y que pueden
cubrir el núcleo
TAMAÑO
Eosinófilo en Banda
CITOPLASMA
NUCLEO
FORMA
10 – 16 µm
Indentación
pronunciada con forma
de herradura
CROMATINA Compacta
NUCLEOLO
No tiene
COLOR
Acidófilo
CONTENIDO
Granulaciones
secundarias
específicas, que
varían dependiendo
de la afinidad de la
célula y que pueden
cubrir el núcleo
TAMAÑO
Basófilo en Banda
NUCLEO
FORMA
Indentación
pronunciada con forma
de herradura
CROMATINA Compacta
NUCLEOLO
COLOR
CITOPLASMA
10 – 16 µm
CONTENIDO
No tiene
Granulaciones
grandes color
púrpura oscuro
Granulaciones
secundarias
específicas
Pueden cubrir el
núcleo
TAMAÑO
8 – 14 µm
Célula segmentada
FORMA
Lobulaciones
NUCLEO
Mieloblasto
Promielocito
CROMATINA Compacta
NUCLEOLO
No tiene
Metamielocito
Célula en banda
Célula segmentada
CITOPLASMA
Mielocito
CONTENIDO
Granulaciones
secundarias
específicas, que
varían dependiendo
de la afinidad de la
célula y que pueden
cubrir el núcleo
TAMAÑO
Neutrófilo segmentado
NUCLEO
FORMA
2 a 5 segmentos unidos
por cromatina
CROMATINA Compacta
NUCLEOLO
COLOR
CITOPLASMA
12 – 14 µm
CONTENIDO
No tiene
Granulaciones
azurófilas
Gránulos numerosos
y finos de color
violeta rojizo que se
distribuyen
uniformemente
TAMAÑO
NUCLEO
FORMA
bilobulado
CROMATINA Compacta, densa
NUCLEOLO
CITOPLASMA
Eosinófilo
segmentado
8 – 12 µm
No tiene
COLOR
Granulaciones
grandes color rojo
ladrillo
CONTENIDO
Granulaciones
grandes, esféricas y
numerosas color
rojo ladrillo que
rodean al núcleo
TAMAÑO
Basófilo segmentado
NUCLEO
FORMA
polimorfismo
CROMATINA Compacta
NUCLEOLO
COLOR
CITOPLASMA
8 – 10 µm
CONTENIDO
No tiene
Granulaciones
grandes color
púrpura oscuro
Numerosos gránulos
color púrpura que
cubren casi todo el
núcleo
Monoblasto
• Tamaño celular:
Diametro de 15 – 20 um
• Núcleo:
-Irregular.
Presenta muesca o
circunvalacion
-Cromatina fina y
nucleolos
• Citoplasma:
-Basófilo
-Puede presentar
vacuolas.
Promonocito
• Núcleo:
-Cromatina mas
condensada
• Citoplasma:
-Basófilo
Monocito
• Tamaño celular: Diametro de
15 – 20 um
• Núcleo:
-Grande e irregular.
-Presenta muesca o
circunvalacion
-Cromatina finamente
reticulada que se tiñe con
suave intensidad.
• Citoplasma:
-Abundante
-Ligeramente basófilo con o
sin vacuolas
-Granulaciones azurofilas
finas.
Linfoblasto
• Tamaño celular:
Diametro de 15 – 20 um
• Núcleo:
-Grande y redondo.
-Cromatina fina
-Frecuente observar
nucleolos
• Citoplasma:
-Basófilo
-Sin granulaciones.
Prolinfocito
• Tamaño celular: diámetro
de 15 um.
• Núcleo:
-Cromatina mas finamente
dispersa que la del linfocito
-nucleolos
• Citoplasma:
-Basófilo
-Sin granulaciones.
Linfocito
• Tamaño celular: 5 – 12 um
los de escaso citoplasma.
15 – 20 um los de
abundante citoplasma.
Núcleo:
-Redondo u oval
-Cromatina densa
Citoplasma:
-Ligeramente basofilo
-Escaso o abundante
-Pueden presentarse escasa
granulacion de color rojo
purpura o azurofilas,
denominadas perforinas.
Kevin Goad
Citoquímica
• La citoquímica estudia la composición química de la
célula y permite detectar la localización topográfica de
algunos principios inmediatos, enzimas, metales
pesados y otras sustancias. Se considera como un nexo
de unión entre la morfología y la bioquímica.
• Los componentes celulares que son posibles revelar
con el estudio citoquímico son:
1. Enzimas (oxidantes e hidrolíticas)
2. Glucógeno
3. Lípidos
Peroxidasa
• La demostración citoquímica de esta enzima se basa en
la acción oxidante de la peroxidasa sobre el substrato,
bencidina, en presencia de peróxido de hidrógeno,
apareciendo un precipitado amarillo ocre en el lugar
del citoplasma en donde se ha producido la reacción.
• La mieloperoxidasa se sintetiza en el retículo
endoplasmático rugoso, de donde pasa a las cisternas
del aparato de Golgi quedando localizada
fundamentalmente en la granulación 1ª o azurófila.
Se localiza sobre todo, en los gránulos primarios de los
neutrófilos y precursores, así como en los gránulos de
los eosinófilos y monocitos.
Peroxidasa
Peroxidasa
NEGRO B DE SUDÁN
• Es una coloración no enzimática útil en
patología mieloide. Tiñe los fosfolípidos y
otros lípidos, colorea los gránulos azurófilos y
específicos de los granulocitos y tiene la
ventaja de que con el tiempo no disminuye la
actividad. Los neutrófilos segmentados y sus
precursores muestran unos gránulos gruesos
en el citoplasma de color gris muy oscuro.
NEGRO B SUDÁN
Cuadro comparativo Peroxidasa- Negro
B Sudan.
Célula
Peroxidasa
Negro B Sudan
Mieloblasto
Cuerpo de Auer
Cuerpo de Auer
Granulocitos
+++
+++
Monocitos
+
+
Linfocitos
---
---
Fosfatasas Alcalina
• La fosfatasa alcalina hidroliza monoésteres del ácido
fosfórico, actuando a un pH de 9,1 a 9,6. La demostración
citoquímica se basa en la hidrólisis de ciertos substratos,
de los cuales se liberan unos productos intermedios que
combinados con una sal diazoica dan un precipitado
coloreado en el citoplasma celular.
• Se encuentra actividad FA en algunas células maduras y
semimaduras de la granulopoyesis neutrófila (bandas y
segmentados).
• Su Utilidad primordial es distinguir síndromes
mieloproliferativos ( FAG disminuido) Versus las
reacciones neutrofilas secundarias a procesos infeccioso
(FAG aumentado) .
Fosfatasa Alcalina
• No todos los granulocitos presentan el mismo grado de
positividad; en función de este dato se establece un
índice de actividad de FA. Se pueden distinguir 5 tipos
de reacción:
Grado
Nivel de
positividad
Multiplo en la
escala del FAG
Grado 0
--
0
Grado 1
-+
1
Grado 2
+
2
Grado 3
++
3
Grado 4
+++
4
Fosfatasa Alcalina
• Se realiza un recuento sobre 100 granulocitos asignando a
su valor según grado .Se suman los valores y el número
obtenido es el índice de FAG, que tiene un valor mínimo de
0 y máximo de 400. El índice normal oscila entre 20 y 100.
##de
degrado
gradode
de
actividad
actividadde
de FAG
FAG
## de
decélulas
células
observadas
observadas
FAG
FAG
00
20
90
37
00
11
23
10
43
23
10
43
22
27
0
16
54
0
32
33
19
0
4
57
0
12
44
60
24
0
55
50
25
0
total
total
100
100
183
10
87
Fosfatasa Alcalina
Fosfatasa Ácida
• Es una enzima hidrolítica perteneciente al grupo de las
fosfomonoesterasas, que actúa sobre los ésteres del
ácido fosfórico; su pH óptimo de actuación oscila
entre 4,7 y 5,5. Se trata de una enzima de ubicación
lisosómica.
• La demostración citoquímica se basa en la hidrólisis
del substrato naftol-AS-Bi-fosfato, liberándose unos
productos intermedios que al combinarse con una sal
diazoica dan un precipitado de color rojo anaranjado
en el citoplasma.
Fosfatasa Ácida
• La tricoleucemia (o leucemia de células peludas es un
síndrome linfoproliferativo crónico de células B) es un
proceso linfoproliferativo en que el estudio de la FA
ofrece un particular interés por cuanto la actividad
enzimática a pesar de ser una célula linfoide es difusa,
intensa y tartrato resistente. Se utiliza para demostrar
la isoenzima 5 en el tricoleucocito.
• De todas formas, con el advenimiento de los
anticuerpos monoclonales, la técnica citoquímica en el
estudio de los síndromes linfoproliferativos crónicos ha
perdido predicamento.
Fosfatasa Ácida
Esterasas
• Esterasas Específicas
• Esterasas No específicas
Esterasas Específicas
• Se realiza mediante la tinción de Naftol AS-D
Cloroactetato esterasa (NASD) , el reactivo
actúa sobre esterasas cloradas y que
precipitan como gránulos gruesos.
• Prueba + linea celular Mielocitica.
• Los cuerpos de auer son positivos por que la
tinción es similar en sensibilidad a la Negro B
Sudán.
Esterasa específica
Esterasa Inespecífica
• La mayoria de las tinciones no específicas se
observan en la línea Monocitica.
• Esta tinción utiliza el Naftil Butirato que
precipita las esterasas en forma de gránulos
coloreados , observandose mayor presencia
en MONOCITOS.
Esterasa Inespecifíca
PAS- Reacción del ácido peryodico de
Schiff.
La reacción de PAS se basa en la rotura de los
enlaces
-C-Cpresentes
en
los
carbohidratos(glucogeno) por la acción del
ácido peryódico, potente agente oxidante,
liberándose grupos aldehído que al
combinarse con el reactivo de Schiff dan un
compuesto de color rojo púrpura intenso.
Identifica al glucógeno en el citoplasma
celular.
PAS
Tinciones Citoquímicas
Peroxidasa / Negro Sudán
Leucemia Mielocitica Aguda
Leucemia Monocitica Aguda
Leucemia Linfocitica
Esterasas
Específica
Leucemia
Mielocítica
aguda
No Inespecífica
Leucemia
Monocitica
aguda
Leucemia
Mielomonocitica
aguda
Linfocitos B
Marcadores
celulares
Células NK
Linfocitos T
Tinción
Reactivos
Tipo de reacción
Utilidad
Peroxidasa
Bencidina + H2O2
Enzimática
Discriminación de
Células
Mielomonocíticas
Negro B sudán
Tinte Negro B sudán
Tinción de Fosfolípidos
Discriminación de
Células
Mielomonocíticas
Fosfatasa Alcalina
Fosfatasa y pH 9.1 a
9.6
Coloración de gránulos
Sindrome
Mieloproliferativo (FAG
disminuido.)
Fosfatasa Ácida
Fosfatasa y pH 4.7 a 5.5
y substrato naftol-ASBi-fosfato
Coloración de células B
Tartaro resistente
Identificación de
Tricoleucemias(
Leucemia de Célula B
peluda).
Esterasa Específica
Naftol AS-D
cloroacetato esterasa
Enzimática
precipitación de
esterasa
Leucemia Mielocítica
aguda
Esterasa Inespecífica
Naftil Butirato
Enzimática
precipitación de
esterasa
Leucemia Monocítica
aguda
PAS
Ácido Peryodico de
Schiff
Ruptura de C-C
Leucemias agudas.
Valoración del Sistema Inmune
Por: Katherine Miranda
HUMORAL
CELULAR
INMUNIDAD
PMN
M
CPA
LB
TH
TC
TD
TS
1ª línea de defensa.
> Acción sobre
bacterias piógenas
Gránulos azurófilos o primarios:
mieloperoxidasa, proteasas neutras,
betaglucoronidasa, hidrolasas ácidas,
fosfatasa ácida, catepsinas, defensinas
Función fagocítica,
pinocítica y bactericida.
Gránulos secundarios,
más pequeños:
lisozima, fosfatasas alcalina,
lactoferrina, colagenasa
 2ª línea de defensa
 Principales productores de
citocinas del S.I. Innato (IL-1,
IL-6, IL-8, IL-12, TNF-α)
Funciones:
a) Fagocitosis
b) CPA
c) Moderan la R.I.
d) Hemostasia
e) Intervención en metabolismo
de hierro
Macrófagos de la
microglia
Macrófagos de los Ganglios
linfáticos
Macrófagos
alveolares
Células de Kupffer
(hepáticas)
Macrófagos esplénicos
(sinusoidales)
Macrófagos mesangiales
Osteoclastos
Células A (sinoviales)
Macrófagos peritoneales
Los linfocitos T colaboradores reconoce
el antígeno y se liga al macrófago 
estimula la producción de sustancias
químicas (IL-1, TNF/ IL-2, INF-‫)ץ‬
Eosinófilos
• La mayoría son atraídos por quimiotaxis.
• Regulan la respuesta alérgica y las reacciones
de hipersensibilidad mediante la
neutralización de la histamina por la
histaminasa.
• Receptores para IgE.
• Acción en alergia y en la defensa contra
parásitos.
Eosinófilos
• Juegan un papel de defensa del huésped
frente a microorganismos no fagocitables,
poseen:
– función citotóxica (por sus proteínas granulares).
– inmunorreguladora (por las citocinas que libera).
– son capaces de participar en la reparación y
remodelación tisular (liberando TGF-β).
Mediador de la
Inflamación
0-1 % en S.P.
Célula
Función (es)
Sangre Periférica (%)
Neutrófilo
Fagocítica, Pinocítica, Bactericida.
50-70
Monocito
Fagocitosis
2-6
Eosinófilo
Parasitemias, Reacciones alérgicas
2-4
Basófilo
Mediadores de la inflamación
0-1
Linfocitos T
Respuesta Celular: Activan LB,
Defensa microbiana, modulan la
respuesta inmune
70
Linfocitos B
CPA, Cél. Prod. de Inmunoglobulinas,
Respuesta Humoral
20
Células NK
Identificación y Destrucción de células
foráneas
10
Preguntas ????
Referencias
- Libro Cuestiones en Hematología edición 2002,
editorial Elsevier, España, ISBN: 8481746088
- Manual Amir Hematología – edición 2009
- Manual CTO Hematología séptima edición, autor grupo
CTO.
- Manual de Laboratorio de Hematología de la facultad
de medicina de la Universidad de Panamá. Autor: Dr.
Altafulla 2003.
Imágenes cortesía de www.telmeds.org